一组具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一组具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物及其应用。所述的中药提取物制备方法为：取中药材粉末，加入甲醇，密闭条件下超声提取，超声结束后，用甲醇补足减失的重量，离心取上清液，氮吹干，得浸膏，即为所述的中药提取物；所述的中药为柴胡、川芎、当归、苦参、茵陈蒿、白术、大青叶、女贞子、五味子、栀子、掌叶大黄、虫草菌丝、升麻、松花粉、虎杖或垂盆草。经本发明专利技术建立的液相色谱串联质谱法测定，所述的中药提取物对于腺苷脱氨酶具有较强的抑制作用，细胞实验和动物实验进一步证实其对于白血病等具有显著的治疗效果。

A group of Chinese medicine extracts with adenosine deaminase inhibitory activity and its application

The invention relates to a set of Chinese medicinal extract with adenosine deaminase inhibitory activity and its application. The preparation method of the traditional Chinese medicine extract is: Taking the powder of Chinese herbal medicine, adding methanol, ultrasonic extraction under the condition of sealing, using methanol to fill the lost weight with methanol, centrifuging the supernatant, drying the nitrogen, and extracting the extract, that is, the extract of the Chinese medicine. Artemisia Atractylodes, Atractylodes macrocephala, Folium Isatidis, Ligustrum lucidum, Schisandra chinensis, Gardenia jasminoides Ellis, Rheum palmatum, Cordyceps sinensis, Rhizoma cismatis, pine pollen, Polygonum cuspidatum or Sophia root. The liquid chromatography tandem mass spectrometry (GC MS) established by the invention has strong inhibitory effect on adenosine deaminase. Cell experiments and animal experiments further confirm that the extract has significant therapeutic effect on leukemia and so on.

【技术实现步骤摘要】
一组具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物及其应用
本专利技术涉及中药领域，具体地说，涉及一组具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物及其应用。
技术介绍
腺苷脱氨酶(Adenosinedeaminase；Adenosineaminohydrolase；ADA；EC3.5.4.4)是一种与机体细胞免疫活性具有重要关系的巯基酶，每分子至少含2个活性巯基。它也是嘌呤核苷酸代谢的关键酶，能特异性催化腺嘌呤核苷或脱氧腺嘌呤核苷脱氨生成次黄嘌呤核苷或次黄嘌呤脱氧核苷，而后经核苷磷酸化酶催化生成次黄嘌呤，最终氧化成尿酸排出体外。ADA广泛分布于人体的多组织中，尤其在肠系膜、肝、脾、肾及淋巴细胞中水平较高，以盲肠、脾中含量最多，又以淋巴细胞活性最高，在纤维细胞、羊水细胞、肝、肾、肺、骨骼肌中也有发现。血液中ADA主要存在于红、白细胞(淋巴细胞、粒细胞)中，其含量为血清中的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。血清中的ADA主要来源于肝脏，90％以上的ADA存在于肝细胞浆水溶性部分，其余位于核内，与核酸代谢有关。正常水平的ADA对机体胞内和胞外的核苷代谢起了很重要的作用。ADA活性的改变常引起病理学上的改变。在许多疾病中发现了ADA活性的升高，如白血病[1]、伤寒[2]、系统性红斑狼疮[3]、糖尿病[4]、肝病[5]、肿瘤等。特别是在许多癌症患者中，ADA的活性显著升高，如直肠癌[6]、乳腺癌[7]、肾脏腺癌[8]等。多年前已经有人认为ADA抑制剂有助于治疗病毒引起的传染和一些类型的淋巴增殖紊乱。另外，ADA抑制剂可以调节B-或T-细胞中恶性肿瘤的免疫反应，还可以通过防止脱氨及伴随的钝化作用，来增强抗白血病和抗病毒的核苷(ara-A和3′-脱氧腺苷)的影响。近来，对腺苷A受体拮抗剂的研究表明，内源性细胞外的腺苷对过多的刺激性氨基酸引起的刺激和侵占具有一定的保护作用。因此，有人提出通过特定的方式来提高内源性细胞外腺苷的水平，也就是说，通过使用ADA和腺苷激酶的抑制剂来减少腺苷的衰弱。这一途径最大的优点是内源性细胞外腺苷水平的提高受那些产生这类细胞最多的(如缺氧或缺血的组织)或受到过多刺激的位点的根本制约。有几个课题组已经研究了ADA和腺苷激酶对中枢神经系统中腺苷释放的影响。这些研究的结果表明，与刺激性氨基酸受体刺激相适应的内源性细胞外腺苷的形成水平在药理学上的提高，对于治疗兴奋毒性紊乱和神经退化具有重大的医学潜力。腺苷的控制对一些心肌缺血的疾病具有保护作用，而且在心肌组织中的内源性腺苷也有保护作用。最近有报道说，腺苷脱氨酶可以通过内源性心肌腺苷的提高和ATP的保存，来减弱心肌缺血的伤害，并提高心肌收缩功能和新陈代谢功能的恢复。此外，人们还发现对ADA的抑制作用可以对老年人高血压提供有利的影响，因此，细胞外ADA抑制剂的使用可以对患有高血压病人的心脏具有保护作用。专利文献CN102058649A，公开日2011.05.18，公开了一种金鸡菊氯仿和乙酸乙酯萃取物在制备治疗高血压和高脂血症药物或保健食品中的应用，其制备方法为：金鸡菊粉经氯仿和乙酸乙酯萃取油溶性溶剂萃取，挥干有机溶剂后即得。专利文献CN102716203A，公开日2012.10.10，公开了一种治疗高血压的粗壮唐松草提取物及其用途，所述提取物通过将粗壮唐松草进行超声提取和阳离子交换树脂解析步骤获得，其中超声提取的溶剂为乙醇，超声频率为25-35kHz，阳离子换树脂柱的解析用氢氧化钠水溶液，解析液用盐酸解析。该粗壮唐松草提取物降压效果明显，副作用小。专利文献CN103610734A，公开日2014.03.05，公开了白花油麻藤提取物在制备治疗白血病药物中的应用，所述白花油麻藤提取物是按如下方法制备的：以白花油麻藤为原料，采用超临界二氧化碳萃取技术，大孔吸附树脂纯化技术分别得到白花油麻藤提取物A、白花油麻藤提取物B、白花油麻藤提取物C，按一定比例混合，即为白花油麻藤提取物。专利文献CN104147069A，公开日2014.11.19，公开了一种抗乳腺癌的青龙藤提取物及其制备方法和应用，所述的青龙藤提取物为青龙藤叶的乙醇提取物，制备方法为：将青龙藤叶粉碎后加无水乙醇回流提取1-3次，每次2-4h，提取温度40-45℃，所得提取液在45℃以下减压浓缩并回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，得青龙藤提取物。然而目前未见中药提取物对腺苷脱氨酶抑制活性方面的报道，进一步开发中药材的新医药用途是十分必要的。参考文献：[1]余莲,张兆嶙.白血病患者血清腺苷脱氨酶测定及临床意义[J].白血病,1999,8(5):292-293.[2]施前锋,徐辉.血清腺苷脱氨酶在伤寒诊断中的意义[J].江西医学检验,2001,19(1):57.[3]NaliniG,HariprasadC,ChandrasekaranAN,etal.Acomparativestudyofserumdeaminasesinsystemicrheumaticdiseases[J].Rheumatology,1993,32(12):1118-1119.[4]管茶英,周美霞,陈光.糖尿病患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义[J].临床检验杂志,2006,24(5):331.[5]张军,常丽.肝病患者血清腺苷脱氨酶的检测分析[J].航空航天医药,2006,17(2):76.[6]A,CanbolatO,DemirciS,etal.Activitiesofadenosinedeaminaseand5′-nucleotidaseincancerousandnoncanceroushumancolorectaltissues[J].MedicalOncology,2000,17(4):319-324.[7]AghaeiM,Karami-TehraniF,SalamiS,etal.Adenosinedeaminaseactivityintheserumandmalignanttumorsofbreastcancer:theassessmentofisoenzymeADA1andADA2activities[J].Clinicalbiochemistry,2005,38(10):887-891.[8]SufrinG,TritschGL,MittelmanA,etal.Adenosinedeaminaseactivityinpatientswithrenaladenocarcinoma[J].Cancer,1977,40(2):796-802.
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一组具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物及其应用。第一方面，本专利技术提供了一种具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物，所述的中药提取物其制备方法为：取中药材粉末，加入甲醇，密闭条件下超声提取，超声结束后，用甲醇补足减失的重量，离心取上清液，氮吹干，得浸膏，即为所述的中药提取物；所述的中药为柴胡、川芎、当归、苦参、茵陈蒿、白术、大青叶、女贞子、五味子、栀子、掌叶大黄、虫草菌丝、升麻、松花粉、虎杖或垂盆草。优选地，所述的制备方法具体为：取过40-70目筛的中药材粉末，精密称定，加入甲醇，料液比为0.032-0.05g/ml；密闭条件下超声处理，功率240-2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物，其特征在于，所述的中药提取物其制备方法为：取中药材粉末，加入甲醇，密闭条件下超声提取，超声结束后，用甲醇补足减失的重量，离心取上清液，氮吹干，得浸膏，即为所述的中药提取物；所述的中药为柴胡、川芎、当归、苦参、茵陈蒿、白术、大青叶、女贞子、五味子、栀子、掌叶大黄、虫草菌丝、升麻、松花粉、虎杖或垂盆草。

