一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20‑30份、纳豆芽孢杆菌10‑20份、枯草芽孢杆菌15‑25份、异常汉逊酵母20‑30份、圆褐固氮菌5‑15份、多孔磁性壳聚糖微球5‑10份。本发明专利技术具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，完全没有因化学药剂的使用所带来的化学抗药性等问题，因而有利于苹果的无公害生产。依靠相互间协同作用、增殖关系形成一个复杂、结构稳定、功能广泛的具有多种多样细菌微生物群落的生物菌群，对苹果树根腐病具有良好的防控作用。

A microbial inoculant for preventing and controlling root rot of apple trees and its preparation method

The invention discloses a microbial fungicide for preventing and controlling apple tree root rot and a preparation method thereof, which is prepared from the following weight components: Trichoderma harzianum 20 30, Bacillus natto 10 20, Bacillus subtilis 15 25, Hanson's yeast 20 30, Azotobacter teroides 5 15, porous magnetic shell polymerization. Sugar microspheres 5, 10. The invention has the microbial agent for preventing and controlling apple root rot, and has no chemical resistance and other problems caused by the use of chemical agents, so it is beneficial to the pollution-free production of apples. Depending on the synergistic effect and multiplication relationship, a complex, stable structure and wide range of functions of a variety of bacterial microbial communities are formed, which has a good control effect on Apple root rot.

【技术实现步骤摘要】
一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法
本专利技术属于生物领域，具体涉及一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法。
技术介绍
苹果属于蔷薇科，是落叶乔木，有较强的极性，通常生长旺盛，树冠高大，树高可达15米，栽培条件下一般高3-5米左右。树干灰褐色，老皮有不规则的纵裂或片状剥落，小枝光滑。据测定，每百克苹果含果糖6.5-11.2克，葡萄糖2.5-3.5克，蔗糖1.0-5.2克，还含有微量元素锌、钙、磷、铁、钾及维生素B1、维生素B2、维生素C和胡萝卜素等。苹果喜光，喜微酸性到中性土壤，最适于土层深厚、富含有机质、心土为通气排水良好的沙质土壤。苹果根腐病又名圆斑根腐病，是分布较广、危害较重的一种烂根病，根腐病是苹果根系衰弱的情况下，受土壤中习居的镰刀菌侵害引起的。据调查，苹果树根腐病的发生与果树根系强弱密切相关。干旱、缺肥、土壤盐碱化、水土流失、土壤板结通气不良、结果过多、大小年严重以及病虫害严重都是诱发此病的重要条件。苹果树根腐病是造成苹果减产的主要原因。主根感病后，早期植株不表现症状，后随着根部腐烂程度的加剧，植株吸收水分和养分的功能逐渐减弱，地上部分养分供不应求，在中午前后光照强，蒸发量大时，植株上部叶片出现萎蔫，但夜间又能恢复。病情严重时，萎蔫状况在夜间也不能恢复。此时，根皮变褐，并与髓部分离，最后全株死亡。发病时期：一般多在3月下旬至4月上旬发病，5月进入发病盛期。不论幼、中、老树都可能发此病。现有的防治方法通常有以下几种：综合防治措施：1、农业措施：①选用抗病品种。②轮作换茬。③粘土中混掺砂子。④精细整地，清沟沥水，阴雨天水不上畦，沟无积水。双打低洼积水田块，应高畦深沟，及时降低土壤湿度。⑤少用化肥，多用腐熟有机肥。2、物理措施：在夏季翻耕土壤，用薄膜覆盖，使地温升至50℃，以高温杀死病菌。3、化学措施：①每平方米使用50%多菌灵1.5%克，或75%五氯硝基苯3克，翻入土中。②40%根腐宁1000倍或80%402乳油1500倍灌根。③使用氯化苦熏蒸剂，几乎能够杀死一切细菌、真菌、病毒、害虫及老鼠，防治多种土传病害，防治重返茬，改善土际环境。4、生物措施：①使用500倍“魔方”牌壳寡糖柠檬酸盐+3%印楝素浸种、浸菌。防治病菌、病毒、有害真菌、害虫，增加土壤中乳酸菌、放线菌等有益菌菌群，改善土壤团粒结构，增强土壤通透性，恢复生态平衡。②使用1000倍海藻精灌根大量杀灭有害真菌、细菌、病毒，增强土壤肥力，促进根系生长。上述方法虽然对治疗苹果树根腐病有一定效果，但效果并不理想。
技术实现思路
本专利技术提供了一种简单易行、效果优异、无污染的具有防控苹果树根腐病微生物菌剂。本专利技术还提供了该具有防控苹果树根腐病微生物菌剂的制备方法。本专利技术的技术方案如下：一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20-30份、纳豆芽孢杆菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、异常汉逊酵母20-30份、圆褐固氮菌5-15份、多孔磁性壳聚糖微球5-10份。本专利技术的哈茨木霉菌、纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌均为市售，有效活菌数为10-100亿/克。本专利技术所用的异常汉逊酵母和圆褐固氮菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所），保藏编号分别为：CGMCCNo.3435和CGMCCNo.12402。所述的，多孔磁性壳聚糖微球是由以下步骤制得的：1）将氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20混合均匀，密封浸泡2-4h，50-55℃水浴加热并搅拌至羧甲基壳聚糖完全溶解，且静止至气泡完全逸出，得羧甲基壳聚糖相；2）将司班-80和液体石蜡加至烧瓶中，50-60℃水浴加热，搅拌至混合均匀，作为石蜡相；3）50-60℃水浴加热条件下，边搅拌边将羧甲基壳聚糖相滴加到石蜡相中，滴加完毕继续搅拌5min；匀速将50-60℃的水浴换成冰水浴，5-10min后撤去冰水浴，室温条件下添加混合溶液，反应5-9h，停止搅拌，依次用石油醚、无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得粒径为5-10μm的多孔磁性壳聚糖微球。所述的，氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20的重量比为100：5-15：10-15：10-20；所述氨水的浓度为20%。所述的，司班-80和液体石蜡的重量比为1：25-30。所述的，羧甲基壳聚糖相、石蜡相和混合溶液的重量比为1：6-8：0.4-0.6。所述的，混合溶液是由正硅酸乙酯和无水乙醇按照1：10-20的重量比混合得到的。一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂的制备方法，是由以下步骤制得的：1）分别取斜面保种的异常汉逊酵母和圆褐固氮菌各两环，分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，培养温度37℃，培养时间20h，分别得异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的种子液；2）分别将异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的种子液按5%接种量接入500L种子罐培养基中，35℃、180r/min条件下培养24h，分别得异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的菌液；3）分别将异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的菌液用硅藻土吸附，吸附完成后板框压滤机压滤，喷雾干燥，进风温度140-180℃、进料流量13-17ml/min，分别得异常汉逊酵母菌剂和圆褐固氮菌菌剂；4）将哈茨木霉菌、纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、异常汉逊酵母菌剂、圆褐固氮菌菌剂和多孔磁性壳聚糖微球混合均匀，加入气流粉碎机，细度控制300-400目，即可制得具有防控苹果树根腐病微生物菌剂。所述的，牛肉膏蛋白胨培养基的具体组成：牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15g/L，其余为水。所述的，种子罐培养基的具体组成：牛肉膏0.3%，蛋白胨1%，氯化钠0.5%，葡萄糖0.5%。本专利技术的有益效果：1.本专利技术具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，完全没有因化学药剂的使用所带来的化学抗药性等问题，因而有利于苹果的无公害生产。依靠相互间协同作用、增殖关系形成一个复杂、结构稳定、功能广泛的具有多种多样细菌微生物群落的生物菌群，对苹果树根腐病具有良好的防控作用。多孔磁性壳聚糖微球可为微生物菌剂提供栖息地，使微生物菌剂能够耐受外界不良环境。2.本专利技术具有防控苹果树根腐病微生物菌剂简单易行、效果优异、无污染，可用于苹果树的任何生长期，特别是休眠期，不产生任何抗性。3.本专利技术的制造方法简单易行，运行成本低，具有广阔的市场应用前景。具体实施方式结合实施例对本专利技术做进一步阐述，不构成对本专利技术的范围限制。本专利技术的哈茨木霉菌、纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌均为市售，有效活菌数为10-100亿/克。本专利技术所用的异常汉逊酵母和圆褐固氮菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所），保藏编号分别为：CGMCCNo.3435和CGMCCNo.12402。实施例1一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20份、纳豆芽孢杆菌10份、枯草芽孢杆菌25份、异常汉逊酵母30份、圆褐固氮菌5份、多孔磁性壳聚糖微球10份。所述的，多孔磁性壳聚糖微球是由以下步骤制得的：1）将氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20混合均匀，密封浸泡2h，55℃水浴加热并搅拌至羧甲基壳聚糖完全溶解，且静止至气泡完全逸出，得羧甲基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20‑30份、纳豆芽孢杆菌10‑20份、枯草芽孢杆菌15‑25份、异常汉逊酵母20‑30份、圆褐固氮菌5‑15份、多孔磁性壳聚糖微球5‑10份。

