抗假单胞菌Psl结合分子及其用途制造技术

本披露涉及一种抗假单胞菌Psl结合分子及其用途，特别是在预防和治疗假单胞菌感染中的用途。此外，本披露提供了用于预防和治疗假单胞菌感染的组合物和方法。

Anti Pseudomonas Psl binding molecule and its use

The disclosure relates to an anti Pseudomonas Psl binding molecule and its use, especially in the prevention and treatment of Pseudomonas infection. In addition, the disclosure provides compositions and methods for the prevention and treatment of Pseudomonas infection.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗假单胞菌Psl结合分子及其用途背景披露领域本披露涉及抗假单胞菌Psl结合分子和其用途，具体地说在预防和治疗假单胞菌感染中的用途。此外，本披露提供了用于预防和治疗假单胞菌感染的组合物和方法。披露背景铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）（铜绿假单胞菌（P.aeruginosa））是导致受损个体的急性和慢性感染的革兰氏阴性机会病原体（马（Ma）等人，《细菌学杂志》（JournalofBacteriology）189(22):8353-8356(2007)）。这部分是由于细菌对于临床使用的抗生素的高先天抗性，并且部分是由于高度抗生素抗性生物膜的形成（德伦柯克（Drenkard）E，《微生物与感染》（MicrobesInfect）5:1213-1219(2003)；汉柯克（Hancokc）&斯伯特（Speert），《耐药性新资讯》（DrugResistUpdate）3:247-255(2000)）。铜绿假单胞菌是西方世界中的医院获得性感染的常见病因。它是烧伤受害者和免疫受损个体的菌血症的常见治病因子（莱克扎克（Lyczak）等人，《微生物与感染》2:1051-1060(2000)）。它还是医院性革兰氏阴性肺炎的最常见病因（克莱汶（Craven）等人，《呼吸道感染研讨会》（SeminRespirInfect）11:32-53(1996)），尤其是在机械通气患者中，并且是患有囊性纤维化的个体的肺中的最普遍病原体（皮埃尔（Pier）等人，《美国微生物学新闻杂志》（ASMNews）6:339-347(1998)）。严重铜绿假单胞菌感染可变成全身性的，从而导致败血症。败血症的特征是严重全身性炎症，经常导致多器官功能衰竭和死亡。假单胞菌Psl外泌多糖据报告可锚定于铜绿假单胞菌的表面、并且被认为在促进定殖于宿主组织和建立/维持生物膜形成方面是重要的（杰克逊（Jackson）·K·D等人，《细菌学杂志》186，4466-4475(2004)）。它的结构包括富含甘露糖的重复五糖（伯德（Byrd）·M·S等人，《分子微生物学杂志》（MolMicrobiol）73，622-638(2009)）。由于多药耐药性不断增加，在本领域中仍然需要开发用于鉴别新的假单胞菌特异性预防和治疗剂的新颖策略。概述一个实施例是针对一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl的一种抗体或其抗原结合片段，其中该结合分子(a)可以抑制铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上、(b)可以促进铜绿假单胞菌的OPK，或(c)可以抑制铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上并且可以促进铜绿假单胞菌的OPK。还披露了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至与包含WapR-004、Cam-003、Cam-004或Cam-005的重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）的一种抗体或其抗原结合片段所结合的相同的假单胞菌Psl表位的一种抗体或其抗原结合片段。还披露了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl，并且竞争性抑制包含WapR-004、Cam-003、Cam-004或Cam-005的VH和VL的一种抗体或其抗原结合片段与假单胞菌Psl结合的一种抗体或其抗原结合片段。包括在本披露内的一些实施例包括结合分子，例如如上所述的一种抗体或其抗原结合片段，其中WapR-004的VH和VL对应地包含SEQIDNO:11和SEQIDNO:12，Cam-003的VH和VL对应地包含SEQIDNO:1和SEQIDNO:2，Cam-004的VH和VL对应地包含SEQIDNO:3和SEQIDNO:2，并且Cam-005的VH和VL对应地包含SEQIDNO:4和SEQIDNO:2。还披露了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至与包含WapR-001、WapR-002或WapR-003的VH和VL区的一种抗体或其抗原结合片段所结合的相同的假单胞菌Psl表位的一种抗体或其抗原结合片段。进一步披露了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl，并且竞争性抑制包含WapR-001、WapR-002或WapR-003的VH和VL的一种抗体或其抗原结合片段与假单胞菌Psl结合的一种抗体或其抗原结合片段。一些实施例包括结合分子，例如如上所述的一种抗体或其抗原结合片段，其中WapR-001的VH和VL对应地包含SEQIDNO:5和SEQIDNO:6，WapR-002的VH和VL对应地包含SEQIDNO:7和SEQIDNO:8，并且WapR-003的VH和VL对应地包含SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。进一步提供了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至与包含WapR-016的VH和VL区的一种抗体或其抗原结合片段所结合的相同的假单胞菌Psl表位的一种抗体或其抗原结合片段。