修饰免疫细胞及其用途制造技术

本文描述的发明专利技术涉及通过施用有效量的细胞因子受体修饰免疫细胞治疗患者癌症的方法和组合物。

Modification of immune cells and their uses

The invention described herein relates to methods and compositions for the treatment of cancer in patients by applying effective amounts of cytokine receptors to modify immune cells.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】修饰免疫细胞及其用途相关申请的交叉引用按照35U.S.C.§119(e)的规定，本申请要求2015年11月9日提交的美国临时申请62/253,093；2016年4月26日提交的62/327,877；2015年11月9日提交的62/253,072；2015年11月9日提交的62/253,096；以及2015年11月9日提交的62/253,021的优先权；每个专利通过引用整体并入本申请中。
技术介绍
在原核生物和真核生物中观察到响应特殊刺激而发生的细胞运动。这些生物中观察到的细胞运动分为三类：趋化性或细胞沿化学物质浓度增加方向的梯度运动；负趋化性，其被定义为沿化学刺激梯度向下运动；以及化学增活现象或由化学试剂诱导的细胞随机运动增加。本文所述实施例大体上涉及可以改进例如与癌症和肿瘤治疗有关的细胞运动的治疗和组合物的技术和主题物质。例如，所述实施例涉及可以靶向肿瘤以有效且高效地杀死肿瘤和/或转移癌细胞的技术。
技术实现思路
哺乳动物细胞响应被称为趋化因子的蛋白质时发生趋化性和化学增活现象。此外，哺乳动物细胞中还观察到化学排斥活性或驱趋化性(fugetactic)活性。例如，有些肿瘤细胞分泌的趋化因子的浓度足够将免疫细胞从肿瘤部位赶走，从而降低免疫系统靶向和消灭肿瘤的能力。转移癌细胞可能利用类似的机理逃避免疫系统。将免疫细胞(比如肿瘤抗原-特异性T-细胞)从例如CXCL12或白细胞介素8(IL-8)高水平表达的肿瘤处赶走，使肿瘤细胞能够逃避免疫控制。CXCR7是人体中被CXCR7基因编码的一种蛋白质。CXCR7受体被各种细胞表达，在促进肿瘤发生和发展中起着非常重要的作用。CXCR7是一种趋化因子受体，其能够结合基质细胞衍生因子-1(SDF-1，亦称为CXCL12)及干扰素诱导T-细胞α化学引诱物(I-TAC，亦称为CXCL11)，所述基质细胞衍生因子-1是一种对淋巴细胞具有有效趋化活性的分子。已知CXCL12在造血干细胞归巢到骨髓和造血干细胞静息中非常重要。此外，在病理性炎症和肿瘤发生期间，CXCR7的表达似乎得到增强。报告表明，CXCR7可能至少部分充当诱骗受体，作为CXCL12(和CXCL11)清道夫，促进CXCL12内化和瓦解。CXCR4是人体中被CXCR4基因编码的一种蛋白质。CXCR4受体被各种正常细胞表达，包括免疫细胞(例如，T细胞、B细胞和天然杀伤细胞[NK])。CXCR4是CXCL12特异性α-趋化因子受体，CXCL12是一种对淋巴细胞具有有效趋化活性的分子。CXCL12是CXCR4的配体，其已知为在造血干细胞归巢到骨髓和造血干细胞静息中非常重要。虽然CXCR4在许多健康组织中表达较低或没有表达，但是它在许多癌症中过表达，包括乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤和前列腺癌。这种受体在癌细胞中的表达与转移到包含高浓度CXCL12的组织中有关，如肺、肝和骨髓。