促进抗体生成的疫苗稀释剂及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种促进抗体生成的疫苗稀释剂，其制备方法为：在0.5～50毫克人参皂苷和0.9毫克～200毫克亚硒酸钠中加入生理盐水定容至100毫升，再用孔径为22μm的薄膜过滤除菌，得促进抗体生成的疫苗稀释剂。本发明专利技术还同时公开了上述疫苗稀释剂的用途：促进疫苗诱导的抗体生成。该稀释剂不仅能提高IgG1抗体的产生而且还能促进IgG2a抗体的产生，局部刺激性小，可以冰冻长期保存而不影响效果。

Vaccine thinner for promoting antibody production and preparation method and use thereof

The invention discloses a vaccine diluent for promoting antibody formation. The preparation method is: adding normal saline into 0.5-50 mg ginsenoside and 0.9-200 mg sodium selenite to fix volume to 100 ml, and then filtering and sterilizing with a membrane with a pore diameter of 22 micron to obtain a vaccine diluent for promoting antibody formation. The invention also discloses the use of the vaccine thinner at the same time: promoting the generation of antibody induced by the vaccine. The diluent can not only increase the production of IgG1 antibody, but also promote the production of IgG2a antibody. The local irritation is small and can be frozen for a long time without affecting the effect.

【技术实现步骤摘要】
促进抗体生成的疫苗稀释剂及其制备方法和用途
本专利技术涉及一种疫苗稀释剂及其制备方法和用途，该稀释剂是一种溶液，用它稀释疫苗后注射动物，可促进疫苗诱导的特异性抗体的产生。
技术介绍
动物传染病可造成畜禽大量死亡，严重危害养殖业的健康发展，是引起养殖业经济损失的一类重要动物疾病。为减少传染病的发病率和死亡率，需要对动物注射疫苗，使动物产生特异性保护性抗体。但近年来常有报道，动物注射疫苗后体内检测不到足够水平的抗体，无法阻止疾病的发生，给养殖户带来严重的经济损失。例如，王建等人给断奶仔猪注射繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗，70天后用野毒攻毒，保护率仅为63.6％(1)；曹振山等人检测了206份猪血样中的猪瘟抗体，仅有136份血样达到抗体合格水平，合格率只有66.0％(2)；金立忠和万春艳报道了2017年8月的扶余市在注射疫苗后猪群发生猪瘟的情况(3)。因此，提高疫苗的注射效果，有效预防传染病的发生在养殖业具有重要意义。目前用于预防动物传染病的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗两大类。冻干弱毒疫苗由于注射后抗体的持续时间长而在养殖业被广泛使用，如猪伪狂犬弱毒疫苗、传染性法氏囊病弱毒冻干疫苗、猪瘟冻干弱毒疫苗、新城疫Ⅳ系弱毒疫苗、鸡新城疫-传染性支气管炎二联弱毒疫苗等。这类疫苗是一种粉末状固体，无法直接给动物接种，需要用稀释液稀释后才能使用。常用的疫苗稀释剂有氢氧化铝铝胶生理盐水溶液和生理盐水。铝胶溶液的缺点是仅仅提高IgG1的产生而不能促进IgG2a的产生(4,5)、在注射部位局部反应大(6)和冰冻保破坏了胶体结构使其丧失佐剂功能；生理盐水稀释剂无免疫增强作用；也有报道含人参皂甙的水溶稀释弱毒疫苗后免疫动物可以提高疫苗免疫效果(7)。该文中告知：人参皂苷(GSLS)和硫柳汞(TS)对小鼠伪狂犬病毒稀释弱毒疫苗的辅助作用。与单独用小鼠伪狂犬病毒免疫的组相比，人参皂苷和/或硫柳汞的共同接种(人参皂苷6μg/100μL；硫柳汞1μg/100μL)具有较高的抗体免疫效果。且当与GSLS-TS一起施用时，能够增强伪狂犬病毒疫苗的血清特异性抗体(IgG1和IgG2a)。参考文献：(1)王建，齐永新，李凯航，葛菲菲，刘佩红，袁世山.三种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果评价，动物医学进展，2012,33(4)：107-113；(2)曹振山，陈静，马慧玲，孔祥华，王士荣，孙胜福.山东省2016年猪瘟抗体监测与分析，中国畜禽种业，2017.8,7；(3)金立忠，万春艳.兔化弱毒苗免疫猪群发生猪瘟的诊断报告，畜牧兽医，2017(7),246；(4)JohnCCandAlanRC.Adjuvants-aclassificationandreviewoftheirmodesofaction.Vaccine,1997:248-256(疫苗佐剂：作用模式和分类.