使用非标准碱基的固相支持体分析系统和方法技术方案

技术编号:1756040 阅读:244 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
描述了使用非标准碱基的固相支持体分析系统,捕获寡聚核苷酸包括一分子识别标记序列,捕获寡聚核苷酸连接于固相支持体上,它与靶寡聚核苷酸固相支持体杂交。在一些例子中,分子识别序列包括一个或多个非标准碱基,并杂交于互补的靶寡聚核苷酸的标记序列。在一些例子中,在分析中使用一些非标准碱基(如,通过PCR或连接)掺入法。(*该技术在2021年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
对于寡聚核苷酸,包括DNA和RNA片段,已经发展了多种各式各样不同的分析方法,这些方法通常可以直接检测出样品中是否包括具有特定靶寡聚核苷酸序列的寡聚核苷酸。在某些情况下,许多等位基因序列,寡聚核苷酸序列的不同仅仅是几个核苷酸的不同。单核苷酸多态性(SNPs)指的是等位基因单个核苷酸的不同。至少在某种情况下,即使单个核苷酸的不同也引起相应的遗传响应或性状的改变。相应的,为了检测样品中存在何种等位基因,该检测技术必须有足够的灵敏度以区分密切相关的序列。许多分析技术包括多个成分,在分析测试中每种成分将和其他成分相杂交。分析测试中成分之间的非特异杂交(即两条非互补序列的杂交)产生高的杂交背景。比如,非常相似但并不完全一致的两条序列不能形成完全互补的双链,其中在两条单链的碱基不互补的位置碱基配对间断。当两条相似序列的成分互相杂交,正如上面的情况所述,很多的等位基因序列,特别是含有SNP的等位基因序列,会使非特异性杂交增加。因此,从方法上减少非特异的杂交,或者在分析中减少非特异杂交的影响,对例如测定样品中存在哪种等位基因的杂交分析是很有裨益的。专利技术概述总的来说,本专利技术涉及分析寡聚核本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分析样品中靶寡聚核苷酸的方法,该方法包括如下步骤:(a)在靶寡聚核苷酸与捕获寡聚核苷酸的适当杂交条件下,至少一种捕获寡聚核苷酸与样品相接触,捕获寡聚核苷酸包含一种分子识别序列,该分子识别序列至少含有一种非标准碱基,捕获寡聚核苷酸 与支持体偶联,靶寡聚核苷酸包含一个互补于捕获寡聚核苷酸的分子识别序列的标记序列和被分析物特异序列或被分析物特异序列的互补序列;和(b)检测靶寡聚核苷酸和捕获寡聚核苷酸的杂交。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:JK格雷尼尔DJ马沙尔JR普鲁登特CS里奇蒙EB雷施CW舍雷尔CB舍里尔JL普塔钦
申请(专利权)人:伊拉根生物科学公司
类型:发明
国别省市:US[美国]

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