一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂制造技术

本发明专利技术涉及一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，其特征在于，试剂R1中包括缓冲液、4‑氨基安替比林、亚硝酸钠、离子平衡剂、抗坏血酸氧化酶、重金属离子螯合剂、牛血清白蛋白、十二烷基三甲基甜菜碱、曲拉通‑305、防腐剂；试剂R2中包括缓冲液、F‑DAOS（N‑乙基‑N‑(2‑羟‑3‑磺丙)‑3,5‑二甲氧‑4‑氟苯胺）、尿酸酶、牛血清白蛋白、过氧化物酶、防腐剂等组成成分，本发明专利技术具有非常好的抗干扰能力，特别是针对新生儿的样本，能够实现非常准确的检测。

An enzyme interference uric acid detection reagent with strong anti-interference ability

The present invention relates to an enzyme - Method uric acid detection reagent with strong anti-interference ability, which is characterized in that the reagent R1 includes buffer solution, 4 amino antipyrine, sodium nitrite, ion balance agent, ascorbic acid oxidase, heavy metal ion chelating agent, bovine serum albumin, twelve alkyl three methyl betaine, and traspertong 305, Preservative; the reagent R2 includes the components of the buffer solution, the F DAOS N (N ethyl N N), the uric acid enzyme, the bovine serum albumin, the peroxidase, the preservative and so on. The invention has a very good anti-interference ability, especially for the samples of the newborn. This is a very accurate test.

【技术实现步骤摘要】
一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂
本专利技术涉及一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，属于临床体外检测

