【技术实现步骤摘要】
一种邻位连接技术用于定量检测CRP含量的试剂盒、制备及使用方法
本专利技术涉及一种邻位连接技术用于体外免疫诊断检测人体内CRP的含量,属于疾病诊断检测领域。
技术介绍
C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是急性时相反应蛋白之一,1930年美国洛克菲勒研究院AVERY实验室的Tillett和Fransic发现急性感染患者的血清能和肺炎双球菌细胞壁上的C多糖发生沉淀反应,后证实参与反应的是一种蛋白质,故称之为C反应蛋白。血清CRP水平是指示细菌感染的一项敏感而客观的指标。细菌感染时,血清CRP的水平可以中等度至明显升高,阳性率可达90%以上。而病毒等感染时CRP水平多正常或轻度升高,因此可以帮助细菌感染与非细菌感染的鉴别诊断。此外,定量测定脑脊液、胸腔积液中的CRP水平亦可以对脑膜炎、胸膜炎的鉴别诊断有一定意义。不仅如此,CRP水平还与感染范围和感染严重程度有一定关系。目前检测CRP含量的常用方法包括有酶联免疫吸附试验法和免疫比浊法等。这些方法均存在相应的缺点,酶联免疫吸附试验法的检测灵敏度较低,免疫比浊法存在液态的胶乳试剂稳定性不佳,检测结果精准性不佳。而本专利技术提出的基于一种邻位连接技术检测CRP含量的免疫诊断检测方法,具有检测灵敏度高、检测特异性强、样品损耗低、操作简单、检测设备常见等优势,将其应用于细菌感染的诊断,可以提高细菌感染与非细菌感染鉴别的准确性,具有极大的市场价值。
技术实现思路
针对现有技术中存在的技术问题,本专利技术提供一种可用于定量检测CRP的检测试剂盒、其制备及使用方法。本专利技术通过以下技术方案实现:一种制备基于邻 ...
【技术保护点】
1.一种邻位连接技术用于定量检测CRP含量的试剂盒、制备及使用方法,其特征在于:1)试剂盒主要组成:CRP探针A、CRP探针B、连接缓冲液、qPCR反应液;2)使用方法:将待测样本加入到反应孔中,再加入CRP探针A和CRP探针B,孵育5‑30min后加入到连接缓冲液反应5‑30min,最后与qPCR反应液进行混合;3)检测方法:对上述2)中的最终反应液进行qPCR,测量计算每个反应孔的Ct值。
【技术特征摘要】
1.一种邻位连接技术用于定量检测CRP含量的试剂盒、制备及使用方法,其特征在于:1)试剂盒主要组成:CRP探针A、CRP探针B、连接缓冲液、qPCR反应液;2)使用方法:将待测样本加入到反应孔中,再加入CRP探针A和CRP探针B,孵育5-30min后加入到连接缓冲液反应5-30min,最后与qPCR反应液进行混合;3)检测方法:对上述2)中的最终反应液进行qPCR,测量计算每个反应孔的Ct值。2.一种邻位连接技术用于定量检测CRP含量的试剂盒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1)CRP探针A的制备;2)CRP探针B的制备。3.根据权利要求1所述的CRP探针A和探针B均为抗CRP抗体偶联的寡聚脱氧核苷酸。4.根据权利要求3所述的抗CRP抗体为针对CRP不同表位的单克隆抗体或多克隆抗体。5.根据权利要求3所述的CRP探针A上的寡聚脱氧核苷酸a序列为:5’-GCATTGATCTAGTCATTCTAGTTATGTAGGGCCAACGACGACTGCAGATGAATTAATGAGGA-3’。6.根据权利要求3所述的CRP探针B上的寡聚脱氧核苷酸b序列为:5’-CGTAGCCGGCATATGGT...
【专利技术属性】
技术研发人员:徐林,
申请(专利权)人:南京天纵易康生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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