降低成像后胰腺炎风险的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及用于降低采用放射性造影介质的手术，特别是对胰腺、胆囊和/或胆道系统进行选择性成像的手术成像后胰腺炎风险的组合物和方法。在非限制性的实施方式中，本发明专利技术提供了一种放射性造影介质，其包括：(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂，以及其在进行胰腺和相关结构成像中的应用，所述应用相对于缺少成分(ii)和(iii)的传统放射性造影剂具有降低的继发胰腺炎风险。

Composition and methods for reducing the risk of post imaging pancreatitis

The invention relates to a composition and a method for reducing the risk of pancreatitis after selective imaging of pancreas, gallbladder and / or biliary tract system, especially for the operation of radiographic contrast media. In the implementation of non restrictive, the invention provides a radioactive contrast media, including: (I) radioactive agent; (II) calcineurin inhibitors; and (III) antioxidant, and its application in the pancreas and related structure imaging, the use of components (with respect to the lack of II) and (III) the traditional radioactive agent can reduce the risk of secondary pancreatitis.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】降低成像后胰腺炎风险的组合物和方法相关申请的交叉引用本专利技术要求2015年5月27日提交的美国临时专利申请系列第62/167,143号的优先权，其通过引用全文纳入本文。资助信息本专利技术是在政府支持下由国家卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)授予的基金号DK083327和DK03002的资助下完成。政府对本专利技术拥有一定的权利。1.专利技术概述本专利技术涉及应用于胰腺和相关结构成像研究中降低成像后胰腺炎风险的组合物，以及应用的相应方法。2.
技术介绍
内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)是一种常见的胃肠道手术，其中将内窥镜插入十二指肠并且对肝胰管壶腹(AmpullaofVater)进行插管1。放射性造影物质(RC)通过导管注射，从而以放射学方式观察胰胆道系统。ERCP是一种常见手术，其年发生率在美国是每100,000人中60至75例2。其在清除胆总管(CBD)中嵌入的胆结石以及各种其它治疗性干预中是必不可少的。然而，ERCP最为常见的医源性并发症是急性胰腺炎，这是胰腺炎的一种疼痛、炎性病症。ERCP后胰腺炎(PEP)的发生率在1％至15％之间，其总体平均值是3.5％3,4。PEP被认为是由于胰腺管中的静水压力和胰脏暴露于RC联合导致。在高风险情况下，人们已经使用放置胰腺管支架或直肠给予抗炎药吲哚美辛5-9。然而，广泛接受的预防PEP的策略，如使用直肠吲哚美辛进行预处理2的功效受到了挑战3,4。对PEP预防的研究需要揭示RC诱导导致胰腺炎的胰腺损伤的这一至今尚未被阐述的基本机制。3.
技术实现思路
本专利技术涉及用于降低采用放射性造影介质的手术，特别是对胰腺、胆囊和/或胆道系统进行选择性成像的手术成像后胰腺炎风险的组合物和方法。在非限制性实施方式中，本专利技术提供了一种放射性造影介质，其包含：(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂。在相关的非限制性实施方式中，所述放射性造影介质可以用于以相对于缺少成分(ii)和(iii)的传统放射性造影剂降低的后续胰腺炎风险进行胰腺和相关结构的成像。在某些非限制性实施方式中，本专利技术的所述放射性造影介质可以用于内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)，其中它降低了ERCP后胰腺炎(PEP)的风险。在相关的非限制性实施方式中，所述放射性造影介质可以用于胰腺和相关结构的成像以降低随后可能发生的任何胰腺炎的程度。在相关的非限制性实施方式中，可以将放射性造影介质直接地(例如，引入胆胰导管)或间接地(例如，通过静脉内给予)引入胆道系统。在其它非限制性实施方式中，本专利技术提供了用于胰腺炎体外试验的高通量筛选，所述胰腺炎体外试验使用病毒介导的报告系统以测量腺细胞系中炎性变化和/或损伤，以及分析通过病毒载体接受荧光素酶报告基因的小鼠胰腺NF-kB的体内方法。在其它非限制性实施方式中，本专利技术提供了胰腺炎症的调节剂，使用病毒介导的报告系统以测量腺细胞系中炎性变化和/或损伤的胰腺炎体外试验，以及分析通过病毒载体接受荧光素酶报告基因的小鼠胰腺NFAT的体内方法。4.附图的简要说明图1A-1F。RC输注在小鼠胰腺腺泡细胞中引起体内胰腺炎并诱导Ca2+信号。(A)使用灌注泵将RC输注到胆总管下端(箭头处)的原理图(P，胰腺；D，十二指肠)。(B)来自NS伪对照和灌注RC(以20μl/分钟，100μl体积)的小鼠的代表性HE切片。导管内RC以及增加的速率和体积的组合诱导了更大的组织学严重程度和更高的血清淀粉酶水平。(n＝各条件5只动物)。*，相对NS伪，P<0.05。(C)将小鼠胰腺腺泡细胞上样至定制的灌流室并使用共焦显微镜成像。(D)载有Ca2+染料Fluo-4AM的腺泡在基线、在Ca2+荧光初始上升期间和使用RC灌流期间的峰值荧光的相衬图像和伪彩色图像。以白色虚线勾勒出单个的腺泡细胞，红色箭头表示Ca2+信号从细胞的顶端到基底区域的发展。(E)具有升高浓度的RC的Ca2+通量的全细胞示踪总和。(F)Ca2+信号测量值的振幅和曲线下面积。使用RC(25％)在存在或不存在含有Ca2+介质的情况下灌注腺泡细胞。*，与17％RC相比，P<0.05。图2A-2F。使用碘海醇(欧乃派克Omnipaque300)输注后的组织学亚评分(subscore)，以及碘帕醇(Isovue300)也诱导胰腺炎的证据。(A)外科手术24小时后收集胰脏头部的HE染色切片。胰腺炎的组织组织学严重程度通过水肿、炎性浸润和坏死的存在分级。(n＝各组5只动物)。*，相对NS伪，P<0.05。(B)来自输注NS伪、碘帕醇和碘海醇小鼠的代表性HE切片。外科手术24小时后测量(C、E)组织学严重程度，(D)血清淀粉酶水平，和(F)血清IL-6。(n＝各组5只动物)。*，相对NS伪，P<0.05。图3A-3E。RC在人胰腺腺泡细胞中诱导的Ca2+信号和钙调磷酸酶活化，但无法在非胰腺细胞系中诱导相当大的Ca2+信号。(A)载有Fluo-4AM并用RC(10％-50％)灌注的人腺泡细胞的全细胞示踪总和。(B)振幅和曲线下面积的定量。(n＝各条件20-30个细胞)。*，相对于10％RC，P<0.05。(C)使用Ad-NFAT-荧光素酶感染人腺泡细胞，并以浓度渐增的RC刺激。RC(25％)诱导的NFAT-荧光素酶活性被细胞内Ca2+螯合剂BAPTA所抑制。(n＝3)。*，#，P<0.05，分别相对于对照或单独的RC。来自载有Fluo-4AM并用RC(25％-75％)灌注的(D)HEK293或(E)COS7细胞的全细胞示踪总和。在这些图中，显示了实验的终止部分，其中灌注卡巴胆碱(1mM)以确认细胞调动Ca2+的能力(各条件n＝20-30个细胞)。图4A-4D。RC通过Ca2+调动和IP3R诱导腺泡细胞钙调磷酸酶活化。使用Ad-NFAT-荧光素酶感染小鼠腺泡细胞并用RC(A)以各种时间段(25％RC)刺激或(B)以渐增的浓度刺激5小时。RC(9％)诱导的NFAT-荧光素酶活性被(C)30分钟使用钙调磷酸酶抑制剂K506(24μM)和环孢菌素(CsA；16μM)的预处理或(D)30分钟使用IP3R抑制剂2-APB(100μM)或细胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM(64μM)的预处理所抑制。(n＝3)。*，#，P<0.05，分别相对于对照或单独的RC。图5。RC碘帕醇(Isovue-300)在AR42J细胞中诱导钙调磷酸酶活化。使用Ad-NFAT-荧光素酶感染AR42J细胞，并以不同浓度的RC碘帕醇刺激(n＝3)。*，P<0.05，相对于对照。图6A-6E。由于RC，钙调磷酸酶是诱导腺泡细胞NF-κB(κ轻链增强子B的核因子)活化所必须的，并且也足以诱导其活化。来自使用(A)20％RC或各种浓度的RC刺激15分钟或30分钟的原代小鼠腺泡细胞的蛋白质印迹，探测磷酸化IκBα或p65。其下显示各印迹的光密度。(B)使用Ad-NF-κB-荧光素酶过夜感染腺泡分化的AR42J细胞，并使用浓度渐增的RC孵育6小时。将AR42J细胞以各种时间(实线)暴露于RC(25％)，然后用缓冲液洗去(虚线)，并孵育总共6小时。(C)NF-κB-荧本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种放射性造影介质，其包括在对象中放射成像有效量的(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂，其相对于给予不具有所述钙调磷酸酶抑制剂和所述抗氧化剂的放射性造影剂，具有降低的成像后胰腺炎风险。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.27 US 62/167,1431.一种放射性造影介质，其包括在对象中放射成像有效量的(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂，其相对于给予不具有所述钙调磷酸酶抑制剂和所述抗氧化剂的放射性造影剂，具有降低的成像后胰腺炎风险。2.如权利要求1所述的放射性造影介质，其中，所述放射性造影剂是水溶性非离子放射性造影剂。3.如权利要求1所述的放射性造影介质，其中，所述钙调磷酸酶抑制剂是环孢菌素。4.如权利要求1所述的放射性造影介质，其中，所述抗氧化剂是N-乙酰半胱氨酸。5.一种用于制造如权利要求1所述的放射性造影介质的试剂盒，其包括(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂。6.如权利要求5所述的试剂盒，其中，所述放射性造影剂是水溶性非离子放射性造影剂。7.如权利要求5或6所述的试剂盒，其中，所述钙调磷酸酶抑制剂是环孢菌素。8.如权利要求5、6或7中任一项所述的试剂盒，其中，所述抗氧化剂是N-乙酰半胱氨酸。9.一种对象体内胰腺、胆囊和/或胆道系统放射成像的方法，其包括将上述包括有效量的(i)放射性造影剂；(ii)钙调磷酸酶抑制剂；和(iii)抗氧化剂的放射性造影介质引入对象的胰腺、胆囊和/或胆道系统。10.如权利要求9所述的方法，其中，所述放射性造影剂是水溶性非离子放射性造影剂。11.如权利要求9或10所述的方法，其中，所述钙调磷酸酶抑制剂是环孢菌素。12.如权利要求9、10或11中任一项所述的方法，其中，所述抗氧化剂是N-乙酰半胱氨酸。13.一种确定测试化合物能否用于降低成像后胰腺炎风险的方法，其包括(i)提供原代腺泡细胞或胰腺细胞系细胞，所述细胞中已引入编码与可检测报告物融合的NFκB的核酸，所述核酸可操作地连接...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·胡赛恩，
申请(专利权)人：匹兹堡大学联邦系统高等教育，
类型：发明
国别省市：美国,US