内切葡聚糖酶、其编码基因cel5A-h42及其应用制造技术
Endonuclease, its coding gene cel5A-h42 and its application
The invention relates to the field of gene engineering, in particular to an endonuclease, its coding gene cel5A H42 and its application. A gene encoding cel5A H42 of endonuclease is shown, and its nucleotide sequence is shown as SEQ ID No.1. Bioinformatics analysis showed that the endoglycosidase encoded by the gene belonged to the glycoside hydrolase fifth family. The inventor was successfully cloned by primers and expressed successfully in the prokaryotic expression system. The optimum effect of the recombinant endonuclease was 5, the optimum temperature was 5, the optimum temperature was 55 C, the relatively stable enzyme activity was maintained below 50 C, and it had strong pH tolerance at pH5.0 10 and could be maintained. More than 70% of the enzyme activity. The recombinant endonuclease has great potential for research and industrial application.
【技术实现步骤摘要】
内切葡聚糖酶、其编码基因cel5A-h42及其应用
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种内切葡聚糖酶、其编码基因cel5A-h42及其应用。
技术介绍
纤维素作为植物细胞壁的主要组成成分，是目前自然界中最丰富的可再生资源，然而其顽固的结构限制了它的利用。纤维素降解成葡萄糖的过程需要内切葡聚糖酶(Endoglucanase，EC3.2.1.4)、外切葡聚糖酶(exoglucanase，E.C.3.2.1.91)和β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase，E.C.3.2.1.21)三种纤维素酶的系统同作用。其中，内切葡聚糖酶是纤维素酶系最主要的成分，它主要作用于纤维素的非结晶区，随机水解纤维素链中的β-1,4糖苷键，切断纤维素长链，转化为大量不同聚合度的短链，降低纤维素的聚合度，在降解过程中发挥关键的作用。因此，它的生产利用对于纤维素的降解效率至关重要。目前，该酶已经广泛应用于造纸、纺织、食品、生物燃料、动物饲养等行业中。这些产业上的应用需要生产成本低，具有不同的最适pH和温度，以及较好稳定性的内切葡聚糖酶。过去几十年，大量的研究集中在如何减少真菌生产纤维素酶的...
【技术保护点】
一种内切葡聚糖酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种内切葡聚糖酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。2.一种编码权利要求1所述内切葡聚糖酶的内切葡聚糖酶基因cel5A-h42，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。3.一种包含权利要求2所述内切葡聚糖酶基因cel5A-h42的重组载体。4.一种包含权利要求2所述内切葡聚糖酶基因cel5A-h42的重组菌。5.一种制备内切葡聚糖酶的方法，是发酵培养权利要求4所述的重组菌，得到内切葡聚糖酶。6.扩增权利要求2所述内切葡聚糖酶基因cel5A-h42采用的特异性引物，其特征在于所述的特异性引物为：H4...
【专利技术属性】
技术研发人员：王佳堃，何波，金舒文，高歌，李嘉秋，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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