冬虫夏草菌丝体及其发酵培养基和发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种冬虫夏草菌丝体发酵培养基及培养方法。其中冬虫夏草菌丝体发酵培养基在传统培养基的基础上进一步包含山梨糖、海参提取物、当归提取物和黄豆粉。与天然虫草相比，通过本发明专利技术的培养基可提高虫草多糖的含量，达到7.5重量％，虫草酸的含量达到8.0％，菌丝体干重明显提高，可达25g/L。另外，所得菌丝体粉的氨基酸、腺苷、重金属等指标均优于天然冬虫夏草。

Cordyceps sinensis mycelium and its fermentation medium and fermentation method

The invention discloses a Cordyceps sinensis mycelium fermentation medium and a culture method. Cordyceps sinensis mycelium fermentation medium further contains sorbose, sea cucumber extract, angelica extract and soybean powder on the basis of traditional culture medium. Compared with natural cordyceps, the culture medium of the invention can increase the content of Cordyceps polysaccharide to 7.5 weight, the content of cordycepin acid to 8.0%, and the dry weight of mycelium to 25 g/L. In addition, the amino acids, adenosine and heavy metals of mycelial powder were better than those of natural Cordyceps sinensis.

【技术实现步骤摘要】
冬虫夏草菌丝体及其发酵培养基和发酵方法
本专利技术涉及冬虫夏草菌丝体及其发酵培养基和发酵方法。
技术介绍
冬虫夏草属于麦角菌科、虫草属的真菌种类，拉丁名Cordycepssinensis，也写作phiocordycepssinensis，真菌名称为蝙蝠蛾被毛孢，也叫中国被毛孢。冬虫夏草在中国及亚洲国家具有长期的药用历史，是珍贵的中药滋补品，它的治疗与保健作用从古代医书《本草从新》到当代《中国药典》都有记录。冬虫夏草的自然生长区域，分布在青海、西藏等青藏高原的高海拔地区。由于掠夺性开采，致使资源与环境均遭到严重破坏，产品价格连续攀升。冬虫夏草滋补保健价值极高，但天然冬虫夏草价格非常昂贵。而以纯种的冬虫夏草菌-中国被毛孢为菌种，经人工发酵技术培养的冬虫夏草菌丝体，由于其培养环境可控、营养供给合理，其中的某些功效成分含量更高、而重金属等杂质含量能更有效的控制。所以，冬虫夏草菌丝体自然成为天然冬虫夏草的绝佳替代品。目前冬虫夏草菌丝体主要采用深层发酵培养来培养，产量普遍较低，发酵培养完成时菌丝体干重与发酵液体积比仅有1％，生产成本相对较高，且其中关键营养物质含量较低。因此，如何在提高冬虫夏草菌丝体营养成分的同时，提高冬虫夏草菌丝体的产量和生产效率是本领域技术人员亟待解决的技术问题。
技术实现思路
为了解决至少部分上述问题，本专利技术通过深入研究，配制了一种新型冬虫夏草菌丝体发酵培养基，通过该培养基发酵可改善所述冬虫夏草菌丝体的营养成分，并大幅提高产量，增强其经济利用价值。具体的，本专利技术包括以下内容。本专利技术的一方面，提供一种冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其包含山梨糖、海参提取物、当归提取物和黄豆粉。优选地，基于100重量份所述培养基，所述山梨糖为0.5-3重量份，所述海参提取物为0.01-0.2重量份，所述当归提取物为0.01-0.2重量份和所述黄豆粉为0.5-4重量份。优选地，所述山梨糖与所述海参提取物的重量比在300:1-2.5:1的范围内。优选地，本专利技术的冬虫夏草菌丝体发酵培养基进一步包含葡萄糖、酵母浸出粉、硫酸镁和磷酸二氢钾。优选地，基于100重量份所述培养基，所述葡萄糖为1-5重量份，所述酵母浸出粉为1-3重量份，所述硫酸镁为0.01-0.05重量份和所述磷酸二氢钾为0.01-0.05重量份。本专利技术的另一方面，提供一种冬虫夏草菌丝体发酵方法，其中包括在适于生长的环境中使菌丝体与本专利技术所述的培养基接触的步骤。优选地，所述适于生长的环境包括pH5.5-7.0，培养温度12-18℃。本专利技术的再一方面，提供一种冬虫夏草菌丝体，其通过使用本专利技术所述的培养基发酵获得，或者通过本专利技术所述的方法获得。优选地，本专利技术提供的冬虫夏草菌丝体中虫草酸的含量为7.5重量％以上。进一步优选地，虫草多糖的含量为7.2重量％以上。通过解释以下本专利技术的优选实施方案，本专利技术的其他目的和优点将变得清楚。具体实施方式下文中，详细描述本专利技术的优选实施方案。本文中，除非有特别说明，否则“％”或“wt％”指重量百分数。本专利技术通过特定组成的培养基来改善冬虫夏草菌丝体的营养成分。其中本专利技术的培养基是通过在传统培养基成分的基础上添加特定的成分而获得的。