高达85％实体瘤和白血病的CXCL12表达水平足以具有驱趋化性效应(fugetacticeffect)，例如，将免疫细胞从肿瘤处赶走，亦称为“驱趋化性壁”(fugetacticwall)。以所述水平表达CXCL12的癌症包括但不限于前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、胃癌、食道癌和白血病。因此，仍需要靶向肿瘤以有效且高效地杀死肿瘤和/或转移癌细胞的治疗和组合物。这种即时技术通常涉及细胞表面上过表达CXCR7受体、缺乏CXCR4受体，或既过表达CXCR7受体又缺乏CXCR4受体的免疫细胞，及它们用于治疗癌症的用途。将肿瘤抗原-特异性T-细胞从例如CXCL12或白细胞介素8(IL-8)高水平表达的肿瘤处赶走，使肿瘤细胞能够逃避免疫控制。人们认为，当向患者施用细胞表面上具有增加的CXCR7受体数量的免疫细胞时，其至少部分上能够作为诱饵，结合并瓦解CXCL12-诱导的驱趋化性壁，从而使免疫细胞能够检测和破坏肿瘤细胞，但是并不受限于该理论。人们还认为，向患者施用CXCR4受体更少或没有CXCR4受体的免疫细胞时，至少部分能够逃避某些肿瘤建立的驱趋化性壁，从而检测和破坏肿瘤细胞。虽然单独采用抗-驱趋化性剂(anti-fugetacticagent)为癌症治疗提供了颇有前景的结果，但是，正如本申请所述，我们设想采用过表达CXCR7受体、缺乏CXCR4受体，或既过表达CXCR7受体又缺乏CXCR4受体的免疫细胞进行治疗，并任选与抗-驱趋化性剂一起使用，将能够更高效地靶向肿瘤并得到改善的患者治疗结果。我们认为，所述方法在下述非限制性示例中特别有益：肿瘤尺寸较大、患者有多个肿瘤、患者免疫系统受损等，但是并不受限于该理论。高达85％实体瘤和白血病的CXCL12表达水平足以具有驱趋化性效应，例如，将免疫细胞从肿瘤处赶走。以所述水平表达CXCL12的癌症包括但不限于前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、胃癌、食道癌和白血病。本专利技术的一个方面涉及一种经修饰过表达CXCR7受体的体外修饰免疫细胞。在一个实施例中，本专利技术涉及一种体外修饰免疫细胞，其中对CXCR7基因或基因转录本进行编辑，从而使CXCR7受体在免疫细胞外表面上过表达。本专利技术的一个方面涉及一种体外修饰免疫细胞，其经修饰以使所述免疫细胞外部细胞表面上没有或基本上没有CXCR4受体。在一个实施例中，本专利技术涉及一种体外修饰免疫细胞，其中所述免疫细胞直接或间接抑制CXCR4基因或基因转录本，从而使所述修饰免疫细胞外表面上CXCR4受体的表达减少或消失。本专利技术的一个方面涉及一种体外修饰免疫细胞，其经修饰以使所述免疫细胞外表面上过表达CXCR7受体或经修饰以使所述免疫细胞外表面上没有或基本上没有CXCR4受体。在一个实施例中，本专利技术涉及一种体外修饰免疫细胞，其中对CXCR7基因或基因转录本进行编辑，从而使CXCR7受体在免疫细胞外表面上过表达，并且其中所述免疫细胞直接或间接抑制CXCR4基因或基因转录本，从而使所述修饰免疫细胞外表面上CXCR4受体的表达减少或消失。本专利技术的一个方面涉及一种体外修饰免疫细胞群，其中至少部分修饰免疫细胞外表面上过表达CXCR7受体及没有或基本上没有CXCR4受体。在一个实施例中，当向患者施用时，CXCR7受体与CXCL12结合。在一个实施例中，当向患者施用时，所述免疫细胞逃避肿瘤细胞的驱趋化性活性。在一个实施例中，所述免疫细胞的来源是自身、同种或异种或它们的组合。在一个实施例中，所述免疫细胞来自癌症患者。在一个实施例中，所述免疫细胞是T-细胞、B-细胞、NK细胞或它们的任意组合。在一个实施例中，所述免疫细胞经进一步修饰，以表达所述免疫细胞外表面上的肿瘤细胞归巢受体，例如，嵌合抗原受体(CAR)、Fc受体或它们的组合。