止血防粘连膜及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种止血防粘连膜，包括胶原蛋白和透明质酸钠。本发明专利技术还提供了止血防粘连膜的制备方法，包括：将胶原蛋白冻干粉与透明质酸钠混合均匀，得到混合物；向混合物中加入交联剂进行交联反应，得到共混溶液；将共混溶液干燥、压制成膜片并灭菌。本发明专利技术的止血防粘连膜同时具有止血和防粘连双重效果，无免疫原性，无动物源性传染病风险，吸水性强，止血氨基酸序列含量高，可体内完全降解。

Hemostasis and anti adhesion membrane and its preparation method

The invention provides a hemostat and anti adhesion membrane, including collagen and sodium hyaluronate. The invention also provides a method for preparing hemostasis, anti adhesion membrane including: collagen freeze-dried powder mixed with sodium hyaluronate to get uniform mixture; adding cross-linking agent to the mixture obtained by the crosslinking reaction of blend solution; the blend solution, drying and sterilization of diaphragm pressing. The hemostatic and anti adhesion membrane of the invention has the double effects of stopping bleeding and preventing adhesion. It has no immunogenicity, no risk of animal origin infectious diseases, strong water absorption, high content of amino acid sequence of hemostasis, and can completely degrade in vivo.

【技术实现步骤摘要】
止血防粘连膜及其制备方法
本专利技术属于医疗外科
，具体地，本专利技术涉及一种可生物降解的止血防粘连膜及其制备方法。
技术介绍
在医疗领域中，止血材料及产品在临床中应用十分广泛，特别是外科科室中，相当数量的外伤死亡患者都是由于急性出血过多造成，所以快速止血，有效控制失血量是挽救生命的关键，在许多手术过程中，对于各种创面的出血点控制，也是减少并发症，提高手术成功的重要因素。外科手术中除了出血控制，另外一个值得关注的问题即是术后粘连问题，作为术后严重并发症之一，术后粘连给患者带来很大痛苦和折磨。因此一种具有超强止血作用及良好防粘连功效的产品是外科领域亟待需要的临床产品之一。申请号为201410532551.2的中国专利技术专利申请公开了一种具有止血作用的微纤维胶原海绵，具有较强的吸水能力，止血效果良好，但采用热交联对蛋白结构有一定影响，同时存在动物源性风险，且不具有防粘连作用。申请号为201410020527.0的中国专利技术专利申请公开了一种防粘连的可降解高分子材料，该产品主要是将透明质酸钠交联，提高耐降解度，同时与水性壳聚糖混合，用于预防术后粘连，具有一定的抑菌效果。所述的壳聚糖为动物源提取，具有致敏及免疫原性风险。申请号为200910107412.4的中国专利技术专利申请公开了一种水溶性止血材料，主要成分为氧化再生纤维素醚，止血效果显著，但存在强度不足的问题，且体内难以降解，吸收后可能沉积在人体其它器官中。申请号为201310380614.2的中国专利技术专利申请公开了一种防粘连止血膜，主要成分为右旋糖酐，交联后采用静电纺丝技术制备，生产工艺相对复杂，成本较高，且未对产品的交联剂残留及产品生物相容性进行研究。上述文献中公开的材料都存在一定的不足，无法同时具备止血、防粘连、可生物降解并且生物相容性及组织粘附性良好的特性，不能很好的满足当前外科领域的需求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷，提供了一种可生物降解的止血防粘连膜及其制备方法。一方面，本专利技术提供了一种止血防粘连膜，包括胶原蛋白和透明质酸钠，其中，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10:(1-5)。前述的止血防粘连膜，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10:2.5。前述的止血防粘连膜，所述胶原蛋白是重组人源胶原蛋白。前述的止血防粘连膜，所述重组人源胶原蛋白的分子量是35-95Kda，优选是70Kda。前述的止血防粘连膜，所述透明质酸钠是医药级透明质酸钠。前述的止血防粘连膜，所述医药级透明质酸钠的分子量是100-300Kda，优选是180Kda。另一方面，本专利技术提供了前述的止血防粘连膜的制备方法，包括：(1)将胶原蛋白冻干粉与透明质酸钠按照重量比是10:(1-5)混合均匀，得到混合物；(2)向步骤(1)得到的混合物中加入交联剂进行交联反应，得到共混溶液；(3)将步骤(2)得到的共混溶液干燥、压制成膜片并灭菌。前述的制备方法，所述交联剂浓度为0.01mol/L-0.1mol/L。前述的制备方法，所述交联反应在0-37℃(优选4℃)进行4-12小时(优选5-10小时)。前述的制备方法，所述交联剂是戊二醛、1,4丁二醇二缩水甘油醚、碳化二亚胺、二乙烯基砜、京尼平中的任意一种或多种。前述的制备方法，步骤(2)包括：按照浓度0.01mol/L-0.05mol/L向步骤(1)得到的混合物中加入第一交联剂，在0-37℃(优选4℃-25℃)进行第一次交联反应1-8小时(优选2-4小时)，随后按照浓度0.01mol/L-0.1mol/L加入第二交联剂，在0-37℃(优选4℃-20℃)进行第二次交联反应2-12小时(优选4-6小时)。前述的制备方法，所述第一交联剂和所述第二交联剂分别是戊二醛、1,4丁二醇二缩水甘油醚、碳化二亚胺、二乙烯基砜、京尼平中的任意一种或多种。前述的制备方法，步骤(2)中交联反应结束之后的交联强度为0.5％-10％。前述的制备方法，步骤(3)中，灭菌采用低温辐照灭菌，其中，温度是-20～-10℃，辐照剂量是15～20kGy。相对于现有技术，本专利技术的止血防粘连膜及其制备方法具有如下有益效果：(1)本专利技术采用的胶原蛋白是以基因工程的方法通过微生物发酵获得的重组人源胶原蛋白，其纯度高，无免疫原性，无动物源性传染病风险，吸水性强，止血氨基酸序列含量高，可体内完全降解。(2)重组人源胶原蛋白与医药级透明质酸钠共混制成，具有优良的生物相容性，同时具有止血和防粘连双重效果，对于腹内手术的止血及术后防粘连具有重要的临床意义。(3)本专利技术通过轻度交联，有效降低交联剂残留，保证产品生物相容性。经交联后，既保证产品具有良好的吸水凝胶性及组织粘附性以保证止血效果；同时通过轻度交联控制的体内降解速率可确保1-2周的粘连高发期产品良好保留，起预防粘连的作用，低度交联也避免了材料体内残留过久可能引起的炎症、排异性等风险。(4)采用低温环境辐照，既可以保证产品的无菌水平(SAL≤10-6)，也可防止胶原及多糖结构损坏。具体实施方式为了充分了解本专利技术的目的、特征及功效，通过下述具体实施方式，对本专利技术作详细说明。本专利技术的工艺方法除下述内容外，其余均采用本领域的常规方法或装置。除非另有说明，否则本专利技术中涉及的术语均具有本领域技术人员通常理解的含义。第一方面，本专利技术提供了一种止血防粘连膜，包括胶原蛋白和透明质酸钠，其中，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10:(1-5)，且优选是10:2.5。其中，本专利技术采用的胶原蛋白优选是采用微生物发酵法获得的重组人源胶原蛋白，例如，将人胶原蛋白序列利用基因工程技术，连接表达载体，转化毕赤酵母，筛选高表达毕赤酵母工程菌进行发酵生产，并经一系列纯化工艺后，无菌过滤冷冻干燥得到。具体可参考申请号为201610388271.8、名称为“一种重组人源胶原蛋白及其编码基因和制备方法”的专利技术专利申请，该专利申请通过引用的方式整体并入本申请中。这种重组人源胶原蛋白的纯度高，无免疫原性，无动物源性传染病风险，吸水性强，止血氨基酸序列含量高，可体内完全降解。优选地，该重组人源胶原蛋白的分子量是35Kda-95Kda，并且更优选是70Kda。其中，透明质酸钠优选是医药级透明质酸钠，其不同于化工级别，是一种安全性极高的高分子物质，对人体无毒、无副作用且具有良好的生物相容性，其中所谓医药级(或称作医用)是根据《中国药典》2015年版标准来界定的，本专利技术采用的医药级透明质酸钠通常为常规市购获得。优选地，该医药级透明质酸钠的分子量是100Kda-300Kda，并且更优选是180Kda。专利技术人通过研究出乎意料地发现，将分子量为35Kda-95Kda的重组人源胶原蛋白与分子量为100Kda-300Kda的医药级透明质酸钠按照10:(1-5)重量比进行组合时，特别是将分子量为70Kda的重组人源胶原蛋白与分子量为180Kda的医药级透明质酸钠按照10:2.5重量比进行组合时，得到的止血防粘连膜具有分子链交联点丰富，降解率稳定，交联剂残留低，吸水性强等优势。第二方面，本专利技术提供了一种止血防粘连膜的制备方法，包括：将胶原蛋白冻干粉与透明质酸钠按照上述重量比混合均匀，得到混合物；向混合物中加入交联剂进行交联反应，得到共混溶液；以及将共混溶液干燥、压制成膜片并灭菌。具本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种止血防粘连膜，其特征在于，包括胶原蛋白和透明质酸钠，其中，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10∶(1‑5)。

