一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法，色谱条件为采用直链淀粉类手性柱，以烷烃‑低级醇‑有机碱溶液为流动相，对卡巴拉汀及其光学异构体进行分离测定，本发明专利技术对卡巴拉汀中光学异构体检测上具有明显的优势，经方法学验证，其专属性强，灵敏度高，准确度好，可以有效用于控制卡巴拉汀贴剂及原料中光学异构体的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法专利
本专利技术涉及药物分析化学领域，具体涉及一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法。
技术介绍
卡巴拉汀(Rivastigmine)又名利凡斯的明，是由瑞士诺华公司首次研制成功的一种氨基甲酸类脑选择胆碱酯酶抑制剂，它通过抑制乙酰和丁酰胆碱酯酶，延缓胆碱能神经元对释放的乙酰胆碱的降解来促进胆碱能神经传导，改善胆碱能介导的认知功能障碍，治疗轻、中度阿尔茨海默型痴呆的症状。卡巴拉汀属第二代中枢AChE抑制药，美国FDA于2013年6月27日批准扩大Exelon贴片(Rivastigminetransdermalsystem，卡巴拉汀透皮系统，国内有重酒石酸卡巴拉汀胶囊，即艾斯能)适应症，包括以13.3mg/24h这种Exelon贴片治疗重度阿尔茨海默病(AD)。Exelon贴片是获准的首个和唯一的治疗轻、中和重度AD患者的透皮贴片。卡巴拉汀的化学结构式如下：卡巴拉汀母核中含有1个手性碳原子，主要是由工艺引入，在终产品中可能会残留R型光学异构体杂质，为了保证药物的安全性及有效性，需采用适合的手性柱分离其光学异构体，并对其质量进行严格地控制。中国专利申请20140699941.9中公开了一种高效液相色谱法检测胶囊剂中重酒石酸卡巴拉汀光学异构体的方法，描述了采用α1-酸性糖蛋白键合硅胶(Chiral-AGP)手性色谱柱，在反相色谱条件下，以磷酸缓冲盐和乙腈作为流动相，检测原料及胶囊剂中的光学异构体。该专利的创新点在于采用反相体系可提高胶囊内容物中主药的提取率，从而便于异构体的准确检测，然而卡巴拉汀贴剂中的主药为重酒石酸卡巴拉汀的游离碱，亲水性较成盐药物差别较大；其次，贴剂中常用的辅料为硅酮或丙烯酸酯聚合物之类的压敏胶，还有一定量的有机溶剂和抗氧化剂等，这些成分相比胶囊剂中的水溶性辅料，是不易在反相体系中溶解的，若要提取贴剂中的主药或杂质，通常需先经过有机溶剂萃取，氮气流吹干，最后再用反相流动相复溶等步骤，操作上非常繁琐。所以，该专利的色谱条件虽也可用于卡巴拉汀贴剂中光学异构体的检测，但反相体系的流动相是不适合作为直接提取溶剂的。因此，针对如何更有效简便的从贴剂中提取卡巴拉汀及其光学异构体的问题，直接采用正相体系分离，正相溶剂作为提取溶剂是比较合理的。我们按照正相色谱法，采用现有技术中的手性色谱柱ChiralPakOD-H，及流动相正己烷-异丙醇-三氟乙酸-二乙胺等常规参数，考察了卡巴拉汀与其光学异构体的分离情况，但结果表明，虽然其分离度较高，峰型却很宽，灵敏度较低，不能满足当前美国药典(USP36-NF31)和欧洲药典(EP8.0)标准中的限度要求。因此，目前亟待需要开发一个快速、准确、灵敏地检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的有效方法，同时该方法也可用于检测卡巴拉汀原料中的光学异构体。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法，该方法也可用于检测卡巴拉汀原料中的光学异构体。通过本专利技术的方法可以实现异构体的有效分离，其专属性强，灵敏度高，准确度好。从而确保了卡巴拉汀原料及卡巴拉汀贴剂中光学异构体的质量可控。为了达到上述目的，本专利技术采用高效液相色谱法(HPLC)，其通过如下技术方案实现：一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法，其特征在于该方法色谱条件为采用直链淀粉类手性柱，以烷烃-低级醇-有机碱溶液为流动相，所述有机碱为乙二胺、二乙胺、三乙胺中的一种，对卡巴拉汀及其光学异构体进行分离测定。根据本专利技术的实施方式之一，所述直链淀粉类手性柱可以为ChiralPakAY-H或ChiralPakAY-3，进一步可优选为ChiralPakAY-3；根据本专利技术的实施方式之一，所述流动相烷烃-低级醇溶液中的有机碱，可进一步优选为二乙胺；根据本专利技术的实施方式之一，所述有机碱占流动相溶液的浓度可以为0.05-0.15％；根据本专利技术的实施方式之一，所述流动相烷烃-低级醇溶液的体积比可以为95:5到85:15，；根据本专利技术的实施方式之一，所述流动相中烷烃可以为正庚烷或正己烷；根据本专利技术的实施方式之一，所述流动相中低级醇可以为异丙醇或无水乙醇；根据本专利技术的实施方式之一，所述流动相流速可以为0.5-0.7ml/min；根据本专利技术的实施方式之一，所述色谱条件中检测波长可以为200-220nm；根据本专利技术的实施方式之一，所述色谱条件可以进一步为：流动相为正己烷—无水乙醇——二乙胺，其中正己烷与无水乙醇的体积比为90:10，二乙胺占流动相溶液的浓度为0.1％，所述色谱条件为检测波长210nm，流动相流速为0.6mL/min。