技术介绍
尿酸（UA）是嘌呤代谢的最终产物，体内产生嘌呤后，会在肝脏中再次氧化为2，6，8--三氧嘌呤又称为尿酸，它具有清除氧自由基、抗氧化的作用，但亦有刺激平滑肌增殖的作用。尿酸是血中主要非蛋白氮(NPN)类代谢产物之一，正常情况下，体内的尿酸大约有1200毫克，每天新生成约600毫克，同时排泄掉600毫克，处于平衡的状态。但如果体内产生过多来不及排泄或者尿酸排泄机制退化，体内尿酸则会滞留过多，当血液尿酸浓度大于7毫克/分升，将导致人体体液变酸，影响人体细胞的正常功能，长期置之不理将会引发痛风。另外过于疲劳或是休息不足亦可导致代谢相对迟缓导致痛风发病。近年的研究表明血清中尿酸的浓度还与甘油三酯、肌酐的浓度呈正相关性，与心脏损害有关联，因此尿酸的检测和分析对临床诊断，了解病情进展，有重要参考价值。目前，测定尿酸的方法主要有酶法、伏安法、磷钨酸还原法、毛细管电泳法、液相色谱法和同位素稀释质谱法等。伏安法、磷钨酸还原法、毛细管电泳法三种方法在临床中的应用较少；而液相色谱法和同位素稀释质谱法两种方法具有准确度高，特异性强等优势，但是对仪器要求高，检测成本高，对人员的操作要求也很高，只有较大的医院或者科研单位才有使用；随着国内酶类提取技术的不断提高，以及酶类产品的稳定性的提高，使得酶法检测血液尿素有了很大的发展，成为目前临床中应用最广发的检测血尿酸的方法，但在临床应用的过程中出现新生儿样本检测结果不准确度的问题，其检测结果出现级低的结果甚至0值或者负值的情况，严重影响临床的检测和应用。由于新生儿血液成分非常的复杂，有区别于正常人的样本，并且新生儿样本多出现黄疸、溶血等问题，导致常规的酶法UA检测试剂在使用时出现干扰情况。因此根据酶法检测血UA抗干扰能力差这个问题，专利技术了一种抗干扰能力强的酶法UA检测试剂。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，特别是针对新生儿的样本，能够实现非常准确的检测。检测原理为：尿酸在尿酸酶作用下，生成尿囊素和过氧化氢（H2O2），再利用Trinder反应系统，过氧化氢在过氧化物酶（POD）催化下，与4-氨基安替比林（4-AAP）和色原，生成红紫色色素。反应液的颜色与尿酸浓度成正比。反应图解见图6。本专利技术采用以下技术方案：一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1和试剂R2的组成如下：试剂1（R1）：缓冲液20mmo1/L4-氨基安替比林1.2mmo1/L亚硝酸钠4mmol/L-8mmol/L离子平衡剂5mmol/L-10mmol/L抗坏血酸氧化酶3KU/L-5KU/L重金属离子螯合剂1mmol/L-2mmol/L牛血清白蛋白1g/L-5g/L十二烷基三甲基甜菜碱1ml/L-3ml/L曲拉通-3051ml/L-3ml/L防腐剂0.2g/L-0.5g/L试剂2（R2）：缓冲液100mmo1/LF-DAOS（N-乙基-N-(2-羟-3-磺丙)-3,5-二甲氧-4-氟苯胺）8mmo1/L-12mmo1/L尿酸酶1KU/L-2KU/L牛血清白蛋白1g/L-5g/L过氧化物酶5KU/L-10KU/L防腐剂0.2g/L-0.5g。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R1中缓冲液为25℃，pH为6.0的100mmol/L的哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R2中缓冲液为25℃，pH为8.5的10mmol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述防腐剂为2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮盐酸盐。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R1中离子平衡剂为氯化锂。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R1中重金属离子螯合剂为硫脲。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R1中表面活性剂1为十二烷基三甲基甜菜碱（北京阿匹斯）。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述试剂R1中表面活性2为曲拉通-305（SIGMA）。一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂，所述的一种抗干扰能力强的酶法试剂来检测尿酸的检测方法，使用全自动生化分析仪利用两点终点法进行测定，检测主波长为546nm。所述的检测方法，R1试剂和R2试剂的比例为4:1。本专利技术的有益效果：1）本专利技术试剂R1中优先选择了哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液作为缓冲液，试剂R2中选取三羟甲基氨基甲烷作为缓冲液，在保证基本的缓冲能力的情况下，且能够保证不干扰反应的进行。2）本专利技术优先选择了2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮盐酸盐作为防腐剂，能有效的放置试剂中的蛋白酶不会发生生菌腐败，且有效的避免了普通防腐剂对酶的活性产生抑制的弊端。3）试剂R1中添加了抗坏血酸氧化酶、亚硝酸盐、表面活性剂十二烷基三甲基甜菜碱和曲拉通-305，抗坏血酸氧化酶能有效的去除维生素C的干扰，亚硝酸盐对去除胆红素特别是黄疸样本效果非常的好，而表面活性剂十二烷基三甲基甜菜碱和曲拉通-305的同时加入，则较好的溶解新生儿样本中其他干扰成分的影响，从而将样本对主反应的干扰降低到最低。4）在试剂中加入了硫脲作为重金属离子螯合剂，从而有效的去除重金属离子对酶类的抑制作用。5）本方案优先选择了F-DAOS作为最后一步主反应的色原，发挥其色原自身的较强的抗干扰能力的效果。附图说明图1实施例1试剂检测方法；图2实施例2试剂检测方法；图3实施例3试剂检测方法；图4实施例1-3试剂抗干扰性能实验检测结果；图5实施例1-3试剂尿素检测结果与液相色谱法尿素检测结果对比；图6该专利技术试剂检测原理反应图解。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明：实施例1一种现有的酶法UA检测试剂及检测方法：试剂R1磷酸盐缓冲液100mmo1/L4-氨基安替比林1.2mmo1/L过氧化物酶2KU/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100mmo1/LDHBS8mmo1/L尿酸酶1000U/L。本实施例试剂的使用方法：本实施例描述的一种现有的酶法UA检测试剂，在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪，如日立7180全自动分析仪等，利用两点终点法进行测定。将R1和R2按照4:1的比例放置到对应的试剂位上，在样品盘的对应位置放置好蒸馏水、标准品和样本，操作如图1。实施例2一种新专利技术的抗干扰能力强的酶法UA检测试剂，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，试剂组分如下：试剂1（R1）：哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液20mmo1/L4-氨基安替比林1.2mmo1/L亚硝酸钠4mmol/L氯化锂5mmol/L抗坏血酸氧化酶3KU/L硫脲1mmol/L牛血清白蛋白1g/L十二烷基三甲基甜菜碱1ml/L曲拉通-3051ml/LMIT.HCL0.2g/L试剂2（R2）：三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmo1/LF-DAOS（N-乙基-N-(2-羟-3-磺丙)-3,5-二甲氧-4-氟苯胺）12.5mmo1/L尿酸酶1000U/L牛血清白蛋白1g/L过氧化物酶5KU/LMIT.HCL0.2g/L。本实施例试剂的使用方法：本实施例试剂在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪，如日立7180全自动分析仪等，利用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂检测试剂，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，组成为:试剂1（R1）：缓冲液                                              20mmo1/L4‑氨基安替比林                                      1.2mmo1/L亚硝酸钠                                            4mmol/L ‑ 8mmol/L离子平衡剂                                          5mmol/L‑10 mmol/L抗坏血酸氧化酶                                      3KU/L‑5 KU/L重金属离子螯合剂                                    1mmol/L‑2 mmol/L牛血清白蛋白                                        1g/L‑5 g/L十二烷基三甲基甜菜碱                                1ml/L‑ 3ml/L曲拉通‑305                                          1ml/L‑ 3ml/L防腐剂                                              0.2g/L‑0.5g/L试剂2（R2）：缓冲液                                              100mmo1/LF‑DAOS（N‑乙基‑N‑(2‑羟‑3‑磺丙)‑3,5‑二甲氧‑4‑氟苯胺）  8mmo1/L ‑ 12mmo1/L尿酸酶                                              1KU/L ‑ 2KU/L牛血清白蛋白                                        1g/L ‑5 g/L过氧化物酶                                          5KU/L‑10 KU/L防腐剂                                              0.2g/L ‑0.5 g/L。...

【技术特征摘要】
1.一种抗干扰能力强的酶法尿酸检测试剂检测试剂，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，组成为:试剂1（R1）：缓冲液20mmo1/L4-氨基安替比林1.2mmo1/L亚硝酸钠4mmol/L-8mmol/L离子平衡剂5mmol/L-10mmol/L抗坏血酸氧化酶3KU/L-5KU/L重金属离子螯合剂1mmol/L-2mmol/L牛血清白蛋白1g/L-5g/L十二烷基三甲基甜菜碱1ml/L-3ml/L曲拉通-3051ml/L-3ml/L防腐剂0.2g/L-0.5g/L试剂2（R2）：缓冲液100mmo1/LF-DAOS（N-乙基-N-(2-羟-3-磺丙)-3,5-二甲氧-4-氟苯胺）8mmo1/L-12mmo1/L尿酸酶1KU/L-2KU/L牛血清白蛋白1g/L-5g/L过氧化物酶5KU/L-10KU/L防腐剂0.2g/L-0.5g/L。2.根据权利要求1所述的一种抗干扰能力强的酶法尿...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗维晓，胡晓飞，王美丽，
申请(专利权)人：济南品鑫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37