循环细胞、蛋白质和核酸的体内收集和局部定量以及特征分析制造技术

本发明专利技术涉及通过收集装置体内捕获的循环细胞内RNA或蛋白质的原位局部多重检测，或者通过所述装置捕获的游离循环核酸的检测。所述装置包括配备有检测受体的功能性三维捕获表面，并且所述分子分析基于高度特异的挂锁探针连接或邻位连接技术(PLA)，随后进行滚环扩增(RCA)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】循环细胞、蛋白质和核酸的体内收集和局部定量以及特征分析
本专利技术涉及体外诊断学的
专利技术背景由于特定转录本的表达水平在异种细胞群中会变化，因而期望以特异性且定量的方式直接在单细胞内原位检测mRNA。此外，最终归结为单核苷酸解析的单分子灵敏度对研究序列变异(包括点突变、等位基因失活或表达转录本的剪接和拷贝数变化)至关重要。已经将等位基因转录本相对表达中的差异或单核苷酸序列变体的存在鉴定为重要的诊断疾病生物标志物，特别是用于诊断不同的癌症。当前用于整体分析较大数目细胞的分析可能不能检测稀有细胞中的分子，也不能提供关于各分子的细胞来源的信息。因此，与异种细胞群中的平均表达水平相比，这些方法不能准确地反映单细胞中表达的可能偏差。在单细胞水平检测单一mRNA分子是可能的，例如通过荧光原位杂交(FISH)或者通过对激光捕获显微切割材料进行聚合酶链式反应(PCR)。然而，用FISH不能分辨高度相似的序列和序列变体，而显微切割非常麻烦且不适用于诊断。此外，这两种方法还限于一次分析单一/少量标志物。基于挂锁(padlock)探针的分析依赖于靶标依赖性环化事件之后通过高度特异性的探针杂交本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测样品中的靶标分子的体外方法，其中所述样品包含用于体内和/或体外富集样品材料的收集器装置上的对象的身体材料，所述方法包括下述步骤：a)在所述收集器装置上提供包含所述对象的身体材料的样品；b)在所述收集器装置上检测所述身体材料中的靶标分子，其中所述检测包括滚环扩增(RCA)步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.11 US 62/253,9071.检测样品中的靶标分子的体外方法，其中所述样品包含用于体内和/或体外富集样品材料的收集器装置上的对象的身体材料，所述方法包括下述步骤：a)在所述收集器装置上提供包含所述对象的身体材料的样品；b)在所述收集器装置上检测所述身体材料中的靶标分子，其中所述检测包括滚环扩增(RCA)步骤。2.如权利要求1所述的方法，其中所述收集器装置上的身体材料来源于体液。3.如权利要求2所述的方法，其中所述体液是血液或淋巴液。4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述身体材料选自细胞、循环DNA、循环RNA或蛋白质。5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述靶标分子是至少一种特异性DNA、RNA或蛋白质分子。6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述身体材料是细胞，所述靶标分子是细胞内RNA，并且其中步骤b)的检测包括下述步骤：在进行RCA步骤之前，通过使用随机引物或特异性引物将RNA原位转换为互补DNA(cDNA)。7.如权利要求6所述的方法，其中所述RNA是mRNA。8.如权利要求6或7所述的方法，其中在通过RCA利用探针的连接和扩增进行探针的环化事件之后，用互补的挂锁探针对所述cDNA序列进行原位探测。9.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述身体材料是细胞，所述靶标分子是细胞内RNA，并且其中在步骤b)中，在通过RCA利用探针的连接和扩增进行探针的环化事件之后，用互补的挂锁探针对所述细胞内RNA序列进行原位探测。10.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述身体材料是循环DNA，并且其中在步骤b)中，在通过RCA利用探针的连接和扩增进行探针的环化事件之后，用互补的挂锁探针对所述循环DNA序列进行探测。11.如权利要求1至5中...

【专利技术属性】
技术研发人员：安妮卡·阿尔福德，阿敏·艾拉海莱比，马茨·尼尔森·伯尼茨，
申请(专利权)人：格拉茨医科大学，
类型：发明
国别省市：奥地利,AT