在其它实施例中，所述免疫细胞表达除CXCR4以外的内源肿瘤细胞归巢受体。在一个实施例中，CAR靶向癌症相关抗原，例如，α-叶酸受体、CAIX、CD19、CD20、CD30、CD33、CEA、EGP-2、erb-B2、erb-B2,3,4,FBP、GD2、GD3、Her2/neu、IL-13R-a2、k-轻链、LeY、MAGE-A1、间皮素和PSMA。在一个实施例中，与未修饰免疫细胞上CXCR7受体的平均数量相比，所述免疫细胞外表面上具有10％或更多的CXCR7受体数量。在一个实施例中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种体外修饰免疫细胞，所述修饰免疫细胞的细胞外表面上没有或基本上没有CXCR4受体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.09 US 62/253,021;2015.11.09 US 62/253,072;1.一种体外修饰免疫细胞，所述修饰免疫细胞的细胞外表面上没有或基本上没有CXCR4受体。2.根据权利要求1所述的细胞，进一步包括细胞表面上的肿瘤细胞归巢受体。3.根据权利要求1或2所述的细胞，其中向患者施用时，所述修饰免疫细胞逃避肿瘤患者的肿瘤细胞的驱趋化性活性。4.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述修饰免疫细胞的来源是自身、同种或异种。5.根据权利要求1-3任一项所述的细胞，其中所述修饰免疫细胞来源于肿瘤患者。6.根据前述权利要求任一项所述的细胞，其中所述修饰免疫细胞是T细胞、B细胞或天然杀伤(“NK”)细胞。7.根据权利要求6所述的细胞，其中所述NK细胞是NK-92细胞。8.根据权利要求2所述的细胞，其中所述肿瘤细胞归巢受体是嵌合抗原受体(“CAR”)、Fc受体或它们的组合。9.根据权利要求8所述的细胞，其中所述CAR靶向肿瘤相关抗原。10.根据权利要求9所述的细胞，其中所述肿瘤相关抗原选自由α-叶酸受体、CAIX、CD19、CD20、CD30、CD33、CEA、EGP-2、erb-B2、erb-B2,3,4、FBP、GD2、GD3、Her2/neu、IL-13R-a2、k-轻链、LeY、MAGE-A1、间皮素和PSMA组成的组。11.根据权利要求1、2或8-10任一项所述的细胞，其中与未修饰免疫细胞上CXCR4受体的平均数量相比，所述修饰免疫细胞的细胞外表面上具有50％或更少的CXCR4受体数量。12.根据权利要求1、2或8-10任一项所述的细胞，其中所述修饰免疫细胞在经修饰以使修饰免疫细胞的细胞外表面上没有或基本上没有CXCR4受体之前，所述修饰免疫细胞表达肿瘤细胞归巢受体。13.根据权利要求1、2或8-10任一项所述的细胞，其中所述免疫细胞是B细胞或NK细胞。14.一种体外修饰免疫细胞群，其中至少部分所述修饰免疫细胞在免疫细胞的细胞外表面上没有或基本没有CXCR4受体。15.根据权利要求14所述的细胞群，其中至少部分所述细胞在所述免疫细胞外表面上包括肿瘤细胞归巢受体。16.根据权利要求14或15所述的细胞群，其中向患者施用时，所述修饰免疫细胞群逃避肿瘤细胞的驱趋化性活性。17.根据权利要求14或15所述的细胞群，其中所述免疫细胞的来源是自身、同种或异种，或它们的组合。18.根据权利要求14-17任一项所述的细胞群，其中所述修饰免疫细胞群来源于肿瘤患者。19.根据权利要求14-18任一项所述的细胞群，其中所述修饰免疫细胞群是B细胞、T细胞、NK细胞或它们的组合。20.根据权利要求15所述的细胞群，其中所述肿瘤细胞归巢受体是嵌合抗原受体、Fc受体或它们的组合。21.根据权利要求20所述的细胞群，其中所述CAR靶向肿瘤相关抗原。22.