还提供了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl，并且竞争性抑制包含WapR-016的VH和VL的一种抗体或其抗原结合片段与假单胞菌Psl结合的一种抗体或其抗原结合片段。一些实施例包括结合分子，例如如上所述的一种抗体或其片段，其中WapR-016的VH和VL对应地包含SEQIDNO:15和SEQIDNO:16。还提供了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl的、包含一种抗体VH的一种抗体或其抗原结合片段，其中VH包含与SEQIDNO:1、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7、SEQIDNO:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:13或SEQIDNO:15至少90%一致或与其一致的氨基酸序列。一些实施例包括一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl的、包含一种抗体VL的一种抗体或其抗原结合片段，其中VL包含与SEQIDNO:2、SEQIDNO:4、SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14和SEQIDNO:16至少90%一致或与其一致的氨基酸序列。还提供了一种特异性结合至假单胞菌psl的分离的抗体或其抗原结合片段，该抗体或其抗原结合片段所包含的VH和VL氨基酸序列与以下各项至少90%一致或与其一致：(a)对应地为SEQIDNO:1和SEQIDNO:2、(b)对应地为SEQIDNO:3和SEQIDNO:2、(c)对应地为SEQIDNO:4和SEQIDNO:2、(d)对应地为SEQIDNO:5和SEQIDNO:6、(e)对应地为SEQIDNO:7和SEQIDNO:8、(f)对应地为SEQIDNO:9和SEQIDNO:10、(g)对应地为SEQIDNO:11和SEQIDNO:12、(h)对应地为SEQIDNO:13和SEQIDNO:14、或(i)对应地为SEQIDNO:15和SEQIDNO:16。在一个特定实施例中，上述抗体或其抗原结合片段包含具有氨基酸序列SEQIDNO:1的VH和具有氨基酸序列SEQIDNO:2的VL。在其他实施例中，上述抗体或其抗原结合片段包含具有氨基酸序列SEQIDNO:11的VH和具有氨基酸序列SEQIDNO:12的VL。还披露了一种分离的结合分子，例如，特异性结合至假单胞菌Psl的、包含一种抗体VH的一种抗体或其抗原结合片段，其中VH本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，特异性结合至假单胞菌Psl，其包含的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)具有选自下组的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列：SEQ ID NO:17、18、19、20、21和22(Cam‑003)，SEQ ID NO:23、24、25、20、21和22(Cam‑004)，SEQ ID NO:26、27、28、20、21和22(Cam‑005)，SEQ ID NO:29、30、31、32、33和34(WapR‑001)，SEQ ID NO:35、36、37、38、39和40(WapR‑002)，SEQ ID NO:41、42、43、44、45和46(WapR‑003)，SEQ ID NO:47、48、49、50、51和52(WapR‑004)，SEQ ID NO:47、48、75、50、51和52(WapR‑004RAD)，以及SEQ ID NO:59、60、61、62、63和64(WapR‑016)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.10 US 61/495,460;2011.09.02 US 61/530,461;1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，特异性结合至假单胞菌Psl，其包含的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)具有选自下组的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列：SEQIDNO:17、18、19、20、21和22(Cam-003)，SEQIDNO:23、24、25、20、21和22(Cam-004)，SEQIDNO:26、27、28、20、21和22(Cam-005)，SEQIDNO:29、30、31、32、33和34(WapR-001)，SEQIDNO:35、36、37、38、39和40(WapR-002)，SEQIDNO:41、42、43、44、45和46(WapR-003)，SEQIDNO:47、48、49、50、51和52(WapR-004)，SEQIDNO:47、48、75、50、51和52(WapR-004RAD)，以及SEQIDNO:59、60、61、62、63和64(WapR-016)。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中WapR-004的VH和VL对应地是SEQIDNO:11和SEQIDNO:12；Cam-003的VH和VL对应地是SEQIDNO:1和SEQIDNO:2；Cam-004的VH和VL对应地是SEQIDNO:3和SEQIDNO:2；Cam-005的VH和VL对应地是SEQIDNO:4和SEQIDNO:2；以及WapR-004RAD的VH和VL对应地是SEQIDNO:74和SEQIDNO:12。3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中WapR-001的VH和VL对应地是SEQIDNO:5和SEQIDNO:6；WapR-002的VH和VL对应地是SEQIDNO:7和SEQIDNO:8；以及WapR-003的VH和VL对应地是SEQIDNO:9和SEQIDNO:10。4.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中WapR-016的VH和VL对应地是SEQIDNO:15和SEQIDNO:16。5.