一种含有防御素的饲料添加剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于动物饲料领域，具体涉及一种含有防御素的饲料添加剂的制备方法。本发明专利技术所述的含有防御素的饲料添加剂，原料包括D型氨基酸取代L型氨基酸防御素。所述的含有防御素的饲料添加剂的制备方法，步骤包括发酵携带D型氨基酸取代L型氨基酸防御素基因的酵母基因工程菌株，取上清液进行超滤，超滤液依次添加保护剂、壁材和载体，进行喷雾干燥。该添加剂以防御素为主要成分，具有高度抗菌性，该抗菌物质对抗耐药菌有极强的抑菌、杀菌功效。

Feed additive containing defensin and preparation method thereof

The invention belongs to the field of animal feed, in particular to a preparation method of feed additive containing defensins. The feed additive containing defensins is composed of D amino acid instead of L amino acid defensin. The preparation method of feed additive containing defensin includes yeast gene engineering strain carrying D type amino acid substituted L amino acid defensin gene, ultrafiltration with supernatant, and ultrafiltration in order to add protectant, wall material and carrier for spray drying. The additive is mainly composed of defensins and has high antibacterial activity. The antibacterial substance has strong bacteriostatic and bactericidal efficacy against drug-resistant bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种含有防御素的饲料添加剂及其制备方法
本专利技术属于动物饲料领域，具体涉及一种含有防御素的饲料添加剂及其制备方法。
技术介绍
近年来，抗生素在畜产品中大量使用，其残留可能使动物病原菌产生耐药性，耐药基因可通过转化、转导、接合、易位等方式在细菌之问传播，也可能通过食物链等途径扩散耐药基因，使细菌的耐药基因在人群中细菌、动物群中细菌和生态系统中细菌间互相传递，由此导致致病菌的耐药性增加而引起人类和动物感染性疾病的治疗失败，对人类的健康产生危害。
技术实现思路
本专利技术提供了一种以防御素为主料的天然饲料添加剂及其制备方法，该添加剂以防御素为主要成分，具有高度抗菌性，该抗菌物质对抗耐药菌有极强的抑菌、杀菌功效。本专利技术所述的含有防御素的饲料添加剂，原料包括D型氨基酸取代L型氨基酸防御素。本专利技术所述的含有防御素的饲料添加剂的制备方法，步骤包括发酵携带D型氨基酸取代L型氨基酸防御素基因的酵母基因工程菌株，取上清液进行超滤，超滤液依次添加保护剂、壁材和载体，进行喷雾干燥。优选的，超滤截留分子量为2KDa～8KDa的超滤液。优选的，所述保护剂包括：优选的，所述壁材为海藻酸钠，添加量为添加剂总重量的5～10wt％。优选的，所述载体为玉米淀粉、麦芽糊精、麦麸粉中的一种或两种，添加量为添加剂总重量的20-25wt％。优选的，喷雾干燥的条件为：进风温度160～180℃，进料速度10～30ml/min，出风温度65～85℃。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：该添加剂以防御素为主要成分，具有高度抗菌性，该抗菌物质对抗耐药菌有极强的抑菌、杀菌功效。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术进行详细的阐述。实施例11、酵母发酵液的制备1)平板培养复壮：将携带D型氨基酸取代L型氨基酸防御素基因的毕赤酵母(该种酵母的制备方法已有文献公开)菌种接种于YPD平板培养基上，于28℃培养48h，使毕赤酵母复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种培养基上，28℃培养48h；2)一级种子的制备：将步骤1)培养的毕赤酵母菌种转接装有300mlYPD液态培养基2L摇瓶里，28℃摇床培养48h，至对数后期，得一级种子；3)二级种子的制备：将步骤2)制备的一级种子转接到装有30LYPD种子培养基的50L种子罐中，温度27℃，转速600rpm，培养24h，得二级种子液。