一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种测定脂肪乳药物包封率的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；(3)收集洗脱得到的脂肪乳，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物的含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物的用量计算脂肪乳制剂的药物包封率。本发明专利技术的方法解决了现有技术中存在的脂质乳滴与游离药物分离度差、测定结果偏大的问题。该方法准确度高，重复性好，可用于前列地尔等结构中含阴离子(即COO

【技术实现步骤摘要】
一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法及其应用
本专利技术属于药物分析
，具体地涉及一种用于测定脂肪乳制剂药物包封率的方法以及该方法在分离被包封的脂肪乳药物与未被包封的脂肪乳药物中的应用。
技术介绍
目前测定脂肪乳制剂包封率的方法主要有以下几种：第一种方法是采用超滤离心法测定脂肪乳制剂的包封率，利用超滤膜截留乳滴，从而离心出水相。实验时尝试采用赛多利斯和波尔的超滤管(3K、5K、10K)测定前列地尔脂肪乳注射液(其化学结构如下所示)的包封率。但是实际中发现，不同的滤膜对前列地尔均有不同程度的吸附作用，也就是说，采用该方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率会导致测定结果偏大。前列地尔的化学结构式如下所示：第二种方法是采用透析法测定脂肪乳制剂的包封率。该方法可以处理较大量的样品，但需要较大量的透析液和较长的时间，并且需要不断地更换透析液。此外，该方法不适用于难溶于水的药物。专利技术人曾采用该方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率，但由于该药规格(5μg/ml)较小，且微溶于水，需要使用大量的水将游离药物透析出来，之后再测定游离药物的浓度。由于对游离药物的稀释量很大，因此在采用这种间接的方法测定包封率时存在一定的限制，其透析液中的前列地尔的浓度达不到液相测定的检测限。第三种方法是采用葡聚糖微型凝胶柱测定载药脂质体的包封率。通过先去除葡聚糖微型凝胶柱中的水，再将载药脂肪乳加载到葡聚糖微型凝胶柱上，离心洗脱脂质体；然后分别测定载药脂肪乳中药物的总含量浓度及葡聚糖微型凝胶柱洗脱后被包封的药物的含量浓度，将葡聚糖微柱洗脱后被包封的药物的含量浓度除以脂肪乳中药物的总含量浓度得到载药脂质体的包封率。专利技术人也曾尝试采用这种方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率，但是做该方法的方法学验证时，发现当采用游离的前列地尔上样时，游离的前列地尔也被洗脱下来，也就是说，脂质乳滴与游离药物分离度较差，这样会造成包封率的测定结果不准确。
技术实现思路
针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法，该方法包括以下步骤：(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；(3)收集洗脱得到的脂肪乳滴，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物用量计算脂肪乳制剂中的药物包封率。计算公式：优选地，在上述步骤(1)中，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE琼脂糖凝胶FF。优选地，在上述步骤(1)中，所述脱水为离心脱水或真空抽吸脱水。优选地，在上述步骤(2)中，所述含阴离子的药物为含羧基的药物；更优选地，所述含阴离子的药物的脂肪乳制剂为前列地尔注射液。优选地，在上述步骤(2)中，加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积为柱体积的1％-100％，优选为15％-25％。加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积过大会导致弱碱性阴离子交换树脂过载，未被包封的药物也被洗脱下来，影响分离和测定效果。优选地，在上述步骤(2)中，所述洗脱为离心洗脱或加压洗脱。更优选地，所述离心洗脱的条件为先以500-3000rpm的速度离心1-10分钟，然后用水进行二次洗脱；再优选地，所述离心洗脱的条件为先以800-2000rpm的速度离心2-8分钟，然后用水进行二次洗脱；进一步优选地，所述二次洗脱为离心洗脱或加压洗脱；再进一步优选地，所述二次洗脱进行1-20次，每次用水量为柱体积的1-200％，优选为10-50％。二次洗脱的次数不宜过多，否则除了导致柱管中包封有药物的脂肪乳被洗脱下来以外，还会导致未被包封的药物也被洗脱下来，影响包封率测定的准确性。本专利技术的方法采用弱碱性阴离子交换树脂柱测定脂肪乳制剂的药物包封率，该方法适用于化学结构中含有阴离子(例如羧基COO-等)的药物，例如前列地尔。以前列地尔注射液为例，该方法采用的DEAE(二乙氨基乙基)弱碱性阴离子交换树脂可完全吸附前列地尔脂肪乳中游离的前列地尔，而被包裹的前列地尔可以被水快速洗脱下来，实现游离前列地尔与包裹前列地尔的脂质乳滴完全分离，从而进行药物包封率的准确测定。本专利技术的方法解决了现有技术中存在的脂质乳滴与游离药物分离度差、测定结果偏大的问题。该方法准确度高，重复性好，可用于前列地尔等结构中含有阴离子的药物的脂肪乳制剂的处方工艺研究和质量控制。本专利技术还提供一种将含阴离子的药物的脂肪乳制剂中被包封的药物与未被包封的药物分离的方法，该方法包括以下步骤：(a)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(b)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱，收集洗脱得到的脂肪乳滴。优选地，在上述步骤(a)中，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE弱碱性阴离子交换树脂；更优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE琼脂糖凝胶FF。