疫苗杂志,1997:248-256)；(5)HogenEschH.Mechanismsofstimulationoftheimmuneresponsebyaluminumadjuvants.Vaccine,2002,20:34–39(铝胶座机刺激免疫反应的机制，疫苗杂志,2002,20:34–39)；(6)Eickhoff,T.C.,Myers,M.Aluminuminvaccine(Conferencereport).Vaccine2002,20,S1-S4(疫苗中的铝(会议报告).疫苗杂志，2002,20,S1-S4)；(7)NiJX,BiSC,XuW,ZhangCR,LuYS,ZhaiLJ,HuSH.Improvedimmuneresponsetoanattenuatedpseudorabiesvirusvaccinebyginsengstem-leafsaponins(GSLS)incombinationwiththimerosal(TS).AntiviralResearch,2016:92-98(人参茎叶皂苷和硫柳汞配伍增强机体对伪狂犬弱毒疫苗的免疫反应.抗病毒研究,2016:92-98)。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种可以提高抗体生成的疫苗稀释剂及其制备方法和用途。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种促进抗体生成的疫苗稀释剂，每100毫升稀释剂中含人参皂苷0.5～50毫克和亚硒酸钠0.9毫克～200毫克，余量为生理盐水。作为本专利技术的促进抗体生成的疫苗稀释剂的改进：每100毫升稀释剂中含人参皂苷10毫克和亚硒酸钠75毫克，余量为生理盐水。本专利技术还同时提供了上述促进抗体生成的疫苗稀释剂的制备方法：在0.5～50毫克人参皂苷和0.9毫克～200毫克亚硒酸钠中加入生理盐水定容至100毫升，再用孔径为22μm的薄膜过滤除菌，得促进抗体生成的疫苗稀释剂。即，将人参皂苷和亚硒酸钠溶解于生理盐水，浓度调整至每100mL溶液含人参皂苷0.5～50mg和亚硒酸钠0.5～200mg，经过0.22μm滤膜过滤除菌，即得。本专利技术还同时提供了上述促进抗体生成的疫苗稀释剂的用途：促进疫苗诱导的抗体(包括IgG1和IgG2a等)生成。具体为：将粉状疫苗利用该稀释剂配制成疫苗溶液接种动物以促进疫苗诱导的抗体生成。本专利技术所述的人参皂苷为从植物人参(PanaxginsengC.A.Meyer)根或者茎叶中提取的皂苷成分。生理盐水是含0.85～0.9％(质量％)氯化钠的水溶液，和哺乳动物血浆是等渗的；此为常规技术。本专利技术的稀释剂不仅能提高IgG1抗体的产生而且还能促进IgG2a抗体的产生、局部刺激性小、可以冰冻长期保存而不影响效果。综上所述，本专利技术用人参皂甙和亚硒酸钠配伍(GS-Se)稀释疫苗显著提高了机体产生抗体的水平，不仅能提高IgG1抗体的产生而且还能促进IgG2a抗体的产生，局部刺激性小，可以冰冻长期保存而不影响效果。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。图1为人参皂苷(GS)、亚硒酸钠(Se)和GS-Se不同稀释液对小鼠注射aPrV弱毒苗后抗体水平影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图2是GS-Se和氢氧化铝两种稀释剂对小鼠注射aPrV弱毒苗后抗体亚类水平影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图3是不同比例人参皂苷和亚硒酸钠配伍对IgG1和IgG2a产生的影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图4是人参皂苷和不同含硒化合物配伍对IgG1和IgG2a产生的影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图5是GS-Se和氢氧化铝两种稀释剂冻融前后对小鼠注射模式抗原卵清白蛋白后抗体水平影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图6是人参皂苷-亚硒酸钠(GS-Se)稀释液和商品疫苗专用稀释液对猪注射伪狂犬弱毒苗后抗体水平影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)；图7是人参皂苷(GS)、亚硒酸钠(Se)和GS-Se不同稀释液对鸡免疫传染性法氏囊病疫苗弱毒苗后抗体水平影响对比图(上标字母不同表示组间有显著性差异，P<0.05)。具体实施方式下面结合具体实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.促进抗体生成的疫苗稀释剂，其特征是：每100毫升稀释剂中含人参皂苷0.5～50毫克和亚硒酸钠0.9毫克～200毫克，余量为生理盐水。

【技术特征摘要】
1.促进抗体生成的疫苗稀释剂，其特征是：每100毫升稀释剂中含人参皂苷0.5～50毫克和亚硒酸钠0.9毫克～200毫克，余量为生理盐水。2.根据权利要求1所述的促进抗体生成的疫苗稀释剂，其特征是：每100毫升稀释剂中含人参皂苷10毫克和亚硒酸钠75毫克，...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡松华，
申请(专利权)人：胡松华，
类型：发明
国别省市：浙江,33