The invention relates to the field of microorganisms, specifically discloses a glnA gene deficient ammonium tolerant nitrogen fixing microorganism and a construction method and application thereof. The ammonium nitrogen fixing microorganism with glnA gene deletion can make nitrogen fixation under the condition of ammonium free and ammonium. It improves the activity of nitrogen fixing enzyme of Bacillus in the condition of high ammonium, breaks through the inhibition effect of high ammonium on biological nitrogen fixation, and has a wide application prospect in agricultural production.
【技术实现步骤摘要】
一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用
本专利技术涉及微生物领域，具体地说，涉及一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用。
技术介绍
氮素是植物生产中必需的最大元素。化学氮肥在保障我国粮食生产、蔬菜种植和果树栽培中起着十分重要的作用。但长期过量偏施化学氮肥，导致土壤酸化和盐渍化，土壤微生物活力下降，己成为农业可持续发展的一个重要制约因子。生物固氮是少数细菌，在常温常压下将空气中的氮气还原成铵的过程，固氮形成的铵被植物吸收利用。但生物固氮是一个高耗能过程，酶还原1分子氮，需要消耗16个ATP，因此生物固氮受产物铵的严格调控。铵浓度低(0-10mM)时，固氮菌进行生物固氮；铵浓度高(大于10mM)时，固氮菌只生长而不固氮。也就是说，固氮菌在贫瘠的土壤里固氮效率高，在肥沃的土壤里固氮效率低。突破铵的抑制作用，一直是生物固氮研究领域的一个研究热点。获得在高铵条件下固氮的微生物，在农业生产中具有重要的应用价值。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物及其构建方法与应用。为了实现本专利技...
【技术保护点】
一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物，其特征在于，缺失如SEQ ID NO.1所示的glnA基因。
【技术特征摘要】
1.一种glnA基因缺失的耐铵固氮微生物，其特征在于，缺失如SEQIDNO.1所示的glnA基因。2.根据权利要求1所述的耐铵固氮微生物，其特征在于，所述微生物为类芽孢杆菌属。3.根据权利要求2所述的耐铵固氮微生物，其特征在于，所述微生物为多粘类芽孢杆菌。4.权利要求3所述的耐铵固氮微生物的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)利用SEQIDNO.2～3所示的引物up(glnRA)-F/up(glnA)-R扩增glnA上游同源臂(1001bp)，利用SEQIDNO.4～5所示的引物down(glnA)-F/down(glnA)-R扩增下游同源臂(511bp)；(2)将载体pRN5101用BamHI/SalI限制性内切酶处理，得到酶切片段；(3)利用Gibsonassemblymastermix(NewEnglandBiolabs)对...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈三凤，赵喜云，王天舒，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
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