利用FGF12的血管平滑肌细胞增殖性疾病的诊断、预防或治疗用组合物制造技术

本发明专利技术涉及平滑肌细胞增殖性疾病的治疗用组合物、诊断用组合物和诊断标志物的检测方法，具体而言涉及包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体或FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病的治疗用组合物，包含测量FGF12 mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的平滑肌细胞增殖性疾病的诊断用组合物，以及利用所述组合物的平滑肌细胞增殖性疾病的标志物检测方法。通过本发明专利技术的包含编码FGF12的多核苷酸的组合物可以过表达FGF12，有效抑制平滑肌细胞的增殖，包含FGF12蛋白或其片段的组合物也同样可以期待类似的效果，因此可以开发能够预防或治疗平滑肌细胞增殖性疾病的有效基因或蛋白质治疗剂。此外，本发明专利技术的用于测量FGF12的表达水平的诊断用组合物和诊断标志物检测方法可以有效地利用于血管狭窄、血管再狭窄、肺动脉高压和动脉硬化等平滑肌细胞增殖性疾病的诊断。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用FGF12的血管平滑肌细胞增殖性疾病的诊断、预防或治疗用组合物
本申请主张于2015年8月12日提交的韩国专利申请第10-2015-0113727号的优先权，所述说明书全部内容都是本申请的参考文献。本专利技术涉及血管平滑肌细胞增殖性疾病的治疗用组合物、诊断用组合物和诊断标志物的检测方法，具体而言涉及包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体或FGF12蛋白或其片段作为活性成分的血管平滑肌细胞增殖性疾病的治疗用组合物，以及包含测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的血管平滑肌细胞增殖性疾病的诊断用组合物，以及利用所述组合物的血管平滑肌细胞增殖性疾病的标志物检测方法。
技术介绍
血管平滑肌细胞形成并支持血管结构，并通过自主神经系统和激素的调节反复松弛和收缩，对顺畅的血液循环非常重要。血管平滑肌细胞在健康状态下高度表达平滑肌特异性基因如SMA、SM22α、SM-MHC、SM-钙调蛋白(calponin)、结蛋白(desmin)等，几乎不进行细胞增殖(proliferation)，但当由于血管伤口、动脉粥样硬化、炎症或其他血管疾病等引起血管损伤而需要恢复血管损伤时，作为重构(remodeling)的一部分，发生活跃的细胞增殖和迁移(migration)。当这些血管平滑肌细胞的增殖没有被正常调节，并由于异常信号的传递或重复的损伤而过度发生，平滑肌细胞会从原始位置即中膜(medialayer)移动到内膜(intimalayer)并继续增殖，从而形成血管新生内膜(neointimallayer)，若伴随炎症及血栓生成，导致血管壁增厚和血管腔变窄,即引起血管狭窄及肺动脉高压等疾病。目前血管狭窄的治疗主要通过支架手术或血管成形术等外科手术进行，而这些手术也涉及血管损伤因此复发的可能性很高。在临床上尝试使用抗血小板剂、抗凝剂、抗过敏剂或抑制组织再生的药物来治疗或预防血管狭窄，但治疗效果不充分。因此，需要开发能够抑制平滑肌细胞增殖来治疗血管狭窄的治疗制剂，以及能够诊断疾病并诊断治疗预后的诊断用试剂。伴有所述平滑肌细胞增殖的疾病中，肺动脉高压(pulmonaryarterialhypertension，PAH)尤其没有明显区别于其他疾病的特征性症状或体征，因此早期诊断很困难，而且进展缓慢，从最初症状的发生到确诊的时间很长，死亡率高。肺动脉高压是向肺部供血的肺动脉的血压变高，使肺部的血液循环变差的疾病，被定义为平均肺动脉血压为25mmHg或更高的情况。疾病最初无症状，但随疾病进展，需要通过变窄的血管向肺部输入血液，这使心脏过载，心输出量减少。其结果是，发生运动时的呼吸困难、疲劳、全身无力、头晕等症状，或发生咯血、心绞痛、胸痛和下肢浮肿，在严重的情况下，甚至会导致昏厥或心脏麻痹。肺动脉高压是一种罕见的疾病，发生率为每百万人中2～10人，但考虑到诊断困难，实际患者人数预计相当可观，同时，当被确诊为肺动脉高压，一年内死亡率为15％，五年后死亡率高达50％以上，是一种难治性疾病。但与此相反，治疗策略依然停留在缓解症状的对症治疗中，而有效的药物和治疗方法却很少。因此，迫切需要开发能够实现对包括肺动脉高压在内的平滑肌细胞过度增殖引起的疾病的早期诊断有效的诊断试剂及其疗法。
技术实现思路
本专利技术人在研究平滑肌细胞的增殖过程中，发现FGF12的表达水平与血管平滑肌细胞的增殖密切相关，并确认在平滑肌细胞的增殖活跃的受损血管中FGF12的表达减少，以及在受损血管中FGF12的过表达抑制了平滑肌细胞的增殖，从而完成本专利技术。因此，本专利技术的目的是提供包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。本专利技术的另一个目的是提供包含FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。本专利技术的另一个目的是提供包含测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的平滑肌细胞增殖性疾病的诊断用组合物。本专利技术的另一个目的是提供平滑肌细胞增殖性疾病的标志物检测方法，该方法为了提供诊断平滑肌细胞增殖性疾病所需的信息，包含(a)提供受试者的样本的步骤；及(b)测量所述样本中的FGF12表达水平的步骤；和(c)将所述FGF12的表达水平与正常人进行比较，把FGF12表达水平低于正常人的受试者判定为已患有或将可能患有平滑肌细胞增殖性疾病的步骤。本专利技术的另一个目的是提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物的，含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体的用途。