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用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的引物对、试剂盒及方法技术

技术编号:18015200 阅读:486 留言:0更新日期:2018-05-23 03:15
本发明专利技术涉及一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR‑124‑2甲基化检测的引物对。所述引物对包括FAM19A4、miR‑124‑2及β‑Actin正向引物、反向引物及检测探针。本发明专利技术涉及一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR‑124‑2甲基化检测的试剂盒。所述试剂盒包括含有上述引物及探针的PCR反应液,其包括上述正向引物、反向引物及检测探针,10×PCR buffer、dNTP、无核酸酶水及HS Taq酶。本发明专利技术还涉及一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR‑124‑2甲基化检测的方法。本发明专利技术提供的试剂盒及其检测方法具有检测结果准确、灵敏性高、通量高、特异性好、检测时间快速的优点。

【技术实现步骤摘要】
用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的引物对、试剂盒及方法
本专利技术涉及体外诊断
,特别的,涉及一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的引物对、试剂盒及方法。
技术介绍
宫颈癌一直是困扰女性的重要恶性肿瘤。正常的宫颈细胞经过癌前病变发展成为宫颈癌,可能长达几十年。在这整个过程中部分HPV病毒的感染可被自身免疫系统修复而自动转归为正常,而另外一部分与宫颈癌联系更紧密的癌前病变则需及时进行干预来阻止癌前病变发展成为宫颈癌。目前我国临床上应用的主要筛查手段为中国女性的健康做出巨大贡献的同时也都存在其不可避免的缺陷。首先,目前的方法是沿用了大半个世纪的细胞学检测方法,包括巴氏涂片法及近十多年发展起来的液基细胞学(TCT)。因为整个检测流程中从取样、抹片制备、观察、结果判读多个环节受到人为影响的可能性较大,造成漏检的几率较高。其次,自从宫颈癌归因于HPV病毒持续感染后发展起来的HPV-DNA检测。因为其检测的仅仅是HPV病毒的存在与否,而HPV病毒的存在,大部分是一过性的,也就是意味着这些被自体免疫清除掉的HPV感染也会被判定为阳性,导致过本文档来自技高网...
用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的引物对、试剂盒及方法

【技术保护点】
一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR‑124‑2甲基化检测的引物对,其特征在于,包括针对FAM19A4基因与miR‑124‑2基因的启动子区以及β‑Actin内参基因的特异性引物及探针,如下:FAM19A4正向引物:5'‑TCGCGGCGGGTTCGGTTT‑3',FAM19A4反向引物:5'‑GTCCAAAACGACGCGCAA‑3',FAM19A4检测探针:5'‑TACGAAACCGAACCCA‑3';miR‑124‑2正向引物:5'‑GGGGTAATTAATTTGGATTTACGTC‑3',miR‑124‑2反向引物:5'‑ATCTATTCCGTAAAAATATAAACGATACG‑...

【技术特征摘要】
1.一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的引物对,其特征在于,包括针对FAM19A4基因与miR-124-2基因的启动子区以及β-Actin内参基因的特异性引物及探针,如下:FAM19A4正向引物:5'-TCGCGGCGGGTTCGGTTT-3',FAM19A4反向引物:5'-GTCCAAAACGACGCGCAA-3',FAM19A4检测探针:5'-TACGAAACCGAACCCA-3';miR-124-2正向引物:5'-GGGGTAATTAATTTGGATTTACGTC-3',miR-124-2反向引物:5'-ATCTATTCCGTAAAAATATAAACGATACG-3',miR-124-2检测探针:5'-ATACCTACGTATACATATAC-3';其中,所述FAM19A4检测探针及miR-124-2检测探针的5'端均使用FAM标记作为发光基团,3'端均使用MGB作为淬灭基团;β-Actin正向引物:5'-ATTTGAGATGTATGAAGGTTTTTGG-3',β-Actin反向引物:5'-ACACCACAAAATCACACTTAACCT-3',β-Actin检测探针:5'-AAACCCTAACTACCTCCACCCACTCCCA-3';其中,所述β-Actin检测探针的5'端使用VIC标记作为发光基团,3'端使用MGB作为淬灭基团。2.一种用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基化检测的试剂盒,其特征在于,包括含有如权利要求1所述的特异性引物及探针的PCR反应液,所述PCR反应液包括:FAM19A4正向引物、FAM19A4反向引物及FAM19A4检测探针,miR-124-2正向引物、miR-124-2反向引物及miR-124-2检测探针,β-Actin正向引物、β-Actin反向引物及β-Actin检测探针,10×PCRbuffer,dNTP及无核酸酶水。3.根据权利要求2所述的用于宫颈癌基因FAM19A4、miR-124-2甲基...

【专利技术属性】
技术研发人员:韩林志肖芳
申请(专利权)人:韩林志
类型:发明
国别省市:湖南,43

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