一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法技术

本发明专利技术提供一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，仅用泡桐花药材进行多糖提取制备成中药免疫增强剂，并取18日龄非免疫雏鸡使用新城疫Ⅳ滴鼻、点眼首次免疫，32日龄时进行二次免疫，每次免疫的同时，给雏鸡经口灌服泡桐花多糖溶液，给药剂量为12.5‑50mg/kg体重，每日1次，连续给药3天。在首免后的第7天、第14天、第21天和第28天进行测定，发现泡桐花多糖可明显促进鸡外周血和脾脏淋巴细胞增值，提升ND‑HI抗体水平，提高免疫器官指数，提高血清中IL‑4、IL‑6、IFN‑g等细胞因子浓度，提高十二指肠SIgA含量，从而提高机体的免疫能力，增强疫苗的免疫效果。

【技术实现步骤摘要】
一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法
本专利技术属于免疫增强剂领域，尤其涉及一种禽畜使用的中药免疫增强剂。
技术介绍
近些年来，我国畜牧业飞速发展，随之而来重大动物疫病给畜牧业造成的风险日渐突出，尤其是近年来禽流感、鸡新城疫、猪繁殖与呼吸道综合征、猪圆环病毒病、猪瘟等畜禽传染病的流行，畜牧业遭受巨大冲击，甚至危及到了公共卫生安全，使我国畜牧业当前和未来的健康发展受到严重影响。这些危害大的疫病，绝大多数属于病毒性传染病，且一些属于免疫抑制性疾病。迄今为止，人们还没有找到有特效的治疗药物。除了加强饲养管理外，给动物接种疫苗是预防和控制动物疫病的一项重要的、有效的手段。而提高疫苗的免疫效果和增强动物机体的抗病能力是动物产生高水平免疫保护力的重要措施，因此免疫增强剂成为近些年来研究的热点问题。免疫增强剂是通过一定途径来提高机体对抗原或微生物特异性反应的一类物质，也称免疫佐剂。一些传统的免疫佐剂存在许多不尽人意之处，如弗氏完全佐剂和铝盐佐剂，不能诱发很强的细胞免疫，也不能诱发迟发型超敏反应；弗氏不完全佐剂表现黏稠，能造成组织损伤，还可能有致癌作用。其后蜂胶佐剂、乳酸杆菌DNA免疫佐剂和脂质体佐剂被广泛研究，但以上三种佐剂成本较高，效果不太稳定，限制了其在临床广泛的应用。中药是我国传统医学的瑰宝，物质基础为天然产物，具有结构丰富、活性独特、毒副性低、作用靶点多样等特点，是创新药物的重要来源。随着人们健康意识的增强，以中药或中药成分为代表的兽用免疫增强剂以其优异的免疫功效、安全、无残留而倍受重视，成为近年来我国新兽药研发的主要研究方向。在专利号为CN201310365016.8的专利中，提供的一种提高肉鸡免疫力的中草药制剂，这种药剂主要用于添加在禽畜日常饲料中，且是全程添加。除该专利外，另外也已公开了多项中药免疫增强剂的技术方案，但是这类技免疫增强剂在使用过程中，都是全程添加于禽畜饲料中，这便要求每日喂养前都需要在饲料中加入中药增强剂并且混合搅拌，以达到充分混合的目的，及其不方便。同时，虽然每天增加的量少，但是养殖全程喂养所需的中药剂量还是很大，并且每天的量越小其混合难度越大，存在严重不足。
技术实现思路
为解决以上问题，本专利技术旨在提供一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，取泡桐花药材提取其多糖制成中药免疫增强剂，其制备与使用步骤如下：（1）取泡桐花药材，加水润湿洗涤去泥浆；（2）加入润湿前泡桐花药材10倍重量的水，并进行2次煎煮，每次煎煮结束后将煎液滤过；将2次滤液合并，并进行浓缩得到浓缩液；（3）将浓缩液进行离心并取上液；（4）在离心下液中加入离心下液4倍重量的乙醇，并进行搅拌，搅拌后静置12h以上；（5）将静置液的上液取出丢弃后，再取出静置液的下液得膏状物；（6）将膏状物在75℃温度下减压干燥至恒重，再粉碎即得粗制泡桐花多糖中药免疫增强剂；（7）使用硫酸苯酚法测定粗制泡桐花多糖中药免疫增强中的泡桐花多糖含量；（8）取18日龄非免疫雏鸡，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行首次免疫，首次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5-50mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg-50mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂；（9）待步骤（8）中的雏鸡到达32日龄时，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行二次免疫，二次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5-50mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg-50mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂。较佳的，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为25mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含25mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂：假如通过步骤（7）中测定泡桐花多糖中药免疫增强剂中的泡桐花多糖含量为50%，则每1kg重的雏鸡灌服50mg的泡桐花多糖中药免疫增强剂；假如通过步骤（7）中测定的泡桐花多糖中药免疫增强剂中的泡桐花多糖含量为60%，则每1kg重的雏鸡灌服41.67mg的泡桐花多糖中药免疫增强剂。较佳的，步骤（2）中两次煎煮的具体步骤如下：第一次煎煮时，加入润湿前泡桐花药材10倍重量的水，并煎煮2h；第二次煎煮时，加入润湿前泡桐花药材10倍重量的水，并煎煮1h。较佳的，上述步骤（1）中润湿前泡桐花药材重量以g计算，步骤（2）中浓缩得到浓缩液体积以mL计算，则步骤（2）中浓缩后的浓缩液体积数值与润湿前泡桐花药材重量数值相同。较佳的，上述步骤（4）中乙醇浓度为95%。本专利技术提供的这种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，其有益效果如下：（1）在雏鸡首免（18日龄）、二免（32日龄）新城疫疫苗时，连续3天给它们灌服泡桐花多糖，在首免后的第7天、第14天（即二免日）、第21天和第28天进行测定，发现泡桐花多糖可明显促进鸡外周血和脾脏淋巴细胞增值，提升ND-HI抗体水平，提高免疫器官指数，提高血清中IL-4、IL-6、IFN-g等细胞因子浓度，提高雏鸡十二指肠SIgA含量，从而提高机体的免疫能力，增强疫苗的免疫效果。（2）经过研究发现使用直接提取出的泡桐花多糖亦可达到增强疫苗的免疫效果，而无需再增加其他中药材的多糖，降低了免疫增强剂的制备成本，且省去将不同种中药材活性成分混合的步骤，大大提高了制备速率。（3）只需在首次免疫及二次免疫时使用特定量的泡桐花多糖便可达到增强免疫的效果，其相对全程添加于饲料中而言，省去每日都需要混合饲料的麻烦，并且对于禽畜而言，所服食的免疫增强剂总量也减少了，其养殖成本也降低了。具体实施方式实施例一一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，其包括如下步骤：（1）取500g泡桐花药材，加水润湿洗涤去泥浆；（2）加入5kg重量的水，并进行第一次煎煮，煎煮结束后将煎液滤过；再次加入5kg重量的水进行第二次煎煮，煎煮结束后将煎液滤过；随后将2次滤液合并，并进行浓缩得到500mL的浓缩液；（3）将浓缩液进行离心并取上液；（4）在离心下液中加入离心下液4倍重量的乙醇，并进行搅拌，搅拌后静置12h以上；其中乙醇浓度为95%；（5）将静置液的上液取出丢弃后，再取出静置液的下液得膏状物；（6）将膏状物在75℃温度下减压干燥至恒重，再粉碎即得粗制泡桐花多糖中药免疫增强剂；7）使用硫酸苯酚法测定粗制泡桐花多糖中药免疫增强中的泡桐花多糖含量；（8）取18日龄非免疫雏鸡，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行首次免疫，首次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂；（9）待步骤（8）中的雏鸡到达32日龄时，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行二次免疫，二次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg泡桐花本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，其特征在于取泡桐花药材提取其多糖制成中药免疫增强剂，其制备与使用步骤如下：（1）取泡桐花药材，加水润湿洗涤去泥浆；（2）加入润湿前泡桐花药材10倍重量的水，并进行2次煎煮，每次煎煮结束后将煎液滤过；将2次滤液合并，并进行浓缩得到浓缩液；（3）将浓缩液进行离心并取上液；（4）在离心下液中加入离心下液4倍重量的乙醇，并进行搅拌，搅拌后静置12h以上；（5）将静置液的上液取出丢弃后，再取出静置液的下液得膏状物；（6）将膏状物在75℃温度下减压干燥至恒重，再粉碎即得粗制泡桐花多糖中药免疫增强剂；（7）使用硫酸苯酚法测定粗制泡桐花多糖中药免疫增强中的泡桐花多糖含量；（8）取18日龄非免疫雏鸡，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行首次免疫，首次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5‑50mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg‑50mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂；（9）待步骤（8）中的雏鸡到达32日龄时，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行二次免疫，二次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5‑50mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg‑50mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂。...

