一种人脐带血干细胞的分离培养方法技术

一种人脐带血干细胞的分离培养方法，包括：(1)脐带血全血细胞分离和血浆的预处理；(2)细胞培养皿包被抗CD34抗体和抗CD44抗体；(3)向细胞培养皿中加入步骤(1)制备的脐带血全血细胞，倾去未结合的细胞层；(4)加入预处理的血浆和细胞培养液。本发明专利技术所述方法能充分利用脐带血，将多种干细胞进行一步分离培养。

A method for isolation and culture of human umbilical cord blood stem cells

A method for isolation and culture of human umbilical cord blood stem cells includes: (1) isolation of whole blood cells from umbilical cord blood and pretreatment of plasma; (2) coating of cell culture dishes with anti-CD34 antibodies and anti-CD44 antibodies; (3) adding steps (1) preparation of whole blood cells from umbilical cord blood, dumping of unbounded cell layers; (4) adding pretreated plasma. And cell culture medium. The method can make full use of umbilical cord blood to separate and cultivate a variety of stem cells.

【技术实现步骤摘要】
一种人脐带血干细胞的分离培养方法
本专利技术属于生物
，特别是干细胞工程领域。具体涉及一种人脐带血干细胞的分离培养方法。
技术介绍
干细胞不但可以产生或分泌大量的生物活性因子，而且干细胞内也含有丰富的生物活性物质，这些干细胞生物活性因子或物质可有效调控机体细胞信号传导、活化人体干细胞，进而生理性修复或替代机体损伤、病变及衰老的细胞等。例如干细胞可以产生干细胞生长因子(SCF)、神经生长因子(NGF)、基质细胞源性生长因子(SDF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、表皮生长因子(EGF)、白介素-6与白介素-7(IL-6与IL-7)、巨核细胞集落刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN)等因子，这些细胞因子具有促进细胞增殖、分化、抗凋亡等功能；干细胞还可以产生天然免疫蛋白，例如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE等，可以抵御或修复自身和外界因素对机体细胞造成的损伤。因此，利用干细胞分泌产生的生物活性因子或干细胞内的生物活性物质激活机体干细胞，进而通过自身干细胞生理性修复或替代机体损伤、病变及本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人脐带血干细胞的分离培养方法，包括：(1)脐带血全血细胞分离和血浆的预处理；(2)细胞培养皿包被抗CD34抗体和抗CD44抗体；(3)向细胞培养皿中加入步骤(1)制备的脐带血全血细胞，去未结合的细胞；(4)加入预处理的血浆和细胞培养液。

【技术特征摘要】
1.一种人脐带血干细胞的分离培养方法，包括：(1)脐带血全血细胞分离和血浆的预处理；(2)细胞培养皿包被抗CD34抗体和抗CD44抗体；(3)向细胞培养皿中加入步骤(1)制备的脐带血全血细胞，去未结合的细胞；(4)加入预处理的血浆和细胞培养液。2.如权利要求1所述一种人脐带血干细胞的分离培养方法，其特征在于：所述步骤(1)包括取抗凝脐带血，2000rpm离心10min，取上层血浆，向下层的血细胞中加入HANK’S液重悬备用。3.如权利要求1所述一种人脐带血干细胞的分离培养方法，其特征在于：所述步骤(1)中血浆预处理包括56℃保温30min。4.如权利要求1所述一种人脐带血干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述步骤(2)包括分别取抗CD34抗体和抗CD44抗体以0.01M，pH9.6的缓冲液稀释至10μg/L，向细胞培养皿中加入等量的抗CD34抗体稀释液和抗CD44抗体稀释液，4℃过夜，倾去多余的液体。5.如权利要求1所述一种人脐带血干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲晓峰，
申请(专利权)人：长春博邦企业管理咨询有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22