【技术特征摘要】
1.一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20-30份、纳豆芽孢杆菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、异常汉逊酵母20-30份、圆褐固氮菌5-15份、多孔磁性壳聚糖微球5-10份。2.根据权利要求1所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述多孔磁性壳聚糖微球是由以下步骤制得的：1）将氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20混合均匀，密封浸泡2-4h，50-55℃水浴加热并搅拌至羧甲基壳聚糖完全溶解，且静止至气泡完全逸出，得羧甲基壳聚糖相；2）将司班-80和液体石蜡加至烧瓶中，50-60℃水浴加热，搅拌至混合均匀，作为石蜡相；3）50-60℃水浴加热条件下，边搅拌边将羧甲基壳聚糖相滴加到石蜡相中，滴加完毕继续搅拌5min；匀速将50-60℃的水浴换成冰水浴，5-10min后撤去冰水浴，室温条件下添加混合溶液，反应5-9h，停止搅拌，依次用石油醚、无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得粒径为5-10μm的多孔磁性壳聚糖微球。3.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20的重量比为100：5-15：10-15：10-20；所述氨水的浓度为20%。4.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述司班-80和液体石蜡的重量比为1：25-30。5.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述羧甲基壳聚糖相、石蜡相和混合溶液的重量比为1：...

【专利技术属性】
技术研发人员：王欣，王宪法，
申请(专利权)人：山东丰乐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37