一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法，属于中药生产过程质量监测领域。所述方法包括：(1)校正集样本的收集；(2)利用传统方法测定校正集样本中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量；(3)校正集样本紫外吸收光谱的测定；(4)建立校正模型；(5)验证校正模型；(6)计算待测麦冬醇提取液的6个质量指标物质含量。本发明专利技术操作简单，与传统的分析方法相比，缩短总的测定时间50倍以上。紫外特征光谱与6个不同质量指标物质的含量之间均存在较好的相关性，通过实时监测质量指标来保证提取工序的完成质量，进而保证最终产品质量。

A method for rapid determination of 6 quality index substances in Ophiopogon japonicus extract and its application

The invention discloses a method for rapidly detecting the content of 6 quality index substances in the extract of Ophiopogon japonicus extract, which belongs to the field of quality monitoring in the production process of Chinese medicine. The methods described include: (1) collection of correction set samples; (2) determination of the content of fructose, glucose, sucrose, sucrose, total saponins of Ophiopogon, methyl Ophiopogon methiopioflavone A and methyl Ophiopogon methyl two hydrogen high isoflavone in the correction set sample; (3) determination of the ultraviolet absorption spectrum of the correction set sample; (4) establishment of a correction model; (5) The calibration model was corrected. (6) the content of 6 quality indicators of the Ophiopogon alcohol extract was calculated. Compared with the traditional analytical method, the invention has the advantages of simple operation and shorter total determination time of more than 50 times. There is a good correlation between the UV characteristic spectrum and the content of 6 different quality indexes. The quality of the extraction process is guaranteed by real-time monitoring quality index to ensure the quality of the final product.

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法及应用
本专利技术涉及中药生产过程质量监测领域，具体涉及一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法及其在参麦注射液生产过程中同时测定麦冬醇提取单元中间体中6个质量指标中的应用。
技术介绍
参麦注射液是在中医古方“生脉散”基础上经改型研制的纯中药速效制剂，由红参和麦冬两味药材经醇提水沉工艺制得。在临床上，参麦注射液主要用于心力衰竭、心律不齐等心血管疾病的治疗，另外也常用作抗肿瘤药的辅助用药。随着参麦注射液的广泛应用，人们越来越关注其生产过程质量控制水平。麦冬中的皂苷类成分及高异黄酮类成分是其防治心血管疾病的重要物质基础，具有抗心肌缺血、降血糖、抗衰老、抑制肿瘤、免疫调节等生理活性。但麦冬中同时含有大量单糖、双糖及低聚糖，这些糖类的存在对参麦注射液的稳定性、安全性和质量控制带来了很大的风险，直接影响着注射液渗透压、固体量等参数。综上，提高这几类物质的质量控制水平对提高参麦注射液生产过程整体的质控水平有重要意义。在参麦注射剂的生产过程中，麦冬乙醇回流提取工艺单元能够提取出麦冬中的皂苷类、黄酮类及单糖、二糖等成分，醇提液成分复杂，其质量控制值得被重点关注和研究。