The invention discloses a new method for detecting the content of phospholipid components in pig lung phospholipid raw material. The purpose is to improve the separation degree, accuracy of the results, reproducibility of the method and reduce the loss of the chromatographic column by using a simple mobile phase. A new method was developed as follows: porcine pulmonary phospholipid sample solution was separated by positive phase silica gel column, and the 8 main components of phosphatidylcholine were separated. Even the most difficult separation of phosphatidyl glycerol and phosphatidyl ethanolamine also obtained good separation degree, the method reproducibility was high, and then detected by the vaporize light scattering detector. The content of each phospholipid component was determined by the logarithmic external standard curve method. The invention has the advantages of good separation degree, high accuracy, good reproducibility and simple operation.
【技术实现步骤摘要】
一种猪肺磷脂原料药中磷脂组分含量检测的新方法一、
:本专利技术涉及一种猪肺磷脂原料药中磷脂组分含量检测的方法,属于医药分析
二、
技术介绍
:猪肺磷脂是一种天然提取的肺表面活性物质,主要作用是降低肺泡气-液界面表面张力,保持肺泡稳定,防止肺不张。在伴有呼吸障碍的早产儿,猪肺磷脂有使肺泡扩张和稳定的作用,可改善肺的顺应性和气体交换,从而治疗新生儿呼吸窘迫症。猪肺磷脂中各磷脂占干重的90%以上,大部分为磷脂酰胆碱(PC),具有表面活性的PC为二棕榈酸磷脂酰胆碱;其余的磷脂还包括磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PSE)、心磷酯(CAR)和鞘磷脂(SM),起到辅助的治疗作用;溶血磷脂酰胆碱(LPC)是磷脂酰胆碱的降解产物,浓度过高会溶解红细胞膜,因此也要加以检控。因此测定猪肺磷脂中各磷脂组分的含量是非常有必要的。现有的磷脂含量的测定主要是磷含量法和硫氰亚铁铵比色法,前者测定磷含量,通过折算磷脂的平均分子量估算磷脂含量,后者通过紫外比色法测定,这两种方法准确度差,操作繁琐,易受干扰,而且只能得到磷脂总含量值。《中国药典》卵磷脂和大豆磷脂项下采用了高效液相色谱法,但是不能基线分离磷脂酰甘油和磷脂酰乙醇胺,分离度只有0.8,而且两相流动相中均含有水,对正相色谱柱损耗很大。国外也有采用高效液相色谱法测定的案例,但采用三相流动相体系,复杂繁琐,重现性低。本方法采用高效液相色谱法,样品溶液通过正相硅胶柱分离,再采用蒸发光散射检测器进行检测,对数标准曲线法计算含量,有效地测定了各磷脂组分含量,本法可使磷脂酰甘油和磷脂酰乙醇胺的 ...
【技术保护点】
1.一种测定猪肺磷脂原料药中磷脂组分含量的检测方法,本专利技术的测定方法如下步骤所示:(1)供试品溶液的制备取磷脂原料药约20mg,精密称定,置50ml量瓶中,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解并稀释至刻度,摇匀,6000rpm离心5分钟,取上清液作为供试品溶液1(用于磷脂酰胆碱的检测);另取本品约50mg,精密称定,置10ml量瓶中,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解并稀释至刻度,摇匀,6000rpm离心5分钟,取上清液作为供试品溶液2;(2)对照品溶液的制备取磷脂酰胆碱(PC)对照品约60mg,精密称定,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液1;取磷脂酰甘油(PG)对照品约10mg,精密称定,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液2;取磷脂酰乙醇胺(PE)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液3;取磷脂酰肌醇(PI)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷‑甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液4;取磷脂酰丝氨酸(PSE)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷‑甲醇 ...
【技术特征摘要】
1.一种测定猪肺磷脂原料药中磷脂组分含量的检测方法,本发明的测定方法如下步骤所示:(1)供试品溶液的制备取磷脂原料药约20mg,精密称定,置50ml量瓶中,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解并稀释至刻度,摇匀,6000rpm离心5分钟,取上清液作为供试品溶液1(用于磷脂酰胆碱的检测);另取本品约50mg,精密称定,置10ml量瓶中,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解并稀释至刻度,摇匀,6000rpm离心5分钟,取上清液作为供试品溶液2;(2)对照品溶液的制备取磷脂酰胆碱(PC)对照品约60mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液1;取磷脂酰甘油(PG)对照品约10mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液2;取磷脂酰乙醇胺(PE)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液3;取磷脂酰肌醇(PI)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液4;取磷脂酰丝氨酸(PSE)对照品约20mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液5;取心磷脂(CAR)对照品约10mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液6;取鞘磷脂(SM)对照品约40mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液7;取溶血磷脂酰胆碱(LPC)对照品约10mg,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解定容至10ml,摇匀,作为对照品母液8;分别取对照品母液1:0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml;对照品母液2:0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml;对照品母液3:0.1、0.2、0.4、0.6、1.0ml;对照品母液4:0...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘世岩,王锋,曹红光,贾欣欣,郑双双,吕慧忠,仰振球,
申请(专利权)人:烟台东诚药业集团股份有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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