一种地龙蛋白多肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种地龙蛋白多肽的制备方法，包括：自溶酶解、二次酶解、纯化，先让干净的地龙在适当条件下自溶酶解，取上清液后加入枯草芽孢杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶二次酶解，酶解过程中以双频率复合超声与微波辐射交错间隔辅助酶解，二次酶解的中程添加（S）‑1‑氨基‑2‑羟甲基二氢吲哚以防止酶失活，酶解后以超滤膜纯化制得地龙蛋白多肽。有益效果为：酶解过程中以双频率超声与微波辐射交错间隔辅助酶解，不仅可以为酶解体系提供能量，维持酶解所需温度，而且双频率超声与微波辐射的交替间隔辅助还可以大大提高酶解效率，降低酶解时间，同时保证了酶解的彻底性与准确性，节约了成本。

Preparation of a kind of dragon protein polypeptide

The invention discloses a preparation method of the Dragon protein polypeptide, including: autolysis enzyme solution, two enzymatic hydrolysis and purification. First, the clean ground dragon is hydrolysated under appropriate conditions, and the supernatant is added to Bacillus subtilis protease and papain two times after the supernatant, and the double frequency compound ultrasound and microwave radiation during the enzymolysis process The interlaced interval was assisted by enzyme hydrolysis, and the medium range addition (S) of the two enzymolysis was 1, 2 hydroxymethyl two hydroxy indole was used to prevent the inactivation of the enzyme, and the polypeptides were purified by ultrafiltration membrane after enzymatic hydrolysis. The beneficial effect is that in the process of enzymolysis, the enzyme solution is assisted by the interlaced interval of double frequency ultrasound and microwave radiation, which can not only provide energy for enzymatic hydrolysis system, maintain the temperature needed for enzymatic hydrolysis, but also improve the enzymatic hydrolysis efficiency, reduce the enzymolysis time and ensure the enzymatic hydrolysis. The thoroughness and accuracy, save the cost.

【技术实现步骤摘要】
一种地龙蛋白多肽的制备方法
本专利技术涉及多肽的制备领域，尤其是涉及一种地龙蛋白多肽的制备方法。技术背景地龙，又名地龙，是我国重要的中药材之一。最早的中药学专著《神农本草经》中收载的67种动物药中就有地龙。在《神农本草经》列为下品，具有清热定惊、通络、平喘、利尿的功效。常炒制后用于高热、神昏、惊痫抽搐、关节痹痛、肺热喘咳、尿少水肿、高血压等症，主含多种氨基酸。由于生品腥味太重，故入药一般需经炒制。陶弘景谓：“若服干蚓，须熬作屑”。传统用地龙，制法很多，主要有药制、醋制、熬制、酒制、油制、蛤粉炒制、盐制等法，使其质地松泡酥脆、去毒性、矫正臭味及便于煎制服用。李时珍在《本草纲目》称之为具有通经活络、活血化瘀、预防治疗心脑血管疾病作用，在《本草纲目》虫部中有40多种药用作用。地龙可以生产多种中药、西药、人、畜用药品、地龙注射液、普恩复、溶栓、百奥、抗栓、步长胶囊。也可以作为各种家禽、家畜、渔业水产品、水族宠物食品、动物性活食饵料、饲料添剂诱食剂。干地龙可以作为各种鱼类、水产品高档开口饵料。鲜地龙是高蛋白活饵料。畜禽动物，长吃地龙可以减少用药量，降低死亡率。冻地龙是高效益药物饵料，各种畜本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种地龙蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述的地龙蛋白多肽的制备方法包括：自溶酶解：取新鲜地龙，以含有充足溶氧的纯净水浸泡5‑7天以使地龙吐出脏物，将干净的地龙用高速组织捣碎机捣碎，加入1.5‑3.0倍的水，自溶酶解，静置15‑30分钟后以3000‑4500r/min离心10‑15分钟，取上清液待用；二次酶解：调节pH为6.5‑7.0后加入复合酶，50‑65℃酶解15‑20分钟；在体系中加入（S）‑1‑氨基‑2‑羟甲基二氢吲哚，持续酶解15‑20分钟，以双频率复合超声与微波辐射交替间隔辅助酶解，酶解完成后沸水浴灭活20‑25分钟，静置15‑30分钟，经2000‑3500 r/min、0‑4℃离...

【技术特征摘要】
1.一种地龙蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述的地龙蛋白多肽的制备方法包括：自溶酶解：取新鲜地龙，以含有充足溶氧的纯净水浸泡5-7天以使地龙吐出脏物，将干净的地龙用高速组织捣碎机捣碎，加入1.5-3.0倍的水，自溶酶解，静置15-30分钟后以3000-4500r/min离心10-15分钟，取上清液待用；二次酶解：调节pH为6.5-7.0后加入复合酶，50-65℃酶解15-20分钟；在体系中加入（S）-1-氨基-2-羟甲基二氢吲哚，持续酶解15-20分钟，以双频率复合超声与微波辐射交替间隔辅助酶解，酶解完成后沸水浴灭活20-25分钟，静置15-30分钟，经2000-3500r/min、0-4℃离心15-25分钟，取上清；纯化：然后用超滤装置让酶解液依次通过10KD、3KD的超滤膜，收集3-10KD分子段的酶解液，低温干燥后冷冻保藏。2.根据权利要求1所述的一种地龙蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述自溶酶解步骤中的自溶pH为6.2-6.8，温度为45-50℃，保温反应时间为12-24小时。3.根据权利要求1所述的一种地龙蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述二次酶解步骤中复合酶的添加量为地龙组织重量的3.0-...

【专利技术属性】
技术研发人员：董珊珊，
申请(专利权)人：海盐县凌特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33