腺病毒多核苷酸和多肽制造技术

特别地，在此提供了一种分离的多核苷酸，其中所述多核苷酸编码选自以下的多肽：(a)具有根据SEQ ID NO:1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQ ID NO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽。

Adenovirus polynucleotide and polypeptide

In particular, this provides an isolated polynucleotide, wherein said polypeptide and polynucleotide for encoding selected from the group consisting of: (a) is according to the amino acid sequence SEQ ID NO:1, (b) has the function according to the amino acid sequence of SEQ peptide derivatives ID NO:1, wherein the amino acid sequence of functional derivatives it is in the entire length of ID NO:1 and SEQ has at least 80% amino acid sequence identity, and (c) is according to the amino acid sequence of the NO:3 ID SEQ.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】腺病毒多核苷酸和多肽专利
本专利技术涉及从新颖的黑猩猩腺病毒ChAd155衍生出的分离的多核苷酸和多肽序列，以及涉及包含所述多核苷酸和多肽序列的重组多核苷酸、载体、腺病毒、细胞和组合物。专利技术背景腺病毒已经由于它在多种靶组织中实现高效基因转移的能力和大转基因能力而被广泛地用于基因转移应用。常规地，将腺病毒的E1基因删除并用由选择的启动子、目标基因的cDNA序列和聚腺苷酸信号组成的转基因盒替换，从而产生复制缺陷型重组病毒。重组腺病毒可用在基因治疗中和用作疫苗。基于黑猩猩腺病毒的病毒载体代表了人衍生的Ad载体用于开发基因疫苗的用途的替代。从黑猩猩分离的腺病毒与从人类分离的腺病毒密切相关，如通过它们在人起源的细胞中的有效繁殖所证实的。但是，由于人和黑猩猩腺病毒是近亲，在两个病毒物种之间的血清学交叉反应性是可能的。需要这样的载体：其将分子有效地递送至靶标并使群体中针对选定腺病毒血清型的预先存在的免疫的效应最小化。在人类中观察到的预先存在的免疫的一个方面是体液免疫，其可以导致对腺病毒蛋白特异性的抗体的产生和持续。由腺病毒引起的体液应答主要针对3种主要结构衣壳蛋白：纤突、五邻体和六邻体。本专利技术的载体、组合物和方法可以具有一种或多种相对于现有技术的以下改善特征，包括、但不限于更高的生产力、改善的免疫原性和增加的转基因表达。专利技术概述提供了一种分离的多核苷酸，其中所述多核苷酸编码选自以下的多肽：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。还提供了重组多核苷酸，其包含选自以下的多核苷酸：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。还提供了重组载体，其包含选自以下的多核苷酸：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。还提供了重组腺病毒，其包含至少一种选自以下的多核苷酸或多肽：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。还提供了组合物，其包含以下的至少一种：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(g)包含在上面(a)、(b)或(c)中所述的多核苷酸的载体，和(h)包含在上面(a)、(b)或(c)中所述的多核苷酸的重组腺病毒，和药学上可接受的赋形剂。还提供了细胞，其包含以下的至少一种：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(g)包含在上面(a)、(b)或(c)中所述的多核苷酸的载体，和(h)包含在上面(a)、(b)或(c)中所述的多核苷酸的重组腺病毒，和药学上可接受的赋形剂。还提供了分离的腺病毒多肽，其选自：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。还提供了包含根据SEQIDNO:6的序列的或由其组成的、分离的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞。附图说明图1A-C-来自指示的猿猴腺病毒的纤突（fiber）蛋白序列的比对。ChAd3(SEQIDNO:27)PanAd3(SEQIDNO:28)ChAd17(SEQIDNO:29)ChAd19(SEQIDNO:30)ChAd24(SEQIDNO:31)ChAd155(SEQIDNO:1)ChAd11(SEQIDNO:32)ChAd20(SEQIDNO:33)ChAd31(SEQIDNO:34)PanAd1(SEQIDNO:35)PanAd2(SEQIDNO:36)图2-用于生产特定ChAd155BAC和质粒载体的流程图图3-物种CBAC穿梭物#1365示意图图4-pArsChAd155Ad5E4orf6-2(#1490)示意图图5-pChAd155/RSV示意图图6-BACChAd155/RSV示意图图7-表达HIVGag转基因的ChAd3和ChAd155载体的生产力(实验1)图8-表达HIVGag转基因的ChAd3和ChAd155载体的生产力(实验2)图9-表达RSV转基因的PanAd3和ChAd155载体的生产力图10-表达HIVGag转基因的ChAd3和ChAd155载体的表达水平图11-表达HIVGag转基因的PanAd3和ChAd155载体的表达水平-蛋白质印迹图12-表达HIVGag转基因的ChAd3和ChAd155载体的免疫原本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多核苷酸，其中所述多核苷酸编码选自以下的多肽：(a)具有根据SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQ ID NO: 1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQ ID NO: 3的氨基酸序列的多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.12 EP PCT/EP2015/063248;2015.06.12 GB 15101.一种分离的多核苷酸，其中所述多核苷酸编码选自以下的多肽：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。2.一种重组多核苷酸，其包含选自以下的多核苷酸：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。3.一种重组载体，其包含选自以下的多核苷酸：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。4.一种重组腺病毒，其包含至少一种选自以下的多核苷酸或多肽：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。5.一种组合物，其包含以下的至少一种：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(g)根据权利要求3所述的载体，和(h)根据权利要求4所述的重组腺病毒，和药学上可接受的赋形剂。6.