银杏内酯组合物的医药用途制造技术

本发明专利技术提供了银杏内酯组合物在制备治疗多发性硬化症药物中的应用。本发明专利技术建立的EAE动物模型，在给予银杏内酯组合物药物干预后发现EAE动物神经功能评分显著降低，falling latency时间显著延长，说明银杏内酯组合物能够显著降低EAE发病程度。且EAE小鼠血清中IL‑17、IFN‑γ表达显著减少，IL‑4表达显著增加，可见，银杏内酯组合物还能够改善由上述细胞因子含量失衡所引发的炎症反应。

The pharmaceutical use of ginkgolide composition

The invention provides the application of ginkgolide composition in the preparation of medicine for curing multiple sclerosis. The EAE animal model established in the present invention showed that the neurological function score of EAE animals decreased significantly after the intervention of ginkgolide compound drugs, and the time of falling latency was significantly prolonged, indicating that ginkgolide composition could significantly reduce the incidence of EAE. In addition, the expression of IL 17, IFN and IL in the serum of EAE mice decreased significantly, and the expression of IL increased significantly. It was found that ginkgolide compound could also improve the inflammatory response caused by the imbalance of the above cytokines.

【技术实现步骤摘要】
银杏内酯组合物的医药用途
本专利技术属于涉及医药
，特别是涉及银杏内酯组合物在治疗多发性硬化症中的应用。
技术介绍
多发性硬化症(multiplesclerosis，MS)是一种中枢神经系统脱髓鞘自身免疫性疾病，临床主要表现为复发缓解的过程及进行性加重的神经功能障碍，已成为造成中青年非创伤性残疾的主要原因。MS分为六种主要的临床综合征：临床孤立综合征(clinicallyisolatedsyndromes，CIS)、缓解复发型MS、继发进展型MS、进展复发型MS、原发进展型MS和急性MS。近年来发病率呈持续上升趋势，女性发病人数两倍于男性，我国北方患者多于南方，以20岁～40岁居多，目前仍无法治愈该疾病，严重影响患者的健康和生活质量，同时也带来了巨大的社会经济影响。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE)是国际上公认的MS的理想动物模型，主要是以一种特异性致敏的CD4+T细胞为介导，对实验动物进行髓鞘蛋白免疫构建，使中枢神经系统(centralnervoussystem，CNS)发生炎性浸润、髓鞘脱失的疾病模型，EAE动物可发生白质和深灰质脱髓鞘，生化、免疫及病理特征都与MS非常相似，因此成为研究MS发病机制和药物治疗临床前试验的重要手段。与大多数神经变性疾病一样，目前，MS缺乏特异性的治疗方法。临床上用于治疗MS的药物主要是基于抗炎和免疫调节而发挥作用，一般采用干扰素、糖皮质激素、苯二氮类、肌松剂等对症治疗，但是，上述药物存在毒副作用较大、不良反应较多等缺点限制了其应用。银杏叶提取物是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一，其中银杏内酯(萜类)是银杏叶提取物及其制剂主要的药效活性成分，具有拮抗血小板活化聚集、降脂、抗炎、抗过敏、抗肿瘤、保护神经系统等广泛的药理作用。目前对于单纯的银杏内酯用于治疗多发性硬化症的报道并不多，尤其关于银杏内酯K药理研究还不多，也未有含银杏内酯K的组合物的相关报道研究。
技术实现思路
本专利技术以多发性硬化症的经典动物模型-EAE为模型，对含银杏内酯K的组合物进行研究，旨在得到一种具有治疗多发性硬化症的银杏内酯组合物。由此，本专利技术提出了银杏内酯组合物在制备治疗多发性硬化症药物中的应用。具体地，该银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其中，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～40)：(50～75):(0.2～5)。进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～35)：(50～70):(0.5～4)。更进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～30)：(50～65):(0.8～4)。具体地，多发性硬化症包括临床孤立综合征、缓解复发型多发性硬化症、继发进展型多发性硬化症、进展复发型多发性硬化症、原发进展型多发性硬化症和/或急性多发性硬化症等情形。