一种海洋糖多孢菌及其在制备红霉素衍生物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种海洋糖多孢菌及其在制备红霉素衍生物中的应用。海洋糖多孢菌(Saccharopolyspora sp.)SCSIO 07745该菌于2017年9月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号5楼，保藏编号为：GDMCC No.60232。本发明专利技术的海洋糖多孢菌(Saccharopolyspora sp.)SCSIO 07745的发酵培养物能够制备红霉素衍生物sporeamicinA和erythromycinAenol ether，如式(I)所示。本发明专利技术为红霉素衍生的生产制备提供了生物制备方法，具有广阔的应用前景。

Marine saccharosporidia and its application in the preparation of erythromycin derivatives

The invention discloses a marine saccharosporidia and its application in preparing erythromycin derivatives. Saccharopolyspora sp. SCSIO 07745 was preserved in Guangdong Microbial Species Conservation Center (GDMCC) on September 14, 2017. Address: No. 59, 5th floor, No. 60232, No. 100 Xianlie Middle Road, Guangzhou. The fermentation culture of Saccharopolyspora sp. SCSIO 07745 of the present invention can prepare erythromycin derivatives sporeamicin A and erythromycin Aenol ether, as shown in equation (I). The invention provides a biological preparation method for the production and preparation of erythromycin derivatization, and has broad application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种海洋糖多孢菌及其在制备红霉素衍生物中的应用
：本专利技术属于微生物
，具体涉及一种海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745及其在制备红霉素衍生物中的应用。
技术介绍
：红霉素类抗生素是临床上用于治疗细菌感染的重要大环内酯类药物，包括红霉素A(erythromycinA)、红霉素B(erythromycinB)、红霉素C(erythromycinC)和红霉素D(erythromycinD)等[KibwageIO,HoogmartensJ,RoetsE,etal.AntibacterialactivitiesoferythromycinsA,B,C,andDandsomeoftheirderivatives[J].AntimicrobAgentsChemother,1985,28(5):630-633]。1952年，McGuiire等首次从糖多孢菌属放线菌Saccharopolysporasp.中分离得到红霉素类抗生素[McguireJM,BunchRL,AndersonRC,etal.Ilotycin,anewantibiotic[J].SAfrMedJ,1952,82(41):565-566]。其中的红霉素A也是第一个被发现由放线菌生产的十四元大环内酯类抗生素。红霉素类抗生素对革兰氏阳性菌及部分革兰阴性菌有良好的抑菌活性，其抗菌谱与青霉素相似，临床上主要用于对青霉素耐药或过敏的金黄色葡萄球菌感染[LiuF,WangC,ZhangQ,etal.Establishmentofmultidrug-resistancecelllineC(6)/adrandreversalofdrug-resistance[J].ChinMedJ,2002,115(2):238-241]，及敏感菌所致的呼吸道、泌尿道、皮肤和软组织、五官科感染。但随着呼吸道常见病原菌及其他病原微生物的出现，科研工作者筛选出了酸稳定性、半衰期及活性均优于红霉素的第二代红霉素，取代红霉素成为抗感染治疗的一线药物[KirstHA.Recentdevelopmentswithmacrolideantibiotics[J].ExpertOpinTherPat,2005,8(2):111-120]。随着抗菌药物的广泛使用，出现了大量耐药菌株[TensonT,LovmarM,EhrenbergM.Themechanismofactionofmacrolides,lincosamidesandstreptograminBrevealsthenascentpeptideexitpathintheribosome[J].JMolBiol,2003,330(5):1005-1014]。为解决耐药性的问题，研究者先后设计并合成了酮内酯(ketolide)、酰内酯(acylide)、双环内酯(bicyclolide)等红霉素类衍生物[GlassfordI,LeeM,WaghB,etal.DesmethylMacrolides:SynthesisandEvaluationof4-DesmethylTelithromycin[J].AcsMedChemLett,2014,5(9):1021-1026][WuZ,LuY,LuoM,etal.Synthesisandantibacterialactivityof3-O-carbamoylderivativesof6,11-di-O-methylerythromycinA:anovelclassofacylides[J].EurJMedChem,2010,45(9):3636-3644][GaiY,TangD,XuG,etal.Synthesisof3,6-bicyclolides:anovelclassofmacrolideantibiotics[J].BioorgMedChemLett,2008,18(24):6315-6318]及其与其他抗菌活性化合物结构片段的杂合物等第三代红霉素。