具有高度延伸专一性的DNA低温循环延伸反应方法技术

技术编号:1758819 阅读:340 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供一种具有高度延伸专一性的DNA低温循环延伸反应的方法,该方法采用低温DNA扩增体系,使用短于25bp的引物得到有用的特异性产物,供测序或其他分析之需,本发明专利技术可用于大规模高保真PCR和自动荧光DNA循环测序反应。(*该技术在2021年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种延伸专一性的DNA低温循环延伸方法包括a.在反应体系中含有低浓度的甘油或乙二醇,存在有一种模板,一对长度短于或长于25bp的引物和一种野生型或修饰后的中等热稳定DNA聚合酶的即用型反应混合物,当温度在变性温度(~70℃)和退火温度( 约37℃)之间循环时DNA聚合酶能重复延伸引物,得到序列特异性扩增产物;b.扩增双链DNA片断直接用于循环测序反应,该循环测序反应包括加入大大过量引物、四种标准荧光标记的ddNTP终止物、一种中等热稳定的DNA聚合酶、适量四种ddNTP 混合物及含有15%(V/V)甘油的缓冲体系,在80℃以下重复环引物延伸反应若干次,得荧光标记ddNTP终止的不同...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:洪国藩杨永杰朱嘉
申请(专利权)人:香港科技创业股份有限公司
类型:发明
国别省市:HK[中国|香港]

相关技术
    暂无相关专利
网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1