一种多跨膜区蛋白抗体的筛选方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种多跨膜区膜蛋白抗体的筛选方法，所述方法包括用多跨膜区蛋白作为抗原筛选针对完整蛋白的抗体，然后以含有所述多跨膜区蛋白的杆状病毒为抗原，鉴定针对多跨膜区蛋白胞外区的抗体。本发明专利技术还涉及用所述方法获得的抗体及其应用。

Screening method and application of a multi membrane protein antibody

The present invention provides a screening method for multi - span membrane protein antibody. The method includes screening antibodies against complete proteins by using multi - span membrane region protein as antigen, and identifying antibodies against the extracellular domain of multi - span membrane region protein with baculovirus as antigen containing the multi - transmembrane region protein. The invention also relates to antibodies obtained by said method and their applications.

【技术实现步骤摘要】
一种多跨膜区蛋白抗体的筛选方法及其应用
本专利技术涉及一种多跨膜区蛋白抗体的筛选方法及其应用，特别是涉及针对多跨膜区蛋白胞外区域构象抗体的筛选方法和应用。
技术介绍
横跨生物膜两次以上的蛋白统称为多跨膜区整合膜蛋白，包括G蛋白偶联受体，离子通道，跨膜转运蛋白等。整合膜蛋白约占细胞总蛋白的30%，是三分之二以上药物的靶点。例如人铜离子转运蛋白(hCtr1)，属于多跨膜区整合膜蛋白。是人体所需铜离子的主要跨膜转运蛋白之一。除此之外Cisplatin也是通过hCtr1蛋白进行跨膜运输。Cisplatin是一种用于治疗各种癌症的化疗药物，细胞对于Cisplatin跨膜转运的限制是限制该药有效性的途径之一。提高hCtr1蛋白的转运效率是解除由于Cisplatin跨膜转运的限制而导致的药物有效性的降低的有效手段之一。抗体药物在2012年创下全球650亿美元的销售额，占生物制药的51.8%，到2015年，抗体药物销售额达980亿美元。然而至今没有研发出针对多跨膜区蛋白的抗体药物。这是由于多跨膜区蛋白抗体的研发依然缺乏有效的手段，其中包括缺少适合多跨膜区蛋白的抗体的筛选方法。多跨膜区蛋白分为胞外区、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂立方相，其特征在于：其包含多跨膜区蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种脂立方相，其特征在于：其包含多跨膜区蛋白。2.根据权利要求1所述的脂立方相，其特征在于：所述的多跨膜区蛋白为铜离子转运蛋白。3.根据权利要求2所述的脂立方相，其特征在于：所述的多跨膜区蛋白为CTR1。4.一种如权利要求1至3中任一项所述的脂立方相的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤（1）、根据多跨膜区蛋白的氨基酸序列设计合成DNA序列并克隆至表达系统；步骤（2）、将所述的表达系统进行培养并接种杆状病毒，继续培养至细胞的存活率下降到70%~80%时，收获细胞，将所述的细胞进行洗涤、破碎、离心处理，收取膜成分；步骤（3）、将所述的膜成分进行稀释、离心、孵育、纯化得到蛋白溶液；步骤（4）、将所述的蛋白溶液与脂立方相的原料混合形成脂立方相。5.根据权利要求4所述的脂立方相的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，在所述的多跨膜区蛋白的氨基酸序列的C端融合抗FLAG抗体识别的表位，然后再设计合成所述的DNA序列；步骤（2）中接种的杆状病毒为感染复数为0.5的第三代杆状病毒。6.一种由如权利要求1至3中任一项所述的脂立方相经破碎制成的微型颗粒。7.一种免疫组合物，其特征在于：其包括如权利要求1至3中任一项所述的脂立方相或如权利要求6所述的微型颗粒。8.如权利要求1至3中任一项所述的脂立方相或如权利要求6所述的微型颗粒作为免疫原的用途。9.一种使用如权利要求1至3中任一项所述的脂立方相、如权利要求6所述的微型颗粒或如权利要求7所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏小兵，彭艳春，李子剑，陈智杰，
申请(专利权)人：苏州因湃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32