乳腺癌标志物制造技术

本发明专利技术涉及生物医学检测领域，提供了一种乳腺癌标志物。所称的标志物包括以下糖蛋白中的至少一种：具有末端N‑乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白、具有末端N‑乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子和具有末端N‑乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4。检测待测样本中这三种蛋白中的任一种、两种或者全部三种的量，能够判断或者辅助判断乳腺癌的发生和/或发展。这几种/类蛋白单独或者任意组合均能够作为乳腺癌的筛查或者辅助筛查诊断的标志物。

Breast cancer markers

The present invention relates to the field of biomedicine detection, and provides a marker for breast cancer. Markers referred to include at least one of the following: N glycoprotein with terminal GlcNAc glycosylated serum transferrin, with plasma protease C1 terminal N GlcNAc glycosylation inhibition and N with terminal GlcNAc glycosylation factor serine protease inhibitor B4. Detection of any three, two or all three proteins in the tested samples can be used to judge or assist the judgement of the occurrence and / or development of breast cancer. These proteins, either alone or in any combination, can be used as a marker for screening or screening for breast cancer.

【技术实现步骤摘要】
乳腺癌标志物
本专利技术涉及生物医学领域，特别地，涉及疾病检测标志物，更特别地，涉及一种乳腺癌标志物。
技术介绍
乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始一直呈上升趋势。根据国家癌症中心和卫生部疾病预防控制局2012年公布的乳腺癌发病数据显示：全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位。根据美国癌症划分联合委员会(AmericanJointCommissionforCancerStaging，AJCC)的第七版乳腺癌临床分期标准，乳腺癌可分为Stage0：TisN0M0；StageⅠ：T1N0M0；StageⅡA：T0N1M0，T1N1M0，T2N0M0；StageⅡB：T2N1M0，T3N0M0；StageⅢA：T0N2M0，T1N2M0，T2N2M0，T3N1-2M0；StageⅢB：T4N0-2M0；StageⅢC：任何TN3M0；StageⅣ：任何T任何NM1stage。其中Tis指原位癌，T代表原发性肿瘤，N表示区域淋巴结，M表示远处转移。原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。乳腺癌筛查以及监测，特别是早期筛查、辅助诊断、诊断，利于乳腺癌的尽早发现以及跟踪判断，能够提高治愈乳腺癌的成功率，意义重大。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。依据本专利技术的第一方面，本专利技术提供一种乳腺癌标志物，所称的标志物包括以下糖蛋白中的至少一种：具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白(Serotransferrin)、具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子(PlasmaproteaseC1inhibitor)和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4(SerpinB4)。上述三种具有特定糖基结构的糖蛋白，是专利技术人利用所在研究团队早前发现分离得的茶树菇凝集素2(Agrocybeageritalectin2,AAL2)、利用凝集素亲和层析联合高效液相色谱/质谱的方法，鉴定乳腺癌患者血浆中差异表达的糖蛋白，并通过进一步的筛选以及试验验证而来。专利技术人发现这三种具有特定糖基结构的糖蛋白分别在乳腺癌患者甚至在不同时期的乳腺癌患者中差异表达，检测待测样本中这三种蛋白中的任一种、两种或者全部三种的浓度，能够判断或者辅助判断乳腺癌的发生和/或发展，确定的这几种蛋白单独或者任意组合均能够作为乳腺癌的筛查或者辅助筛查诊断的标志物。根据本专利技术的实施例，所称的标志物为一种糖蛋白。在一个具体例子中，所称标志物为具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白。在另一个具体例子中，所称标志物为具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子。在又一个具体例子中，所称标志物为具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4。根据本专利技术的实施例，所称的标志物为组合物，由多种糖蛋白组成。在一个具体例子中，所称标志物由具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子组成。