一种细胞，其包含以下的至少一种：(a)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(c)多核苷酸，其编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(d)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(e)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，(f)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽，(g)根据权利要求3所述的载体，和(h)根据权利要求4所述的重组腺病毒。7.一种分离的腺病毒多肽，其选自：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽，(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列，和(c)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。8.根据权利要求1-6中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述多核苷酸编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽。9.根据权利要求8所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述多核苷酸具有根据SEQIDNO:2的序列。10.根据权利要求1-6中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述多核苷酸编码具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。11.根据权利要求10所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少89.0%同一性、诸如至少99.0%同一性、诸如至少99.6%同一性的氨基酸序列。12.根据权利要求1-11中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，还包含编码以下的多核苷酸：(a)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少50.0%同一性的氨基酸序列，或者(a)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列。13.根据权利要求1-11中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，还包含编码以下的多核苷酸：(a)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少50.0%同一性的氨基酸序列，和(a)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列。14.根据权利要求12或13中任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽的功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少70.0%、诸如至少90.0%、诸如至少99%同一性的氨基酸序列。15.根据权利要求12-14中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少70.0%、诸如至少90.0%、诸如至少99%同一性的氨基酸序列。16.根据权利要求1-6中的任一项所述的多核苷酸、载体、腺病毒、组合物或细胞，其中所述多核苷酸编码具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。17.根据权利要求16所述的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述多核苷酸具有根据SEQIDNO:5的多核苷酸序列。18.根据权利要求16或17中的任一项所述的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞，还包含编码以下的多核苷酸：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列或者(a)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列。19.根据权利要求16或17中的任一项所述的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞，还包含编码以下的多核苷酸：(a)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列和(a)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列。20.根据权利要求18或19中的任一项所述的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少70.0%同一性、诸如至少99.0%同一性、诸如至少99.4%同一性的氨基酸序列。21.根据权利要求18-20中的任一项所述的多核苷酸、载体、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少70.0%、诸如至少90.0%、诸如至少99%同一性的氨基酸序列。22.根据权利要求4-7中的任一项所述的多肽、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述多肽具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列。23.根据权利要求4-7中的任一项所述的多肽、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述多肽是具有根据SEQIDNO:1的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。24.根据权利要求23所述的多肽、重组腺病毒、组合物或细胞，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有至少89.0%同一性、诸如至少99.0%同一性、诸如至少99.6%同一性的氨基酸序列。25.根据权利要求22-24中的任一项所述的多肽、重组腺病毒、组合物或细胞，还包含：(a)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少50.0%同一性的氨基酸序列，或者(a)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:5的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:5的氨基酸序列具有至少50%同一性的氨基酸序列。26.根据权利要求22-24中的任一项所述的多肽、重组腺病毒、组合物或细胞，还包含：(a)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽；或(b)具有根据SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽的功能衍生物，其中所述功能衍生物具有在它的整个长度上与SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少50.0%同一...

【专利技术属性】
技术研发人员：V阿门多拉，S科罗卡，R科特斯，F格拉齐奥利，A尼科西亚，A维特利，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE