The invention discloses a method for artificial breeding of Dendrobium, which includes the following steps: S1 seeding, S2 seed germination and seedling generation, S3 explant inducing primary corm, S4 subculture and S5 protocorm proliferation. The artificial breeding method of the rice Dendrobium has the advantages of tissue culture, short growth cycle and high reproductive coefficient, and meets the needs of large demand for rice. Moreover, the obtained rice is rich in nutritive value, and has the functions of clearing throat, moistening throat, clearing the voice, improving eyesight, relieving summer heat and replenishing qi, and nourishing the stomach and clearing away heat.
【技术实现步骤摘要】
米斛的人工育种方法
本专利技术涉及育种
，特别是涉及一种米斛的人工育种方法。
技术介绍
霍山石斛俗称米斛，最早见载于清代赵学敏《本草钢目拾遗》，距今有200年以上历史。该书记载称：“霍石斛出江淮霍山，形似钗斛细小，色黄而形曲不直，有成球者，彼土人以代茶茗，霍石斛嚼之微有浆、黏齿、味甘、微咸，形缩为真”。该书引用年希尧集经验方曰：“长生丹用甜石斛，即霍山石斛也。”道家经典《道藏》曾把霍山石斛、天山雪莲、三两人参、百二十年首乌、花甲茯苁、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草等列为中华“九大仙草”，且霍山石斛名列之首。米斛作为珍稀名贵的中药材早已驰名国内外，目前市场需求量巨大。但是米斛对生长条件要求极为苛刻，种子繁殖能力极低，生长周期长。而且由于过度采挖，米斛自然资源早已枯竭。这给米斛的开发利用和可持续发展带来不利影响，因而对保证米斛原料来源、实行规模化培养的需求越来越迫切。当前米斛组织培养研究多以种子离体萌发，诱导茎尖、茎段分生组织直接成苗为主。但是试管苗生根缓慢，移栽困难，且移栽后的成活率比较低，米斛的原球茎实质上是分化的体细胞胚胎，其与米斛的植株主要药用有效成分相当，具有同样的生理代谢潜能，可以来替代原药材。而且，原球茎比试管苗繁殖快，生长周期短，因而探讨本专利技术对米斛原球茎增殖的适宜培养方式进行探讨。
技术实现思路
本专利技术客服了现有技术中米斛资源短缺、生长周期长的问题，采用米斛原球茎作为米斛植株的替代品，使米斛的生产更利于产业化和商业化。本专利技术提供一种米斛的人工育种方法，包括以下步骤：S1播种；S2种子萌发生成幼苗；S3外植体诱导生成原球茎；S4继代...
【技术保护点】
一种米斛的人工育种方法，其特征在于，包括以下步骤：S1播种；S2种子萌发生成幼苗；S3外植体诱导生成原球茎；S4继代培养；S5原球茎增殖。
【技术特征摘要】
1.一种米斛的人工育种方法，其特征在于，包括以下步骤：S1播种；S2种子萌发生成幼苗；S3外植体诱导生成原球茎；S4继代培养；S5原球茎增殖。2.根据权利要求1所述的米斛的人工育种方法，其特征在于，包括以下步骤：S1播种：将米斛果实用质量分数为1-2％的次氯酸钠水溶液消毒50-60分钟，用无菌蒸馏水冲洗3-5分钟，切开果实，将种子均匀散布在固体播种培养基表面，种子的播种量为5-10粒/mL培养基，其中所述固体播种培养基的组成为：30g/L蔗糖、7-8g/L琼脂、1650mg/LNH4NO3、1900mg/LKNO3、370mg/LMgSO4·7H2O、4400mg/LCaCl2·2H2O、170mg/LKH2PO4，余量为水；S2种子萌发生成幼苗：将播种后的培养基于温度23-25℃、空气湿度70-80％、光照强度1400-1800lx、光照时间12-16小时/天的条件下培养6-7个月，种子萌发生成幼苗；S3外植体诱导生成原球茎：选择长度为1-1.5cm的幼苗茎段作为外植体，将茎段接种于固体诱导培养基中，茎段的接种量为4-6个茎段/mL培养基，于温度23-25℃、空气湿度70-80％、光照强度1400-1800lx、光照时间12-16小时/天的条件下培养30-60天，有原球茎生成，其中固体诱导培养基的组成为：30g/L蔗糖、7-8g/L琼脂、303mg/LKNO3、370mg/LMgSO4·7H2O、661mg/LCaCl2·2H2O、340mg/LKH2PO4、0.1-0.3mg/L生长调节剂，余量为水；S4继代培养：将诱导产生的原球茎继续培养30-40天后，从茎段上分离，在继代培养基上培养2-3个月，从继代培养物中挑选长势均一、生长良好的、无分化、色泽鲜绿的原球茎，其中所述继代培养基的组成为：30g/L蔗糖、1g/L水解乳蛋白、6-7g/L琼脂、1900mg/LKNO3、1650mg/LNH4NO3、70mg/LMgSO4·7H2O、440mg/LCaCl2·2H2O、170mg/LKH2PO4，余量为水；S5增殖培养：将原球茎以30-100g/L的接种量转入增殖培养基中，于温度23-25℃、空气湿度70-80％、光照强度1400-1800lx、光照时间12-16小时/天的...
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