优选地，在上述步骤(a)中，所述脱水为离心脱水或真空抽吸脱水。优选地，在上述步骤(b)中，所述含阴离子的药物为含羧基的药物；更优选地，所述含阴离子的药物的脂肪乳制剂为前列地尔注射液。优选地，在上述步骤(b)中，加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积为柱体积的1％-100％，优选为15％-25％。优选地，在上述步骤(b)中，所述洗脱为离心洗脱或加压洗脱。更优选地，所述离心洗脱的条件为先以500-3000rpm的速度离心1-10分钟，然后用水进行二次洗脱；再优选地，所述离心洗脱的条件为先以800-2000rpm的速度离心2-8分钟，然后用水进行二次洗脱；进一步优选地，所述二次洗脱为离心洗脱或加压洗脱；再进一步优选地，所述二次洗脱进行1-20次，每次用水量为柱体积的1-200％，优选为10-50％。二次洗脱的次数不宜过多，否则除了导致柱管中包封有药物的脂肪乳被洗脱下来以外，还会导致未被包封的药物也被洗脱下来，从而影响分离的效果。优选地，本专利技术将含阴离子的药物的脂肪乳制剂中被包封的药物与未被包封的药物分离的方法还包括在步骤(b)之后，将柱管内未被包封的药物洗脱。本专利技术还提供弱碱性阴离子交换树脂在测定脂肪乳药物制剂包封率中的应用。优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂是DEAE弱碱性阴离子交换树脂；更优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE琼脂糖凝胶FF。本专利技术还提供弱碱性阴离子交换树脂在分离含阴离子的药物的脂肪乳制剂中被包封的药物与未被包封的药物中的应用。优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂是DEAE弱碱性阴离子交换树脂；更优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE琼脂糖凝胶FF。具体实施方式下面通过具体的实施例对本专利技术进行更详细的说明。应当理解，虽然仅列出针对前列地尔注射液的实施例，但是鉴于弱碱性阴离子交换树脂本身的性质，本专利技术的方法也适用于其他含阴离子的药物的脂肪乳制剂。实施例1(1)将DEAE弱碱性阴离子交换树脂填充于5ml注射器套管内，离心脱水，形成5ml的干柱；(2)将前列地尔注射液1ml加载到注射器套管内，以1200rpm的离心速度离心3分钟；(3)每次用1ml的水离心洗脱，共洗脱7次；将洗脱下来的乳滴收集到10ml量瓶中并定容，测定得到被包封药物的含量。将前列地尔注射液稀释至过柱后的理论浓度，同法测定，然后计算前列地尔注射液的包封率。平行试验三次，结果如下：实施例2(1)将DEAE弱碱性阴本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；(3)收集洗脱得到的脂肪乳，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物的含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物的用量计算脂肪乳制剂的药物包封率；优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE弱碱性阴离子交换树脂，更优选为DEAE琼脂糖凝胶FF；优选地，在步骤(1)中，所述脱水为离心脱水或真空抽吸脱水；优选地，在步骤(2)中，所述含阴离子的药物的脂肪乳制剂为前列地尔注射液；优选地，在步骤(2)中，加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积为柱体积的1％‑100％，优选为15％‑25％。

【技术特征摘要】
1.一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；(3)收集洗脱得到的脂肪乳，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物的含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物的用量计算脂肪乳制剂的药物包封率；优选地，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE弱碱性阴离子交换树脂，更优选为DEAE琼脂糖凝胶FF；优选地，在步骤(1)中，所述脱水为离心脱水或真空抽吸脱水；优选地，在步骤(2)中，所述含阴离子的药物的脂肪乳制剂为前列地尔注射液；优选地，在步骤(2)中，加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积为柱体积的1％-100％，优选为15％-25％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述洗脱为离心洗脱或加压洗脱。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述离心洗脱的条件为先以500-3000rpm的速度离心1-10分钟，然后用水进行二次洗脱；更优选地，所述离心洗脱的条件为先以800-2000rpm的速度离心2-8分钟，然后用水进行二次洗脱。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述二次洗脱为离心洗脱或加压洗脱；优选地，所述二次洗脱进行1-20次，每次用水量为柱体积的1-200％，更优选为10-50％。5.一种将被含阴离子的药物的脂肪乳制剂中被包封的药物与未被包封的药物分离的方法，该方法包括以下步骤：(a)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(b)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱，收集洗脱得到的脂肪乳滴；优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛雁，石健丽，刘宏大，齐琰，王宏英，丁忠福，李萍，石皎，孙东，
申请(专利权)人：辽宁远大诺康生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21