根据权利要求21所述的细胞群，其中所述肿瘤相关抗原选自由α-叶酸受体、CAIX、CD19、CD20、CD30、CD33、CEA、EGP-2、erb-B2、erb-B2,3,4、FBP、GD2、GD3、Her2/neu、IL-13R-a2、k-轻链、LeY、MAGE-A1、间皮素和PSMA组成的组。23.根据权利要求14-22任一项所述的细胞群，其中至少部分所述修饰免疫细胞群表达除CXCR4以外的内源肿瘤细胞归巢受体。24.根据权利要求14、15或20-22任一项所述的细胞群，其中与未修饰免疫细胞上CXCR4受体的平均数量相比，所述修饰免疫细胞群的细胞外表面上具有50％或更少的CXCR4受体数量。25.一种药物组合物，包括有效量的前述权利要求任一项所述的修饰免疫细胞或细胞群及一种或多种药学上可接受的赋形剂。26.一种体外修饰免疫细胞，包括在所述免疫细胞外表面上的肿瘤细胞归巢受体，并且进一步包括对CXCR4基因或基因转录本的直接或间接抑制，从而使细胞外表面上CXCR4受体表达减少或消失。27.一种体外修饰免疫细胞，其经修饰以在所述修饰免疫细胞的细胞外表面上过表达CXCR7受体。28.根据权利要求27所述的细胞，其中向患者施用时，所述CXCR7受体与CXCL12结合。29.根据权利要求27或28所述的细胞，其中所述免疫细胞的来源是自身、同种或异种。30.根据权利要求27或28所述的细胞，其中所述免疫细胞来源于癌症患者。31.根据权利要求27-30任一项所述的细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、B细胞或天然杀伤细胞。32.根据权利要求27所述的细胞，其中所述免疫细胞经进一步修饰，在免疫细胞表面上表达肿瘤细胞归巢受体。33.根据权利要求32所述的细胞，其中所述肿瘤细胞归巢受体是嵌合抗原受体、Fc受体或它们的组合。34.根据权利要求33所述的细胞，其中所述嵌合抗原受体靶向癌症相关抗原。35.根据权利要求34所述的细胞，其中所述癌症相关抗原选自由α-叶酸受体、CAIX、CD19、CD20、CD30、CD33、CEA、EGP-2、erb-B2、erb-B2,3,4、FBP、GD2、GD3、Her2/neu、IL-13R-a2、k-轻链、LeY、MAGE-A1、间皮素和PSMA组成的组。36.根据权利要求27、28或32-35任一项所述的细胞，其中与未修饰免疫细胞上CXCR7受体的平均数量相比，所述免疫细胞的细胞外表面上具有10％或更多的CXCR7受体数量。37.一种体外修饰免疫细胞群，其中至少部分所述修饰免疫细胞在免疫细胞的细胞外表面上过表达CXCR7受体。38.根据权利要求37所述的细胞群，其中向患者施用时，所述CXCR7受体与CXCL12结合。39.根据权利要求37或38所述的细胞群，其中所述免疫细胞的来源是自身、同种或异种，或它们的组合。40.根据权利要求37-39任一项所述的细胞群，其中所述免疫细胞来源于癌症患者。41.根据权利要求37-40任一项所述的细胞群，其中所述免疫细胞是T细胞、B细胞、NK细胞或它们的组合。42.根据权利要求37所述的细胞群，其中至少部分所述免疫细胞经进一步修饰，在所述免疫细胞的表面上表达肿瘤细胞归巢受体。43.根据权利要求42所述的细胞群，其中所述肿瘤细胞归巢受体是嵌合抗原受体、Fc受体或它们的组合。44.根据权利要求43所述的细胞群，其中所述嵌合抗原受体靶向癌症相关抗原。45.根据权利要求44所述的细胞群，其中所述癌症相关抗原选自由α-叶酸受体、CAIX、...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·C·波南斯基，D·佩瑞特，P·里夫斯，
申请(专利权)人：爱普瑞希斯有限公司，马萨诸塞总医院运营总医院公司，
类型：发明
国别省市：美国,US