【技术特征摘要】
1.一种具有腺苷脱氨酶抑制活性的中药提取物，其特征在于，所述的中药提取物其制备方法为：取中药材粉末，加入甲醇，密闭条件下超声提取，超声结束后，用甲醇补足减失的重量，离心取上清液，氮吹干，得浸膏，即为所述的中药提取物；所述的中药为柴胡、川芎、当归、苦参、茵陈蒿、白术、大青叶、女贞子、五味子、栀子、掌叶大黄、虫草菌丝、升麻、松花粉、虎杖或垂盆草。2.根据权利要求1所述的中药提取物，其特征在于，所述的制备方法具体为：取过40-70目筛的中药材粉末，精密称定，加入甲醇，料液比为0.032-0.05g/ml；密闭条件下超声处理，功率240-260W，频率35-45kHz，时间为50-70min，放冷，用甲醇补足减失的重量，离心取上清液；氮吹干，得浸膏。3.根据权利要求1所述的中药提取物，其特征在于，所述的中药为五味子或垂盆草。4.权利要求1-3任一所述的中药提取物在制备药物中的应用，所述的药物用于治疗腺苷脱氨酶活性升高的疾病。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的腺苷脱氨酶活性升高的疾病为白血病、伤寒、系统性红斑狼疮、糖尿病、肝病、肿瘤、兴奋毒性神经紊乱、神经退行性疾病、心肌缺血或高血压。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的腺苷脱氨酶活性升高的疾病为白血病。7.一种测定权利要求1-3任一所述的中药提取物对腺苷脱氨酶的抑制作用的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶促反应：向待测中药提取物的样品中加入腺苷脱氨酶溶液和底物腺苷进行反应，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王长虹，刘伟，程雪梅，戚胜兰，管辉达，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：上海,31