在一个具体例子中，所称的标志物为蛋白组合物，由具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4组成。在一个具体例子中，所称的标志物为蛋白组合物，由具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4组成。在一个具体例子中，所称的标志物为蛋白组合物，由具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白、具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4组成。根据本专利技术的实施例，所称的标志物具有的末端N-乙酰葡萄糖胺糖基为非还原型末端N-乙酰葡萄糖胺糖基。根据本专利技术的实施例，所称的标志物能够和凝集素AAL2特异性结合。AAL2的糖芯片实验表明，其糖结合特异性最高的是末端N乙酰葡糖胺(N-acetylglucosamine，GlcNAc)[JiangS,ChenY,WangM,etal.AnovellectinfromAgrocybeaegeritashowshighbindingselectivityforterminalN-acetylglucosamine[J].TheBiochemicalJournal,2012,443(2):369-378]，AAL2对GlcNAc的特异性高于其他结合GlcNAc的凝集素，为已知凝集素中与GlcNAc结合特异性最高的。利用该凝集素与糖基化程度的糖蛋白的高特异结合能力，能够筛选到具有特定糖基结构的糖蛋白，在一个具体例子中，专利技术人利用自制的AAL2-琼脂糖凝胶层析柱对健康个体和/或患者的血清样本中的糖蛋白进行富集，获得多种具有末端N乙酰葡糖胺糖基的糖蛋白。本领域技术人员能够知晓，蛋白/肽经过糖基化可变为糖蛋白/糖肽，糖蛋白/糖肽去糖基化后可变成蛋白/肽。个体/体液/组织/细胞中的一种糖蛋白，可能会存在原态(非糖基化或者去糖基化)和糖基化两种形态，而且，对于糖基化形态蛋白(糖蛋白)常常由于糖基化位置(位点)和/或程度不一样，有多种存在形式，即糖蛋白上的糖链具有高度的宏观和微观不均一性。所称的糖蛋白Serotransferrin、PlasmaproteaseC1inhibitor和SerpinB4也不例外，在个体/体液/组织/细胞中，这三种蛋白可能都有非糖基化形态存在，而且各自的糖基化形态均存在多种不同的糖结构，即同一种糖蛋白的糖结构一般是多样的。例如，Serotransferrin可能不带糖基/糖链、或者可能在某个或某些位点上带有一条或多条糖链，而糖链由一种或多种糖基组成和/或糖基之间具有多种连接方式。所称的具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的糖蛋白指，糖蛋白的至少一个糖链的末端为N-乙酰葡萄糖胺糖基，所称的糖链包括一个或多个糖基。本领域技术人员能够理解，所称的三种蛋白，在示例中，若以糖结构来区分，各自都可以称为一类蛋白，为具有一种或多种糖结构的蛋白，该类蛋白的糖结构具有一个共同的特征为包含至少一个末端N-乙酰葡萄糖胺糖基。在本文以下的描述中，除特殊说明，血清转铁蛋白或者Serotransferrin表示具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白，血浆蛋白酶C1抑制因子或者PlasmaproteaseC1inhibitor表示具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子，丝氨酸蛋白酶抑制剂B4或者SerpinB4表示具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4。依据本专利技术的第二方面，提供上述一方面或者任一实施例中的标志物在筛查、诊断或者辅助诊断乳腺癌中的用途。前述对本专利技术一方面或者任一实施例中的标志物的技术特征和优点的描述，仍旧适用本专利技术这一方面的用途，在此不再赘述。根据本专利技术的实施例，所称的筛查、诊断或者辅助诊断乳腺癌包括：测定待测样本中的标志物的量，获得第一量，标志物为上述任一方面或者任一实施例中的标志物；比较第一量与第二量，以及依据获得的比较结果，判定待测样本的来源个体患有乳腺癌的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乳腺癌标志物，其特征在于，所述标志物包括具有末端N‑乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种乳腺癌标志物，其特征在于，所述标志物包括具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血清转铁蛋白。2.权利要求1的标志物，其特征在于，所述标志物还包括具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的血浆蛋白酶C1抑制因子和具有末端N-乙酰葡萄糖胺糖基的丝氨酸蛋白酶抑制剂B4中的至少一种。3.权利要求1或2的标志物，其特征在于，所述末端N-乙酰葡萄糖胺糖基为非还原型末端N-乙酰葡萄糖胺糖基。4.权利要求1或2的标志物，其特征在于，所述标志物能够和杨树菇凝集素2特异性结合。5.权利要求1-4任一标志物在辅助诊断乳腺癌中的用途。6.权利要求5的用途，其特征在于，所述辅助诊断乳腺癌包括：测定待测样本中的权利要求1-4任一标志物的量，获得第一量；比较所述第一量与第二量，所述第二量为利用相同的测定方法获得的对照样本中的相应标志物的量，以及依据比较结果，判定待测样本的来源个体患有乳腺癌的风险和/或者乳腺癌发展时期；任选的，所述对照样本来自健康个体；任选的，所述对照样本来自乳腺癌患者；任选的，所述对照样本为体液样本，所述体液选自血液、血浆和血清中的至少一种；任选的，至少利用一种测定方法进行所述测定；任选的，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁一，关鑫，黄壮霖，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44