分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗应用制造技术

本发明专利技术公开了一种分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用原核表达的水稻瘤矮病毒(RGDV)CP重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗RGDV单抗的杂交瘤细胞株11B6，其保藏号为CGMCC No.14897。该杂交瘤细胞株分泌的单抗腹水间接ELISA效价达到10‑8，抗体类型及亚类为IgG1、kappa链。该单抗与RGDV外壳蛋白有特异性反应。利用11B6单抗为核心建立检测RGDV的ACP‑ELISA和dot‑ELISA方法，这两种方法检测病叶的灵敏度分别达到1:327 680和1:20 480倍稀释(w/v,g/mL)。该杂交瘤细胞株及其单抗的获得和血清学检测方法的建立为该病毒病的检测、诊断及科学防控提供了物质和技术支撑。

Hybridoma cell lines secreting monoclonal antibodies against rice dwarf virus and their monoclonal antibodies

The invention discloses a hybridoma cell line secreting monoclonal antibody against rice stunt virus and the application of the monoclonal antibody. BALB / c mice were immunized with the recombinant protein CP of rice stunt virus (RGDV) expressed in prokaryotic medium. A hybridoma cell line 11B6 was obtained by cell fusion, screening and cloning. Its preservation number was CGMCC No. 14897. The indirect ELISA titer of ascites secreted by the hybridoma cell line reached 10_8. The antibody types and subclasses were IgG1 and kappa chains. The McAb has specific reaction with the RGDV coat protein. Using 11B6 monoclonal antibody as the core, ACP_ELISA and dot_ELISA were established to detect RGDV. The sensitivity of these two methods was 1:327 680 and 1:20 480 dilution (w/v, g/mL), respectively. The acquisition of the hybridoma cell line and its monoclonal antibody and the establishment of serological detection methods provide material and technical support for the detection, diagnosis and scientific prevention and control of the virus disease.

【技术实现步骤摘要】
分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。
技术介绍
水稻瘤矮病是由水稻瘤矮病毒(Ricegalldwarfvirus,RGDV)引起的一种水稻病毒病害。自1979年在泰国发现后，水稻瘤矮病相继在马来西亚、日本、韩国等地发现。1981年在我国广东首次发现RGDV，目前水稻瘤矮病主要流行于我国的广东、广西、福建、海南等南方稻区，发病严重的田块甚至无法正常抽穗，颗粒无收。RGDV寄主植物除了水稻外，还包括小麦、大麦、燕麦、看麦娘、野生稻和玉米等禾本科作物，但其不侵染稗草。侵染RGDV水稻的典型症状包括：发病的植株矮缩，分蘖减少，新叶短而窄，叶色变深，叶背部和叶鞘有0.1-0.2mm大小的圆形白色瘤状突起，每叶有0-30个。RGDV由传播介体电光叶蝉和黑尾叶蝉以持久增殖型方式传播，叶蝉一旦获毒，即终身带毒并可经卵传播。RGDV属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)，植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus)。RGDV的病毒粒子属于二十面体，三重对称，球状，直径约为65-70本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株11B6，其特征在于能分泌抗水稻瘤矮病毒的特异性单抗，杂交瘤细胞株11B6于2017年12月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.14897。

【技术特征摘要】
1.一种分泌抗水稻瘤矮病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株11B6，其特征在于能分泌抗水稻瘤矮病毒的特异性单抗，杂交瘤细胞株11B6于2017年12月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.14897。2.一种如权利要求1所述的杂交瘤细胞株11B6分泌的抗水稻瘤矮病毒的单克隆抗体。3.如权利要求2所述的杂交瘤细胞株11B6分泌的抗水稻瘤矮病毒的单克隆抗体，其特征在于该单抗腹水间接ELISA效价达10-8，抗体类型及亚类为IgG1、kappa链，该抗体能够与水稻瘤矮病毒47kDa的外壳蛋白有特异性免疫反应，利用ACP-E...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建祥，王亚琴，陈蕊，周雪平，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33