本专利技术检测卡巴拉汀原料及其贴剂中光学异构体的方法，包括如下步骤：步骤一：溶液配制系统适用性溶液：分别取卡巴拉汀及其光学异构体对照品适量，精密称定，加无水乙醇适量，振摇使其溶解，并稀释定容制成每1mL中约含0.1mg的溶液，摇匀，即得。原料供试品溶液：精密称取卡巴拉汀20mg置10ml量瓶中，加无水乙醇适量，振摇使其溶解，并稀释定容制成每1mL中约含2mg的溶液，摇匀，即得。贴剂供试品溶液：取本品2贴，除去防黏层，将黏贴面向内卷曲后，剪碎，置量瓶中，加入无水乙醇适量，超声30min使胶层溶解，放冷至室温，再用无水乙醇稀释定容制成每1mL中约含2mg的溶液。取上述溶液适量于干净的EP管中，室温12000rpm离心3min，取上清液过0.22μm滤膜，取续滤液，即得。本专利技术提供的技术方案中，显示出了检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的明显优势，专利技术人将上述实验得出的色谱条件进行了方法学验证，具体内容如下：1)专属性及系统适用性精密量取系统适用性溶液10μL，注入液相色谱仪，结果如表1所示，出峰顺序依次为卡巴拉汀和光学异构体，二者分离度大于2.0，理论板数与拖尾因子均较好。表1专属性及系统适用性结果2)灵敏度取光学异构体对照品溶液，逐步稀释，以信噪比(S/N)3:1为检测限，信噪比(S/N)10:1为定量限。检测限为10.24ng(相当于供试品溶液浓度的0.05％)，定量限为20.48ng(相当于供试品溶液浓度的0.1％)。药典标准中均规定异构体限度为0.3％，因此，该方法的灵敏度满足要求。3)线性以光学异构体的浓度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，线性结果如下：在2.05～51.2μg/mL范围内，光学异构体的浓度与其峰面积呈良好的线性关系，线性方程为Y＝16073x-4771.3，相关系数为0.9999，表明线性关系良好。4)精密度精密量取系统适用性溶液10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，连续进样6次，结果如表2所示，卡巴拉汀与光学异构体峰面积的RSD均小于1.0％，精密度较好。表2进样精密度结果5)准确度分别向原料及贴剂中加入光学异构体杂质溶液，使其加样浓度分别达到定量限及限度浓度，考察光学异构体在原料及贴剂中的准确度。结果表明，定量限浓度下，异构体杂质在原料及贴剂中的加样回收率分别为106.3％和86.0％，均在80％～120％范围内；限度浓度下，异构体杂质在原料及贴剂中的加样回收率分别为101.9％和95.1％，均在95％～105％范围内，由此证明该方法的准确度良好。6)溶液稳定性分别精密量取原料及贴剂供试品溶液，于0、3、6小时进样，观察异构体含量的变化，结本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法，其特征在于该方法色谱条件为采用直链淀粉类手性柱，以烷烃‑低级醇‑有机碱溶液为流动相，所述有机碱为乙二胺、二乙胺、三乙胺中的一种，对卡巴拉汀及其光学异构体进行分离测定。

【技术特征摘要】
1.一种检测卡巴拉汀贴剂中光学异构体的方法，其特征在于该方法色谱条件为采用直链淀粉类手性柱，以烷烃-低级醇-有机碱溶液为流动相，所述有机碱为乙二胺、二乙胺、三乙胺中的一种，对卡巴拉汀及其光学异构体进行分离测定。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于该方法中所述直链淀粉类手性柱为ChiralPakAY-H或ChiralPakAY-3。3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于该方法中所述直链淀粉类手性柱优选ChiralPakAY-3。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述有机碱优选为二乙胺。5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述有机碱占流动相溶液的浓度为0.05-0.15％。6.如权利要求1所述的检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：王羽，李敏，
申请(专利权)人：亚宝药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山西,14