一种纯化利拉鲁肽的方法技术

本发明专利技术是一种纯化利拉鲁肽的方法，将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；过滤，滤液进行一次HPLC梯度洗脱后用旋转蒸发器水浴除去部分乙腈；得到利拉鲁肽溶液再进行二次HPLC线性洗脱，收取含有利拉鲁肽的馏分；再用旋转蒸发器水浴除去部分乙腈，得到纯化的利拉鲁肽溶液。本发明专利技术方法采儿童反相聚合物色谱填料，可以承受强碱性溶液，且利拉鲁肽一次上样量大，收率高，纯度高。这样可以减少纯化次数，降低损耗，节约成本。二次纯化采儿童八烷基硅烷键合硅胶为固定相与的所选流动相相结合，可一次收到纯度为99%以上的产品。进而有效地解决了利拉鲁肽成品纯度不高，收率低的问题。

A method for purification of liraglutide

The invention relates to a method for purification of liraglutide, the liraglutide crude soluble in acetonitrile aqueous solution by liraglutide crude peptide solution; filtration, filtrate by HPLC gradient elution with rotary evaporator water bath to remove part of acetonitrile; then two HPLC linear elute solution for liraglutide, containing liraglutide the fraction with a rotary evaporator; water bath to remove part of acetonitrile, purified by liraglutide solution. The method of the invention adopted children reversed-phase chromatographic filler polymer, can withstand strong alkaline solution, and liraglutide once large samples, high yield, high purity. This can reduce the number of purification, reduce loss and save cost. The two purification and extraction of eight alkyl silane bonded silica gel was used to combine the stationary phase with the selected mobile phase, and the purity of the product was more than 99% at a time. To effectively solve the liraglutide product purity is not high, the problem of low yield.

【技术实现步骤摘要】
一种纯化利拉鲁肽的方法
本专利技术涉及一种多肽化合物的纯化方法，特别涉及一种纯化利拉鲁肽的方法。
技术介绍
利拉鲁肽，英文名：Liraglutide。肽序列为：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(Pal-g-Glu)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH利拉鲁肽由丹麦诺和诺德公司开发的第一个长效GLP-1类似物，与人胰高糖素样肽-1（GLP-1）同源性达97%。利拉鲁肽具有降低血糖，促进胰岛细胞再生，轻微延长胃排空等多种作用，应用前景广泛。糖尿病（DiabetesMellitus，DM）是一种全球性的高发病，据世界卫生组织公布的数据显示：1994年糖尿病患者人数为1.20亿,1997年为1.35亿,2000年为1.75亿,2010年为2.39亿，2025年将突破3亿,到2035年这一数字将接近6亿。糖尿病涉及全身各个系统，严重影响人们的劳动能力，并威胁人的生命安全。利拉鲁肽是一种长效治疗Ⅱ型糖尿病的胰高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于：将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；过滤，滤液以反相聚合物色谱填料为固定相、盐酸和乙腈为流动相进行HPLC线性梯度洗脱；取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到利拉鲁肽一次纯化溶液；取利拉鲁肽一次纯化溶液，以八烷基硅烷键合硅胶为固定相、磷酸和乙腈为流动相进行HPLC线性洗脱，收取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到纯化的利拉鲁肽溶液。

【技术特征摘要】
1.一种纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于：将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；过滤，滤液以反相聚合物色谱填料为固定相、盐酸和乙腈为流动相进行HPLC线性梯度洗脱；取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到利拉鲁肽一次纯化溶液；取利拉鲁肽一次纯化溶液，以八烷基硅烷键合硅胶为固定相、磷酸和乙腈为流动相进行HPLC线性洗脱，收取含有利拉鲁肽的馏分；旋蒸除去部分乙腈，得到纯化的利拉鲁肽溶液。2.根据权利要求1所述的纯化利拉鲁肽的方法，其特征在于，其具体步骤如下：（1）将利拉鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到利拉鲁肽粗肽水溶液；（2）取利拉鲁肽水溶液用0.22um滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用；（3）取滤液，以反相聚合物色谱填料为固定相，检测波长为230nm进行HPLC线性梯度洗脱，流动相A...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖英，周金玉，周奕，王蔡典，玄其存，李杰，赵呈青，
申请(专利权)人：江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32