SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2及建立方法及应用技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS‑H1（Hertwig`s epithelial root sheath,HERS‑H1）和HERS‑C2（Hertwig`s epithelial root sheath,HERS‑C2）的建立方法及其在牙再生中的应用，其特征在于：所述赫特维希上皮根鞘细胞系HERS‑H1保藏号为CCTCC NO.C2017249，所述赫特维希上皮根鞘细胞系HERS‑C2保藏号为CCTCC NO.C2017250。本发明专利技术中细胞系保存了牙齿发育过程中原代赫特维希上皮根鞘细胞的特性，并且可以至少传代至50代，增殖速率较原代细胞大为提高。建立方法操作简单，稳定、重复性高。

Establishment and application of HERS-H1 and HERS-C2 in SD rat epithelial root sheath cell line HERS-H1

The invention belongs to the field of biological technology, which involves the establishment of the Hertwig epithelial root sheath cell line HERS H1 (Hertwig`s epithelial root sheath, HERS H1) and HERS C2 C2 (Hertwig`s HERS) and its application in tooth regeneration. The characteristic is: the upper root of Hertwig's upper root. The sheath cell line HERS H1 CCTCC is CCTCC NO.C2017249, and the Hertwig epithelial root sheath cell line HERS C2 C2 is CCTCC NO.C2017250. In the present invention, the cell line preserves the characteristics of the DEI Hertwig epithelial root sheath cells in the process of the development of the teeth, and can be passed to at least 50 generations, and the proliferation rate is higher than that of the primary cells. The method is simple, stable and reproducible.

【技术实现步骤摘要】
SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2及建立方法及应用
本专利技术属于生物
，涉及SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2的建立方法及应用。
技术介绍
牙齿是人类重要的器官，承担着咀嚼、发音、维持颌面部形态等功能，然而牙齿缺失成为影响人类生活的一大因素。20-64岁的成人平均仅有24.92颗牙齿存留，平均每人缺失了3.08颗牙齿(尽头牙除外)。而其中有3.75％的人全口缺牙。目前修复缺失牙齿的方法主要有桥体修复，种植牙修复以及活动义齿修复。桥体修复和活动义齿修复主要是依赖于余留的牙齿对缺失的牙齿进行修复，往往会对余留的牙齿造成不可逆转的损伤，假牙的舒适度也不尽如人意。目前主流的修复方式为种植义齿修复，既舒适又美观，但种植体周围很容易发生炎症，造成种植义齿松动脱落。因此，构建功能完好的生物牙根以及在生物牙根上安装牙冠，构建能媲美天然牙齿的修复体已成为修复缺失牙齿的趋势。赫特维希上皮根鞘(Hertwig’sepithelialrootsheath,HERS)是牙冠发育完成后，成釉器内外釉上皮在颈环处增生，向未来根尖孔方向生长，形成的双层上皮本文档来自技高网...

【技术保护点】
SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS‑H1（Hertwig`s epithelial root sheath, HERS‑H1）和HERS‑C2（Hertwig`s epithelial root sheath, HERS‑C2），其特征在于：所述赫特维希上皮根鞘细胞系HERS‑H1保藏号为CCTCC NO.C2017249，所述赫特维希上皮根鞘细胞系 HERS‑C2保藏号为CCTCC NO.C2017250。

【技术特征摘要】
1.SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1（Hertwig`sepithelialrootsheath,HERS-H1）和HERS-C2（Hertwig`sepithelialrootsheath,HERS-C2），其特征在于：所述赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1保藏号为CCTCCNO.C2017249，所述赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-C2保藏号为CCTCCNO.C2017250。2.根据权利要求1所述的SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2的建立方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）获取大鼠原代HERS细胞；（2）编码SV40LT慢病毒转染原代细胞；（3）制备单细胞悬液及克隆扩增培养即得。3.根据权利要求1所述的SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2的建立方法，其特征在于：所述步骤（1）中采用混合酶消化法进行赫特维希上皮根鞘细胞的原代培养；所述混合酶包括分散酶和Ⅰ型胶原酶，分散酶和Ⅰ型胶原酶的比例为1-1.2：1。4.根据权利要求1-3中任一项所述的SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2的建立方法，其特征在于：还包括以下步骤：（1）编码SV40LT慢病毒转染原代细胞，进行传代培养；（2）用含嘌呤霉素的培养基筛选转染阳性的细胞；（3）阳性转染的单细胞克隆扩增后传代培养至50代或以上，获得HERS-H1和HERS-C2细胞系；（3）对HERS-H1和HERS-C2细胞系进行表面标记蛋白的免疫荧光检测；（4）诱导液诱导其上皮间充质转化或成骨分化。5.根据权利要求4所述的SD大鼠赫特维希上皮根鞘细胞系HERS-H1和HERS-C2的建立方法，其特征在于：所述步骤（1...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国庆，田卫东，李雪冰，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川,51