实际生产过程中，中间体中麦冬皂苷类、黄酮类及糖类成分的测定方法各不相同。申请公开号为CN105004830A的专利文献公开了一种同时测定麦冬中5种皂苷成分的高效液相色谱方法，所述5种皂苷成分为Ophiopojaponin-C、去乙酰基Ophiopojaponin-A、3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-葡萄糖麦冬苷元、麦冬皂苷D和麦冬皂苷D’。申请公开号为CN105301130A的专利公开了一种检测麦冬中黄酮含量的高效液相色谱方法；申请公开号为CN102133333A的专利公开了一种参麦注射液质谱指纹图谱质量控制方法，采用液相色谱为分离手段，以质谱检测器为检测手段同时获取表征参麦注射液中红参和麦冬化合物信息的两种指纹图谱，采用相关系数法计算相似度，以相似度≥0.9的样品判断为质量稳定的产品。以上方法分析精度较高，但需要分析人员花费大量时间对其进行分析，方法分析操作复杂、仪器时间长、预处理麻烦、对仪器及分析人员要求高，不适用于过程的实时分析与监控。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能够同时、快速检测麦冬醇提取物中6个质量指标物质果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B含量的方法，并将其应用到参麦注射液生产过程麦冬乙醇回流提取单元中6个质量指标的实时监测和麦冬醇提过程的在线监控当中。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法，所述6个质量指标物质为果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B，其特征在于，该方法包括下述步骤：(1)收集校正集样本：选不同批次的麦冬，在麦冬乙醇回流提取过程的不同阶段收集的麦冬醇提取液作为校正集样本；(2)校正集样本6个质量指标物质参照值测定：a、采用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用法测定果糖、葡萄糖和蔗糖的含量；b、采用高氯酸显色法测定麦冬总皂苷的含量；c、采用高效液相色谱-紫外光检测法测定甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量；(3)校正集样本紫外吸收光谱的测定：采用光程10mm的石英比色皿，将校正集样品稀释液置于紫外可见光谱仪中进行全波长扫描，波长扫描范围为190～800nm，扫描精度为1nm，以水为空白溶液，每个样品作3次平行扫描，取平均光谱数据作为样品的紫外可见吸收光谱数据，获取校正集样本紫外可见吸收光谱数据；(4)建立校正模型：采用多变量数据分析法，建立校正集样本中6个质量指标物质含量与对应的紫外可见吸收光谱之间关系的数学模型，所述校正模型的相关系数≥0.9；(5)验证校正模型：对步骤(4)所建立的校正模型采用留一法交叉进行内部验证，验证的方法是取待测麦冬醇提取液，测定其紫外可见吸收光谱，将其输入各质量指标物质的校正模型中，计算中相应质量指标物质的含量，与该麦冬醇提取液按照步骤(2)方法测定的各质量指标物质含量比较，要求测量误差小于等于25％；(6)计算待测麦冬醇提取液的6个质量指标物质含量：取待测6个质量指标物质含量的冬麦提取液样品，按照与校正集样本相同的紫外光谱采集方法采集样本的紫外可见吸收光谱信息，将该光谱信息输入各质量指标物质的校正模型中，计算待测样本中相应质量指标物质的含量。本专利技术在步骤(4)中所述多变量数据分析法为主成分回归法或偏最小二乘法。本专利技术通过收集具有代表性的麦冬醇提取液作为校正集样本，以一定的采集方式扫描得到校正集样本的紫外可见吸收光谱图。以传统定量方法测定校正集样本中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量作为参照值，应用多变量数据分析技术中的PCR法和PLS法，建立麦冬醇提取液的紫外光谱与其质量指标之间关系的多元校正模型，将待测的麦冬提取液，按照同样的方法测定其紫外光谱，利用已构建的校正模型即可快速计算得到各质量指标值。与现有技术相比，本专利技术具备的有益效果：(1)本专利技术提供的紫外光谱快速测定参麦注射液生产过程麦冬醇提取单元中间体6个质量指标的方法，操作简单、快速，预处理简单。与传统的分析方法相比，缩短测定时间50倍以上，且不需要大量的有机溶剂，符合绿色制造的理念。(2)紫外可见吸收光谱与6个不同质量指标物质的含量之间均存在较好的相关性，可有效地解决麦冬醇提取液中各类成分的含量难以被快速测定的问题，通过实时监测质量指标来进行过程实时监控，保证提取工序的完成质量，进而保证最终产品质量，可在中药制剂生产中推广应用。附图说明图1为本专利技术的流程示意图。图2为麦冬醇提取液校正集样品的紫外光谱图。图3为麦冬醇提取液校正集样品经SG平滑及一阶求导预处理后的光谱图。图4为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的麦冬总皂苷含量PCR定量模型参照值与预测值之间的相关关系图。