基于组织培养的换锦花快速繁育方法技术

本发明专利技术涉及一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，包括以下步骤：(1)配制小球诱导培养基、不定芽增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基，(2)换锦花的组织培养。与现有技术相比，本发明专利技术通过组织培养技术，年繁殖系数提高到1:100000，成本减低0.3‑0.5元/株，由于球茎植物埋于土中，易污染，组培难度较大，换锦花组培苗极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。

Rapid breeding method of brocade flower based on tissue culture

The invention relates to a method for the rapid breeding of flower brocade based on tissue culture, which comprises the following steps: (1) preparation of small induction medium, adventitious bud proliferation medium, seedling medium, rooting medium, (2) the organization culture of l.sprengeri. Compared with the prior art, the invention by tissue culture technology, breeding coefficient increased to 1:100000, reduce the cost of 0.3 yuan / 0.5 lines, because the bulbs buried in the soil, pollution, tissue culture is difficult, l.sprengeri plantlets greatly improve the reproduction rate and seedling uniformity, better maintain the original female traits the.

【技术实现步骤摘要】
基于组织培养的换锦花快速繁育方法
本专利技术涉及一种植物繁育方法，尤其是涉及一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法。
技术介绍
换锦花为石蒜科石蒜属植物，草本，地生。鳞茎卵形，早春出叶，叶带状。花茎高约60厘米；总苞片2枚。伞形花序，有花4-6朵，淡紫红色。花期8-9月。换锦花栽培容易，在自然状态下，换锦花结籽少，且发芽率极低，所以一般用无性繁殖方法进行扩繁。园林中多丛植或于花境、路旁栽植、树林下。换锦花耐半荫，又可做疏林地被植物，是良好的花镜与庭院材料。作为夏季开花的耐荫植物品种，其分球慢，市场需求量大，种苗供应受限制。中国专利CN103503647A公布了一种换锦花花期调控的方法，可作为换锦花盆栽或切花等功能开发应用的配套技术及科学研究之用。具体步骤包括：(1)、换锦花种球储藏的时间；(2)、换锦花种球储藏的条件；(3)、换锦花种球储藏的方式；(4)、换锦花催花的时间；(5)、换锦花催花的方法。采用低温冷藏高温催花的方式进行换锦花的花期调控，不需要施用任何生长调节剂，其方法简便易行，不仅不受外界环境条件的影响；亦可采用冷库冷藏和温室催花相结合的方式进行大量的生产实践。获得的换锦花开花植物可用于盆栽观赏或切花。该专利公开了换锦花花期调控的方法，但是并没有给出如何繁育换锦花的相关技术。中国专利CN103734019A公布了一种新西兰麻的组织培养方法，该方法包配制不同阶段的培养基来进行组织培养，可以提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状等优点。但是由于新西兰麻与换锦花习性以及所需繁育环境差别较大，上述组织培养方法不能直接用于换锦花的繁育过程。专利技术内容本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种繁育速度快、成活率高的基于组织培养的换锦花快速繁育方法。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、小球诱导培养基：MS+BA1-5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6-BA0.5-1.5mg/L+NAA0.05-0.15mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA0.1-0.3mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25±1℃，光照为1400-1600Lx；(2)换锦花的组织培养：2.1、无菌材料的获得换锦花在秋季10-11月挖取地上部分的小球，剥去外面的鳞茎用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5-6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小球基部切成1cm长，接种于小球诱导培养基上；2.2、芽的分化和增殖小球接种于诱导培养基上30天后，小球基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带球愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；2.3、不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3小球可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单球后，放入壮苗培养基，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；2.4、生根培养取1-2cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至1-2cm；2.5、炼苗与移栽生根培养28-32天后，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化炼苗40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95％以上。作为优选，所述的小球诱导培养基的组分和含量为：MS+BA3mg/L+NAA0.3mg/L，该培养基下小球长势最好。作为优选，所述的不定芽增殖培养基的组分和含量为：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。作为优选，所述的壮苗培养基的组分和含量为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。作为优选，所述的生根培养基的组分和含量为：MS+NAA0.2mg/L，该培养基下，根系粗壮，须根众多，生根率为100％。由于不同植株对于培养条件要求不同，尤其是对于培养基的要求差别很大，其中一个环节的培养基主要成分或含量的改变就有可能导致繁育成功率的大大降低。因此，本专利技术通过长久的实验过程，并根据换锦花的特有植物生长属性与生长需求，研究了适合换锦花快速繁育的多种培养基，在使用这些特殊研制的培养基基础上，结合本专利技术的培养条件，成功培育了换锦花。本专利技术通过组织培养技术，年繁殖系数提高到1:100000，成本减低0.3-0.5元/株，由于球茎植物埋于土中，易污染，组培难度较大，换锦花组培苗极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、小球诱导培养基：MS+BA3mg/L+NAA0.3mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA0.2mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25℃，光照为1500Lx；(2)换锦花的组织培养：2.1、无菌材料的获得换锦花在秋季10-11月挖取地上部分的小球，剥去外面的鳞茎用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5-6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小球基部切成1cm长，接种于小球诱导培养基上；2.2、芽的分化和增殖小球接种于诱导培养基上30天后，小球基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带球愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；2.3、不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3小球可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单球后，放入壮苗培养基，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；2.4、生根培养取1-2cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至1-2cm；2.5、炼苗与移栽生根培养30天后，根系长至1.5cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化炼苗40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为98％。实施例2一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、小球诱导培养基：MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA0.1mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为24℃，光照为1400Lx；(2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、小球诱导培养基：MS+BA 1‑5mg/L+NAA 0.1‑0.5mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6‑BA 1.0‑3.0mg/L+NAA 0.1‑0.3mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6‑BA 0.5‑1.5mg/L+NAA 0.05‑0.15mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA 0.1‑0.3mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25±1℃，光照为1400‑1600Lx；(2)换锦花的组织培养：2.1、无菌材料的获得换锦花在秋季10‑11月挖取地上部分的小球，剥去外面的鳞茎用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5‑6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小球基部切成1cm长，接种于小球诱导培养基上；2.2、芽的分化和增殖小球接种于诱导培养基上30天后，小球基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带球愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；2.3、不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2‑3小球可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单球后，放入壮苗培养基，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2‑3cm；2.4、生根培养取1‑2cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至1‑2cm；2.5、炼苗与移栽生根培养28‑32天后，根系长至1‑2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化炼苗40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95％以上。...

【技术特征摘要】
1.一种基于组织培养的换锦花快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1.1、小球诱导培养基：MS+BA1-5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L；1.2、不定芽增殖培养基：MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L；1.3、壮苗培养基：MS+6-BA0.5-1.5mg/L+NAA0.05-0.15mg/L；1.4、生根培养基：MS+NAA0.1-0.3mg/L；上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25±1℃，光照为1400-1600Lx；(2)换锦花的组织培养：2.1、无菌材料的获得换锦花在秋季10-11月挖取地上部分的小球，剥去外面的鳞茎用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5-6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小球基部切成1cm长，接种于小球诱导培养基上；2.2、芽的分化和增殖小球接种于诱导培养基上30天后，小球基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带球愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；2.3、不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建华，黄建荣，金梦怡，李霖，庞玉华，
申请(专利权)人：上海上房园艺有限公司，上海上房园林植物研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31