如本专利技术所述，“传统培养基”是本领域内已经用于或者根据现有技术已知能够使冬虫夏草菌丝体发酵、培养、生长、增殖的任何培养基。作为传统培养基的实例之一，其包含葡萄糖、鱼胨、蛋白胨、酵母膏、黄豆粉、硫酸镁和磷酸二氢钾中的至少之一。作为上述成分可使用市场上商购可得的任何成分，也可利用目前已知技术或手段根据需要随时或现场制作。作为上述成分的葡萄糖，基于培养基100份总重量，其含量优选1-5份，更优选2.5-3.5份，进一步优选3份。葡萄糖作为糖源具有分子量小，吸收利用率高的优点。在不损害本专利技术目的前提下，本专利技术也可使用其它糖类作为糖源。作为上述成分的鱼胨，基于培养基100份总重量，其含量可为0.25-0.5重量份，更优选0.3、0.4重量份等。作为上述成分的蛋白胨可为0.75-1重量份，优选0.8、0.9重量份。作为上述成分的酵母浸出粉可为1-3重量份，优选1.5、2.0重量份等。作为上述成分的黄豆粉，可为0.5-4重量份，例如2或2.5重量份等。上述各成分要均衡搭配，成分过高会抑制菌丝生长，导致生长速度减慢，成分过低营养提供不充分，导致后期生长速度跟不上。氮源总含量要控制在3-7重量份之间本专利技术的培养基中，作为蛋白质源可使用鱼胨、蛋白胨、黄豆粉和酵母浸出粉中的任何一种，或使用上述各成分中的两种以上的组合。硫酸镁和磷酸二氢钾为培养基提供菌丝体生长所必需的无机物。其含量并不作特别限定，只要能够提供菌丝体生长所需必要无机成分即可。为了保证菌丝体的正常生长，作为上述成分的硫酸镁可为0.01重量份或0.02重量份等。作为上述成分的磷酸二氢钾，其可为0.02重量份或0.03重量份等。作为本专利技术的特定成分之一为山梨糖，本专利技术人发现山梨糖的添加不仅影响了所得菌丝体的干重，而且还会提高虫草酸的含量。优选地，山梨糖的含量基于培养基总重量可为0.5-3重量份，优选1.0-2.5重量份，更优选1.5-2.5重量份，例如2.0重量份等。本专利技术人发现至少在0.5-2.5重量份含量范围内，随着山梨糖量的增加，所得虫草酸的含量相应也会增加。作为本专利技术的特定成分之一为当归提取物，其可以是当归的水性提取物或有机溶剂提取物。本提取物购自陕西瑞康生物工程有限公司本专利技术人发现当归提取物能够降低菌丝体的灰分。作为当归提取物的含量并不特别限定，可根据不同的提取工艺而适量添加。作为实例，可优选0.01-0.2重量份，更优选0.05-0.15重量份，例如0.1重量份，其于培养基总重量。作为本专利技术的特定成分之一为海参提取物。其可包括海参的水性提取物或有机溶剂提取物。本提取物购自北海臻美达海洋生物制品有限公司。本专利技术人发现海参提取物的添加有利于提高菌丝体的胞内多糖含量，特别是具有重要药物价值的虫草多糖的含量。作为海参提取物的含量并不特别限定，可根据不同的提取工艺而适量添加。作为实例，可优选0.01-0.2重量份，更优选0.05-0.15重量份，例如0.1重量份，其于培养基总重量。需要说明的是，本专利技术中山梨糖与海参提取物的重量比需要控制在300:1-2.5:1的范围内，优选200:1-20:1，更优选100:1-30:1等。山梨糖的比例过低即影响到虫草酸的含量，也影响到胞内多糖的含量。另一方面如果海参提取物的比例过低对于虫草酸的含量也具有影响。这在本领域内是出乎意料的。本专利技术的冬虫夏草菌发酵培养基的制备可采用本领域内已知的任何方法。在此仅列举以下示例性方法：将固体基质与营养液(或水)按合适比例配制；用玻璃三角瓶盛装以上筛选培养基，用棉塞纱布包住瓶口，121℃灭菌30min，冷却至室温即可。本专利技术的适于培养的条件或环境包括12-18℃的温度，和5.5-7.0的pH值。本专利技术的培养或发酵方法并不限定，可使用本领域内已知的任何技术或方法。本专利技术在此仅示例性列举以下方法。取青藏高原新鲜采集的冬虫夏草，在特定筛选培养基上进行分离筛选3代，获得无杂菌的纯菌株，将纯菌株接种于含100克灭菌好的固体筛选培养基的三角瓶中，使菌种均匀分布在培养基表面；将接种后的玻璃瓶置于人工气候箱中，适宜温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其包含山梨糖、海参提取物、当归提取物和黄豆粉。

【技术特征摘要】
1.一种冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其包含山梨糖、海参提取物、当归提取物和黄豆粉。2.根据权利要求1所述的冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其中基于100重量份所述培养基，所述山梨糖为0.5-3重量份，所述海参提取物为0.01-0.2重量份，所述当归提取物为0.01-0.2重量份和所述黄豆粉为0.5-4重量份。3.根据权利要求1或2所述的冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其中所述山梨糖与所述海参提取物的重量比在300:1-2.5:1的范围内。4.根据权利要求1所述的冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其进一步包含葡萄糖、酵母浸出粉、硫酸镁和磷酸二氢钾。5.根据权利要求4所述的冬虫夏草菌丝体发酵培养基，其中基于100重量份所述培养基，所述葡萄糖为1-5重量份，所述酵母浸...

【专利技术属性】
技术研发人员：王鸿艳，王丽琴，张薇，傅立峰，
申请(专利权)人：杭州中美华东制药有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33