图5为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的甲基麦冬二氢高异黄酮A含量PCR定量模型的参照值与预测值之间的相关关系图。图6为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的甲基麦冬二氢高异黄酮B含量PCR定量模型的参照值与预测值之间的相关关系图。图7为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的果糖含量PCR定量模型的参照值与预测值之间的相关关系图。图8为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的葡萄糖含量PCR定量模型的参照值与预测值之间的相关关系图。图9为麦冬醇提取液验证集与校正集样本的蔗糖含量PCR定量模型的参照值与预测值之间的相关关系图。图10为麦冬醇提液校正集样品经SG平滑及二阶求导预处理后的光谱图。图11为麦冬醇提液麦冬总皂苷含量PLS定量模型校正集样本的参照值与预测值之间的相关关系图。图12为麦冬醇提液甲基麦冬二氢高异黄酮A含量PLS定量模型校正集样本的参照值与预测值之间的相关关系图。图13为麦冬醇提液甲基麦冬二氢高异黄酮B含量PLS定量模型校正集样本的参照值与预测值之间的相关关系图。图14为麦冬醇提液果糖含量PLS定量模型校正集样本的参照值与预测值之间的相关关系图。图15为麦冬醇提液葡萄糖含量PLS定量模型校正集样本的参照值本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法，所述6个质量指标物质为果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B，其特征在于，该方法包括下述步骤：(1)收集校正集样本：选不同批次的麦冬，在麦冬乙醇回流提取过程的不同阶段收集的麦冬醇提取液作为校正集样本；(2)校正集样本6个质量指标物质参照值测定：a、采用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用法测定果糖、葡萄糖和蔗糖的含量；b、采用高氯酸显色法测定麦冬总皂苷的含量；c、采用高效液相色谱‑紫外光检测法测定甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量；(3)校正集样本紫外吸收光谱的测定：采用光程10mm的石英比色皿，将校正集样品稀释液置于紫外可见光谱仪中进行全波长扫描，波长扫描范围为190～800nm，扫描精度为1nm，以水为空白溶液，每个样品作3次平行扫描，取平均光谱数据作为样品的紫外可见吸收光谱数据，获取校正集样本紫外可见吸收光谱数据；(4)建立校正模型：采用多变量数据分析法，建立校正集样本中6个质量指标物质含量与对应的紫外可见吸收光谱之间关系的数学模型，所述校正模型的相关系数≥0.9；(5)验证校正模型：对步骤(4)所建立的校正模型采用留一法交叉进行内部验证，验证的方法是取待测麦冬醇提取液，测定其紫外可见吸收光谱，将其输入各质量指标物质的校正模型中，计算中相应质量指标物质的含量，与该麦冬醇提取液按照步骤(2)方法测定的各质量指标物质含量比较，要求测量误差小于等于25％；(6)计算待测麦冬醇提取液的6个质量指标物质含量：取待测6个质量指标物质含量的冬麦提取液样品，按照与校正集样本相同的紫外光谱采集方法采集样本的紫外可见吸收光谱信息，将该光谱信息输入各质量指标物质的校正模型中，计算待测样本中相应质量指标物质的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测麦冬醇提取液中6个质量指标物质含量的方法，所述6个质量指标物质为果糖、葡萄糖、蔗糖、麦冬总皂苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B，其特征在于，该方法包括下述步骤：(1)收集校正集样本：选不同批次的麦冬，在麦冬乙醇回流提取过程的不同阶段收集的麦冬醇提取液作为校正集样本；(2)校正集样本6个质量指标物质参照值测定：a、采用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用法测定果糖、葡萄糖和蔗糖的含量；b、采用高氯酸显色法测定麦冬总皂苷的含量；c、采用高效液相色谱-紫外光检测法测定甲基麦冬二氢高异黄酮A及甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量；(3)校正集样本紫外吸收光谱的测定：采用光程10mm的石英比色皿，将校正集样品稀释液置于紫外可见光谱仪中进行全波长扫描，波长扫描范围为190～800nm，扫描精度为1nm，以水为空白溶液，每个样品作3次平行扫描，取平均光谱数据作为样品的紫外可见吸收光谱数据，获取校正集样本紫外可见吸收光谱数据；(4)建立校正模型：采用多变量数据分析法，建立校正集样本中6个质量指标物质含...

【专利技术属性】
技术研发人员：瞿海斌，袁玮，赵芳，张金华，李文龙，厉明，段锦云，
申请(专利权)人：大理药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53