4)毕赤酵母发酵液的制备：将步骤3)制备的二级种子液按照5％的接种量接种到0.5～0.8m3发酵培养基的发酵罐中，温度31℃，转速400rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1：0.6，培养48h，收集发酵液。发酵毕赤酵母时用的发酵培养基由以下成分组成：葡萄糖18g/L，蛋白胨20g/L，牛肉膏3g/L，酵母浸粉8/L，pH为7.2。2、D型氨基酸取代L型氨基酸防御素的制备1)上清液制备：将1中得到的发酵液经离心机3000rpm离心20min，去除菌体收集上清，再次5000rpm离心15min，去除菌体收集上清液，待用。2)超滤：选择2KD超滤膜，4000rpm，离心40min，收集超滤液。3)保护剂的添加：将以下比例的成分进行预先混合，以超滤液的5wt％进行添加，充分混合：4)壁材制备及添加：将自来水升温至40℃～50℃，边开搅拌边慢慢加入明胶，使其完全溶解配成10wt％的溶液，按超滤液的1.5wt％加入配好的明胶溶液搅拌10min。5)加入25wt％的载体，设置喷雾干燥塔进出风温度为165℃/85℃，雾化器转动频率为35Hz，进料速度为18ml/min，进行喷雾干燥，得到含有D型氨基酸取代L型氨基酸防御素的饲料添加剂。实施例21、酵母发酵液的制备1)平板培养复壮：将携带D型氨基酸取代L型氨基酸防御素基因的毕赤酵母(该种酵母的制备方法已有文献公开)菌种接种于YPD平板培养基上，于28℃培养48h，使毕赤酵母复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种培养基上，28℃培养48h；2)一级种子的制备：将步骤1)培养的毕赤酵母菌种转接装有300mlYPD液态培养基2L摇瓶里，28℃摇床培养48h，至对数后期，得一级种子；3)二级种子的制备：将步骤2)制备的一级种子转接到装有30LYPD种子培养基的50L种子罐中，温度27℃，转速600rpm，培养24h，得二级种子液。4)毕赤酵母发酵液的制备：将步骤3)制备的二级种子液按照5％的接种量接种到0.5～0.8m3发酵培养基的发酵罐中，温度31℃，转速400rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1：0.6，培养48h，收集发酵液。发酵毕赤酵母时用的发酵培养基由以下成分组成：葡萄糖18g/L，蛋白胨20g/L，牛肉膏3g/L，酵母浸粉8/L，pH为7.2。2、D型氨基酸取代L型氨基酸防御素的制备1)上清液制备：将1中得到的发酵液经离心机3000rpm离心20min，去除菌体收集上清，再次5000rpm离心15min，去除菌体收集上清液，待用。2)超滤：选择8KD超滤膜，4000rpm，离心40min，收集超滤液。3)保护剂的添加：将以下比例的成分进行预先混合，以超滤液的5wt％进行添加，充分混合：4)壁材制备及添加：将自来水升温至40℃～50℃，边开搅拌边慢慢加入明胶，使其完全溶解配成10wt％的溶液，按超滤液的1.5wt％加入配好的明胶溶液搅拌10min。5)加入25wt％的载体，设置喷雾干燥塔进出风温度为165℃/85℃，雾化器转动频率为35Hz，进料速度为18ml/min，进行喷雾干燥，得到含有D型氨基酸取代L型氨基酸防御素的饲料添加剂。以实施例1和2制备的饲料添加剂添加到鱼饲料中，显著提高鱼苗的采食量，促进饲料利用率，提高鱼苗的生长速度和日增重。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有防御素的饲料添加剂，其特征在于，原料包括D型氨基酸取代L型氨基酸防御素。

【技术特征摘要】
1.一种含有防御素的饲料添加剂，其特征在于，原料包括D型氨基酸取代L型氨基酸防御素。2.一种权利要求1所述的含有防御素的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤包括发酵携带D型氨基酸取代L型氨基酸防御素基因的酵母基因工程菌株，取上清液进行超滤，超滤液依次添加保护剂、壁材和载体，进行喷雾干燥。3.如权利要求1所述的含有防御素的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，超滤截留分子量为2KDa～8KDa的超滤液。4.如权利要求1所述的含有防御素的饲料添加剂的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴学记，
申请(专利权)人：威海同丰海洋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37