目前关于红霉素家族抗生素的研究除了红霉素结构的衍生化外，挖掘活性良好的红霉素类天然产物也是众多学者的研究热点之一。自1982年，Thompson等克隆出红霉素抗性基因[ThompsonCJ,WardJM,HopwoodDA.Cloningofantibioticresistanceandnutritionalgenesinstreptomycetes[J].JBacteriol,1982,151(2):668-677]距今，国内外有众多关于红霉素的生物合成相关研究的报道，包括红霉素生物合成途径推导、关键酶的骨架及催化机制阐明及生产菌和工程菌的全基因组序列比较等[吴杰群，刘文，张嗣良.红霉素的生物合成与组合生物合成[J].有机化学,2012,32:1232-1240]。
技术实现思路
：本专利技术的目的之一是提供一种能够产生红霉素衍生物sporeamicinA(1)和erythromycinAenolether(2)的海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745，该菌于2017年9月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼，其保藏编号为：GDMCCNo.60232。本专利技术人在对海洋放线菌活性次级代谢产物的筛选中，发现了采自中国南海沉积物中的糖多孢菌S.sp.SCSIO07745有丰富的次级代谢产物及良好抑菌活性。对该菌株进行发酵并运用活性追踪进行分离获得2个单体化合物。通过1H-NMR，13C-NMR及MS等波谱分析、理化数据对照和XRD单晶衍射分析，将其结构鉴定为红霉素类化合物sporeamicinA(1)和erythromycinAenolether(2)，结构式见式(I)：本专利技术的目的之二是提供海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745在制备红霉素衍生物sporeamicinA(1)和/或erythromycinAenolether(2)中的应用。本专利技术的目的之三是提供红霉素衍生物的制备方法，所述的红霉素衍生物sporeamicinA(1)和erythromycinAenolether(2)是从海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745的发酵培养物中制备得到的。按照本专利技术，优选所述的红霉素衍生物sporeamicinA(1)和erythromycinAenolether(2)是从海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745的发酵培养物中制备得到的，具体包括以下步骤：(a)制备海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵上清液和菌丝体分开，发酵上清液用丁酮萃取，丁酮相经浓缩后得到浸膏A，菌丝体用丙酮浸泡萃取，丙酮浸提液经浓缩后得到浸膏B；(b)将浸膏A和浸膏B合并，采用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇作为洗脱剂，用体积比100:0，98:2，96:4，95:5，90:10，8:2，5:5，0:100进行梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体积比为5:5洗脱的馏分F本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.海洋糖多孢菌(Saccharopolyspora sp.)SCSIO 07745，其保藏编号为：GDMCC No.60232。

【技术特征摘要】
1.海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745，其保藏编号为：GDMCCNo.60232。2.权利要求1所述的海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745在制备红霉素衍生物sporeamicinA和/或erythromycinAenolether中的应用。3.一种红霉素衍生物sporeamicinA和erythromycinAenolether的制备方法，其特征在于，所述的红霉素衍生物sporeamicinA和erythromycinAenolether是从权利要求1所述的海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745的发酵培养物中制备得到的。4.根据权利要求3所述的红霉素衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)制备海洋糖多孢菌(Saccharopolysporasp.)SCSIO07745的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵上清液和菌丝体分开，发酵上清液用丁酮萃取，丁酮相经浓缩后得到浸膏A，菌丝体用丙酮浸泡萃取，丙酮浸提液经浓缩后得到浸膏B；(b)将浸膏A和浸膏B合并，采用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇作为洗脱剂，用体积比100:0，98:2，96:4，95:5，90:10，8:2，5:5，0:100进行梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体积比为5...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠建华，张善文，田新朋，桂春，秦湘静，黄洪波，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44