本专利技术的另一个目的是提供平滑肌细胞增殖性疾病的治疗方法，其特征在于，把包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物按照有效量投入到需要的个体。本专利技术的另一个目的是提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病治疗用制剂的，FGF12蛋白或其片段的用途。本专利技术的另一个目的是提供平滑肌细胞增殖性疾病的治疗方法，包括把包含FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物按照有效量投入到需要的个体。本专利技术的另一个目的是提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病诊断用制剂的，测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的用途。本专利技术的另一个目的是提供平滑肌细胞增殖性疾病的诊断方法，包括把含有测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的平滑肌细胞增殖性疾病诊断用组合物按照有效量投入到需要的个体。为了达到所述目的，本专利技术提供包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供包含FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供包含测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的平滑肌细胞增殖性疾病的诊断用组合物。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供平滑肌细胞增殖性疾病的标志物检测方法，该方法为了提供诊断平滑肌细胞增殖性疾病所需的信息，包含(a)提供受试者的样本的步骤；及(b)测量所述样本中的FGF12表达水平的步骤；和(c)将所述FGF12的表达水平与正常人进行比较，把FGF12表达水平低于正常人的受试者判定为已患有或将可能患有平滑肌细胞增殖性疾病的步骤。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物的，含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体的用途。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供平滑肌细胞增殖性疾病的治疗方法，其特征在于，把包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物按照有效量投入到需要的个体。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病治疗用制剂的，FGF12蛋白或其片段的用途。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供平滑肌细胞增殖性疾病的治疗方法，包括把包含FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物按照有效量投入到需要的个体。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术提供用于制备平滑肌细胞增殖性疾病诊断用制剂的，测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的用途。为了达到本专利技术的另一个目的，本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.12 KR 10-2015-01137271.一种包含含有编码FGF12的多核苷酸的重组表达载体作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。2.根据权利请求第1项的组合物，其特征为，所述编码FGF12的多核苷酸包含由SEQIDNO：1或SEQIDNO：3所示的核苷酸序列。3.根据权利请求第1项的组合物，其特征为，所述平滑肌细胞增殖性疾病选自血管狭窄、血管再狭窄、肺动脉高压、动脉硬化、动脉粥样硬化、心力衰竭、心肌梗塞、心绞痛、心律失常、先天性心脏病、中风和外周血管狭窄组合的群。4.根据权利请求第1项的组合物，其特征为，所述重组表达载体是重组病毒载体。5.根据权利请求第4项的组合物，其特征为，所述重组病毒载体选自腺病毒载体、腺伴随病毒载体、逆转录酶病毒载体、疱疹病毒载体、慢病毒载体、牛痘病毒载体和痘病毒载体组合的群。6.一种包含FGF12蛋白或其片段作为活性成分的平滑肌细胞增殖性疾病治疗用组合物。7.根据权利请求第6项的组合物，其特征为，所述FGF12蛋白包含由SEQIDNO：2或SEQIDNO：4所示的氨基酸序列。8.一种包含测量FGF12mRNA或FGF12蛋白表达水平的制剂的平滑肌细胞增殖性疾病的诊断用组合物。9.根据权利请求第8项的组合物，其特征为，所述制剂是与FGF12mRNA特异性结合的探针或引物组。10.根据权利请求第9项的组合物，其特征为，所述FGF12mRNA包含由SEQIDNO：1或SEQIDNO：3所示的核苷酸序列。11.根据权利请求第9项的组合物，其特征为，所述引物组是由SEQIDNO：15和SEQIDNO：16所示的核苷酸序列组成。12.根据权利请求第8项的组合物，所述制剂是与FGF12蛋白特异性结合的抗体。13.根据权利请...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐源希，
申请(专利权)人：中央大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国,KR