进一步地，所述治疗多发性硬化症的药物中，银杏内酯组合物静脉滴注治疗有效量为0.2-0.8mg/kg/d。具体地，银杏内酯组合物可以使用各种药学上可接受的辅料制备成口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂等。进一步地，银杏内酯组合物可以制备成片剂、粉针剂、胶囊剂、软膏、栓剂、透皮制剂等等。本专利技术还提出了一种银杏内酯组合物在改善中枢神经系统脱髓鞘自身免疫性疾病药物中的应用。本专利技术采用背部中线两侧皮下4点注射MOG33-55与CFA混合乳化抗原、于当天及第2天腹腔注射百日咳毒素制剂复制EAE动物模型，给予银杏内酯组合物药物干预后发现EAE动物神经功能评分显著降低，fallinglatency时间显著延长，说明银杏内酯组合物能够显著降低EAE发病程度。其次，银杏内酯组合物药物干预后，EAE小鼠血清中IL-17、IFN-γ表达显著减少，IL-4表达显著增加，可见，银杏内酯组合物能够改善由上述细胞因子含量失衡所引发的炎症反应。且本专利技术提供的含银杏内酯K的组合物与EGb761比较具有更好的作用效果。因此，由对于EAE动物模型的药效证实了银杏内酯组合物具有治疗多发性硬化症的作用，且优于EGb761。具体实施方式以下通过具体实施方式对本专利技术进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本专利技术的方案及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式的内容仅是说明的目的，而不是对本专利技术的限制。需要注意的是，如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用与本专利技术。银杏内酯类组合物对EAE模型小鼠神经功能及血清中细胞因子含量的影响1、实验材料1.1实验动物SPF级C57BL/6小鼠，8～10周龄，18～20g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。1.2实验药品及试剂原料银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯K(GK)以及银杏内酯组合物1-4由江苏康缘药业股份有限公司自制，具体如下：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(myelinoligodendrocyteglycoprotein33-55，MOG33-55，纯度HPLC>96％)由北京奥科生物技术有限公司合成；含有结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂(completefreund’sadiuvant，CFA)和百日咳毒素(pertussistoxin，PTX)均购自Sigma-Aldrich公司；EGb761购自法国益普生药业公司；白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、干扰素-γ(gammainterferon,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)试剂盒均购自R&D公司。1.3主要仪器Rotarod，美国NewBrunswickScientific公司。2、实验方法2.1模型建立MOG33-55用PBS稀释后与CFA等体积充分混合，用注射器反复抽打制成均匀分散的乳化抗原制剂，于小鼠背部中线两侧皮下4点注射含有300ugMOG33-55的乳化抗原制剂0.2ml(含结核分枝杆菌的终浓度为4mg/ml)，免疫当天及第2天给予小鼠腹腔注射PTX，诱导小鼠产生EAE。正常对照组小鼠背部中线两侧皮下4点注射等量CAF，免疫当天及第2天给予小鼠腹腔注射等量生理盐水。2.2分组及给药取造模成功的C57BL/6小鼠，随机分组，每组10只：正常对照组、模型组、银杏内酯组合物1、2、3、4低、中、高(1.75mg/kg、3.5mg/kg和7mg/kg)剂量治疗组，EGb761低、中、高(1.75mg/kg、3.5mg/kg和7mg/kg)剂量治疗组，每日腹腔注射给药1次，正常对照组、模型组每日腹腔注射等量生理盐水，连续给药40天。2.3神经功能评分参照Kono’s5分法(Kono,1988)分别于免疫第3、13、23、30、40天进行神经功能评分，具体标准如下：0分为不发病；1分为尾巴无力、脱垂行走；2分为后肢无力或单侧后肢拖行；3分为后肢瘫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏内酯组合物在制备治疗多发性硬化症药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种银杏内酯组合物在制备治疗多发性硬化症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～40)：(50～75):(0.2～5)。3.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～35)：(50～70):(0.5～4)。4.根据权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，李贵平，王振中，刘秋，许治良，周军，周建明，胡晗绯，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32