一种分离的抗体或其抗原结合片段，特异性结合至假单胞菌Psl，并且包含如以下各项所示的重链可变区VH和轻链可变区VL氨基酸序列：(a)对应地为SEQIDNO:1和SEQIDNO:2，(b)对应地为SEQIDNO:3和SEQIDNO:2，(c)对应地为SEQIDNO:4和SEQIDNO:2，(d)对应地为SEQIDNO:5和SEQIDNO:6，(e)对应地为SEQIDNO:7和SEQIDNO:8，(f)对应地为SEQIDNO:9和SEQIDNO:10，(g)对应地为SEQIDNO:11和SEQIDNO:12，(h)对应地为SEQIDNO:13和SEQIDNO:14；或(i)对应地为SEQIDNO:15和SEQIDNO:16。6.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，(a)可以抑制铜绿假单胞菌附着至上皮细胞，(b)可以促进铜绿假单胞菌的OPK，或(c)可以抑制铜绿假单胞菌附着至上皮细胞并且可以促进铜绿假单胞菌的OPK。7.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中对铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上的最大抑制是在50μg/ml或更小的抗体浓度下实现。8.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中对铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上的最大抑制是在5.0μg/ml或更小的抗体浓度下实现。9.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中对铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上的最大抑制是在0.5μg/ml或更小的抗体浓度下实现。10.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中对铜绿假单胞菌附着至上皮细胞上的最大抑制是在从30μg/ml至0.3μg/ml范围内的抗体浓度下实现。11.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中OPKEC50小于0.5μg/ml。12.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中OPKEC50小于0.05μg/ml。13.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中OPKEC50小于0.005μg/ml。14.如权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中该OPKEC50在从0.001μg/ml至0.5μg/ml范围内。15.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-2M。16.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-2M。17.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-3M。18.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-3M。19.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-4M。20.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-4M。21.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-5M。22.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-5M。23.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-6M。24.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-6M。25.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-7M。26.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-7M。27.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-8M。28.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-8M。29.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-9M。30.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-9M。31.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-10M。32.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-10M。33.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-11M。34.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-11M。35.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-12M。36.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于10-12M。37.如权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，以一定的亲和力来特异性结合至铜绿假单胞菌Psl，该亲和力的特征在于解离常数(KD)不大于5×10-13M。38.如权利要求1-5中任一项所述的抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·迪吉安多门尼克，P·G·沃伦纳，C·K·斯托弗，B·塞尔曼，S·吉拉德，R·敏特尔，S·拉斯特，M·托米奇，
申请(专利权)人：米迪缪尼有限公司，米迪缪尼有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US