一种用于诊断和治疗肝细胞癌的lncRNA标志物制造技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断和治疗肝细胞癌的lncRNA标志物，具体的所述lncRNA为LINC01694。本发明专利技术公开了LINC01694在制备诊断肝细胞癌的产品以及治疗肝细胞癌的药物组合物中的应用。本发明专利技术同时公开了一种诊断肝细胞癌的试剂盒以及治疗肝细胞癌的药物组合物。

A lncRNA marker for the diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma

The invention discloses a lncRNA marker for the diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma, and the specific lncRNA is LINC01694. The invention discloses the application of LINC01694 in the preparation of a product for diagnosing hepatocellular carcinoma and a pharmaceutical composition for treating hepatocellular carcinoma. The invention also discloses a kit for diagnosing hepatocellular carcinoma and a pharmaceutical composition for treating hepatocellular carcinoma.

【技术实现步骤摘要】
一种用于诊断和治疗肝细胞癌的lncRNA标志物
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种用于诊断和治疗肝细胞癌的lncRNA标志物，具体的所述lncRNA为LINC01694。
技术介绍
肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)作为世界上最常见的恶性肿瘤之一，全球发病率居第六位，死亡率居第二位，而死于HCC的患者的一半出现在我国，成为我国人民健康的重大威胁(CHENW,ZHENGR,BAADEPD,etal.CancerstatisticsinChina,2015[J]CA:acanceriournalforclinicians.2016.66(21:115-32.)。探索与HCC相关的关键基因，并将其作为HCC早期诊疗指标以及治疗的干预靶点，不仅具有重要的临床应用价值，也为HCC发病机制研究提供新思路。HCC的致病因素包括长期酗酒、慢性病毒性肝炎、脂肪肝、代谢性或遗传性疾病等，在我国，由慢性乙肝病毒(hepatitisBvirus，HBV)感染而导致的肝硬化是目前已知的引起HCC最主要的危险因素(WANGM,XID,NINGQ.Virus-inducedhepatocellularcarcinomawithspecialemphasisonHBV[J].Hepatologyinternational,2017,11(2):171-80.)。近年来，针对HCC的治疗方式多样且发展迅速，包括手术治疗(肝叶切除、肝移植)，物理疗法(射频消融)，化学疗法(介入化疗、化疗泵化疗)，以及最近逐渐发展的分子靶向治疗，基因治疗，免疫治疗等(MAUERK,O'KELLEYR,PODDAN,etal.Newtreatmentmodalitiesforhepatocellularcancer[J].Currentgastroenterologyreports,2015,17(5):442.)。但HCC病人的总体疗效及生存时间仍无明显改观，主要是因为起病隐匿，组织浸润性强并容易发生早期转移；晚期复发转移率高(ZHONGJH,RODRIGUEZAC,KEY,etal.Hepaticresectionasasafeandeffectivetreatmentforhepatocellularcarcinomainvolvingasinglelargetumor,multipletumors,ormacrovascularinvasion[J].Medicine,2015,94(3):e396.)。由此可见，肿瘤的高复发转移性是HCC治疗失败和病人死亡的主要原因。寻找和研究与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关的关键分子，对于理解HCC发生发展和转移的完整机制，筛选可靠的早期诊断指标，以及针对关键靶点建立有效的基因治疗策略均具有深远意义，也是HCC诊治研究领域发展的当务之急。随着基因芯片和高通量测序等方法的开展应用，相关文献指出，长链非编码RNA(longnoncodingRNAs,LncRNAs)在HCC侵袭转移的形成过程中发挥着重要作用(CN201710522694.9、CN201710522693.4)。LncRNAs是一类转录本长度超过200个核苷酸的不具备蛋白编码能力的RNA分子，可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达，广泛参与机体的生理和病理过程(LIC,CHENJ,ZHANGK,etal.ProgressandProspectsofLongNoncodingRNAs(1ncRNAs)inHepatocellularCarcinoma[J].Cellularphysiologyandbiochemistry:internationaljournalofexperimentalcellularphysiology,biochemistry,andpharmacology,2015,36(2):423-34.)。针对全基因组序列分析发现，LncRNAs中特定的超保守元件在肿瘤细胞中广泛表达，并且多分布在染色体的脆性位点和肿瘤相关区域，这类超保守元件异常表达会促使正常细胞发生恶性转化。随着研究不断深入，一些肿瘤相对特异性的1ncRNAs也陆续被发现。这些1ncRNAs的表达紊乱参与调控肿瘤细胞多种恶性表型的产生，如肿瘤生长、上皮-间质表型转化、侵袭、放化疗耐药表型形成等，有望成为未来肿瘤早期诊断及临床疗效判断的新靶标。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供一种用于肝细胞癌诊断和治疗的lncRNA标志物。本专利技术的目的之二在于提供lncRNA标志物在筛选治疗肝细胞癌的候选药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测LINC01694表达水平的试剂在制备诊断肝细胞癌的产品中的应用。进一步，所述试剂包括：特异性识别LINC01694的探针；或特异性扩增LINC01694的引物。进一步，特异性扩增LINC01694的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。本专利技术提供了一种诊断早期肝细胞癌的试剂盒，所述试剂盒包括检测LINC01694表达水平的试剂。进一步，所述试剂包括特异性识别LINC01694的探针；或特异性扩增LINC01694的引物。进一步，所述特异性扩增LINC01694的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。本专利技术提供了一种LINC01694基因的用途，用于筛治疗肝细胞癌的候选药物。进一步，筛选治疗肝细胞癌的候选药物的步骤如下：用待筛选物质处理表达或含有LINC01694基因的培养体系；和检测所述体系中LINC01694基因的表达；其中，若所述待筛选的物质可以抑制LINC01694基因的水平(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上；更佳的低80％以上)，则表明该待筛选物质是治疗肝细胞癌的候选药物。进一步，所述的步骤还包括：对上面步骤获得的候选药物进一步测试其抑制肝癌的效果，若测试化合物对肝癌有显著的抑制效果，则说明该化合物为治疗肝癌的候选药物。所述培养体系包括(但不限于)细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系(如动物模型，优选非人哺乳动物的动物模型，如鼠、兔、羊、猴等)等。本专利技术提供了一种LINC01694基因的用途，用于制备治疗肝细胞癌、和/或肝细胞癌浸润、和/或肝细胞癌转移的药物组合物。进一步，所述药物组合物包括LINC01694基因的抑制剂。其中，所述LINC01694的抑制剂选自：以LINC01694或其转录本为靶序列、且能够抑制LINC01694基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(siRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。优选的，所述抑制剂为siRNA；更为优选的所述siRNA的序列如SEQIDNO.7～8所示。本专利技术提供了一种治疗肝细胞癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括LINC01694基因的抑制剂。优选的，所述抑制剂为siRNA。更为优选的，所述siRNA的序列如SEQIDNO.7～10所示。更为优选的，所述siRNA的序列如SEQIDNO.7～本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LINC01694表达水平的试剂在制备诊断肝细胞癌的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测LINC01694表达水平的试剂在制备诊断肝细胞癌的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别LINC01694的探针；或特异性扩增LINC01694的引物。3.一种诊断早期肝细胞癌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测LINC01694表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂包括特异性识别LINC01694的探针；或特异性扩增LINC01694的引物。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性扩增LINC01694的引物序列如SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：董东，石小峰，马翠，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11