筛选抗乳腺癌转移化合物的方法及相关化合物的应用技术

本发明专利技术提供了一种利用肿瘤转移基因谱筛选抗乳腺癌转移化合物的方法，包括从以下18个基因MMP1、FSCN1、PTGS2、EREG、ANGPTL4、VCAM1、CXCR4、CXCL1、RARRES3、ID1、TNC、LY6E、LTBP1、C10orf116、KRTHB1、KYNU、MAN1A1和NEDD9中随机选择至少一个基因；然后设计探针、选择使得转移后乳腺癌细胞中这些转移基因表达水平向原位癌细胞，或正常细胞转变的化合物。通过本发明专利技术的方法选择了20种化合物，通过细胞学和动物水平实验证明这些化合物或者其组合都在不同程度地表现了抗乳腺癌转移的活性。

The method of screening the metastatic compounds of breast cancer and the application of related compounds

The present invention provides a method for screening compound gene transfer spectrum against breast cancer with tumor metastasis, including randomly selected from the following 18 genes MMP1, FSCN1, PTGS2, EREG, ANGPTL4, VCAM1, CXCR4, CXCL1, RARRES3, ID1, TNC, LY6E, LTBP1, C10orf116, KRTHB1, KYNU, MAN1A1 and NEDD9 at least one gene; then, choose the level to design the probe in situ expression of these cancer cells metastasis after gene transfer in breast cancer cells and normal cells or compound transformation. The 20 compounds were selected through the method of the invention, which proved that these compounds or their combinations showed the activity of anti breast cancer metastasis by cytological and animal level experiments.

【技术实现步骤摘要】
筛选抗乳腺癌转移化合物的方法及相关化合物的应用
本专利技术涉及药物领域，特别涉及筛选抗乳腺癌转移化合物的方法及相关化合物的应用。
技术介绍
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，每年全世界约有130万人被诊断为乳腺癌，而约有40万人死于该病。近20年来，我国乳腺癌的发病率呈逐年上升趋势，已位居女性恶性肿瘤发病率之首，严重危害广大妇女的健康。转移是肿瘤恶性生物学的特征之一，也是肿瘤治疗失败和患者死亡的主要原因。肿瘤转移是一个多步骤、多因素参与的复杂生物学过程，这一过程包括多个步骤，包括：1.肿瘤细胞增殖并从原发部位脱落；2.穿破脉管进入血管或淋巴管；3.在循环中逃脱血小板及宿主免疫活性细胞的作用而生存；4.通过与血管或淋巴内皮以及内皮下基底膜作用停留远处并外渗出脉管；5.侵入周围组织；6.在继发部位生长。肿瘤细胞的转移需要经过漫长的行程和诸多生物学应变阶段才能实现，在整个过程中只要任何一个阶段受到阻碍，转移都不能形成。但是干预转移的哪一步骤，及如何阻断，至今没有很好的解决方案。目前没有抗乳腺癌转移的特效药物出现，部分原因在于没有合适的高通量药物发现模型。在细胞水平，细胞划痕模型，Trans本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用转移基因谱筛选抗乳腺癌转移化合物的方法：步骤1.从以下18个基因MMP1、FSCN1、PTGS2、EREG、ANGPTL4、VCAM1、CXCR4、CXCL1、RARRES3、ID1、TNC、LY6E、LTBP1、C10orf116、KRTHB1、KYNU、MAN1A1和NEDD9中随机选择至少一个基因；步骤2.设计检测上述选择基因的探针；步骤3.选择乳腺癌细胞系；步骤4.用待筛选的化合物处理选择的乳腺癌细胞，确定待筛选的化合物对于上述选择基因的表达的影响；和步骤5.选择使得转移后乳腺癌细胞中这些转移基因表达水平向原位癌细胞，或正常细胞转变的化合物。

【技术特征摘要】
1.一种利用转移基因谱筛选抗乳腺癌转移化合物的方法：步骤1.从以下18个基因MMP1、FSCN1、PTGS2、EREG、ANGPTL4、VCAM1、CXCR4、CXCL1、RARRES3、ID1、TNC、LY6E、LTBP1、C10orf116、KRTHB1、KYNU、MAN1A1和NEDD9中随机选择至少一个基因；步骤2.设计检测上述选择基因的探针；步骤3.选择乳腺癌细胞系；步骤4.用待筛选的化合物处理选择的乳腺癌细胞，确定待筛选的化合物对于上述选择基因的表达的影响；和步骤5.选择使得转移后乳腺癌细胞中这些转移基因表达水平向原位癌细胞，或正常细胞转变的化合物。2.根据权利要求1的所述方法，所述步骤2中的乳腺癌细胞系选自以下中的一个或多个：BT-20，HCC38，HCC1143，Hs578T，MDA-MB-231，MDA-MB-157，MDA-MB-436，MDA-MB-453，和HCC1937。3.根据权利要求1的所述方法，所述步骤4包括：a.化合物处理细胞；b.裂解用化合物处理的细胞；c.用步骤2的探针与靶标基因mRNA结合；d.富集靶标基因mRNA；e.探针的DNA连接；f.洗脱连接探针产物；g.连接探针产物的线性扩增；和h.二代测序，确定所选择基因的mRNA表达水平；在a-h步骤中，c和d的先后顺序可互换。4.根据权利要求1的所述方法，所述步骤1中选择以下13个基因：EREG、CXCR4、CXCL1、MAN1A1、LTBP1、FSCN1、MMP1、ID1、TNC、ANGPTL4、PTGS2、LY6E和RARRES3。5.根据权利要求4的所述方法，检测上述13个基因探针如下：检测每个基因的探针包括供体探针和受体探针，检测与乳腺癌肺转移相关13个基因的供体探针序列；和检测与乳腺癌肺转移相关13个基因的受体探针序列6.根据权利要求1-5任一所述方法所选择的化合物或其药用盐在制备用于治疗乳腺癌转移的药物中的应用。7.根据权利要求6的所述应用，所述化合物选自以下的一种或多种：硫链丝菌素，4α-12-O-十四碳酰基佛波醇13-乙酸酯，托吡卡胺，Β-赤霉醇，(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯，N'-[4-[4-[2-[3-[(二甲基氨基)甲基]苯基]-1H-吡咯并[2,3-B]吡啶-4-基]-1-乙基-1H-吡唑-3-基]苯基]...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵伟，李莎莎，王栋，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：北京,11