【技术特征摘要】
1.一种止血防粘连膜，其特征在于，包括胶原蛋白和透明质酸钠，其中，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10∶(1-5)。2.根据权利要求1所述的止血防粘连膜，其特征在于，所述胶原蛋白和所述透明质酸钠的重量比是10∶2.5。3.根据权利要求1或2所述的止血防粘连膜，其特征在于，所述胶原蛋白是重组人源胶原蛋白。4.根据权利要求3所述的止血防粘连膜，其特征在于，所述重组人源胶原蛋白的分子量是35Kda-95Kda，优选是70Kda。5.根据权利要求1或2所述的止血防粘连膜，其特征在于，所述透明质酸钠是医药级透明质酸钠。6.根据权利要求5所述的止血防粘连膜，其特征在于，所述医药级透明质酸钠的分子量是100Kda-300Kda，优选是180Kda。7.权利要求1-6任一项所述的止血防粘连膜的制备方法，其特征在于，包括：(1)将胶原蛋白冻干粉与透明质酸钠按照重量比是10：(1-5)混合均匀，得到混合物；(2)向步骤(1)得到的混合物中加入交联剂进行交联反应，得到共混溶液；(3)将步骤(2)得到的共混溶液干燥、压制成膜片并灭菌。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述交联剂浓度为0.01mol/L-0.1mol/L。9.根据权利要求7所述的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：何越，
申请(专利权)人：陕西慧康生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61