【技术特征摘要】
1.一种泡桐花多糖中药免疫增强剂的制备和使用方法，其特征在于取泡桐花药材提取其多糖制成中药免疫增强剂，其制备与使用步骤如下：（1）取泡桐花药材，加水润湿洗涤去泥浆；（2）加入润湿前泡桐花药材10倍重量的水，并进行2次煎煮，每次煎煮结束后将煎液滤过；将2次滤液合并，并进行浓缩得到浓缩液；（3）将浓缩液进行离心并取上液；（4）在离心下液中加入离心下液4倍重量的乙醇，并进行搅拌，搅拌后静置12h以上；（5）将静置液的上液取出丢弃后，再取出静置液的下液得膏状物；（6）将膏状物在75℃温度下减压干燥至恒重，再粉碎即得粗制泡桐花多糖中药免疫增强剂；（7）使用硫酸苯酚法测定粗制泡桐花多糖中药免疫增强中的泡桐花多糖含量；（8）取18日龄非免疫雏鸡，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行首次免疫，首次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐花多糖溶液，每日1次，连续给药3天，每次给药剂量以泡桐花多糖中药免疫增强剂中所含的泡桐花多糖计则其给药计量为12.5-50mg/kg体重，即1kg重的雏鸡灌服包含12.5mg-50mg泡桐花多糖的中药免疫增强剂；（9）待步骤（8）中的雏鸡到达32日龄时，使用新城疫疫苗滴鼻和点眼进行二次免疫，二次免疫的同时给雏鸡经口灌服上述泡桐...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨海峰，蒋春茂，陈晓兰，张萍，邱树磊，张建，李艳艳，贾纪萍，黄陈，沈小洁，
申请(专利权)人：江苏农牧科技职业学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32