基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法及应用。本发明专利技术主要是：制备金纳米簇壳聚糖溶液；将金纳米簇壳聚糖溶液在微孔板中蒸干制成金纳米簇壳聚糖复合物膜；将金纳米簇壳聚糖复合物膜上的金纳米簇与PSA的适配体末端的巯基通过金硫键结合，然后通过PSA适配体与PSA的特异性作用使待测样品中的PSA与PSA适配体结合；向体系中加入柠檬酸三钠溶液、聚乙二醇溶液、双氧水溶液和氯金酸溶液，根据PSA浓度的不同，与PSA适配体连接的量也会不同，对金纳米簇壳聚糖复合物膜表面的覆盖程度不同，金颗粒呈现的颜色也不一样，以此达到检测前列腺抗原即PSA的目的。本发明专利技术原料来源广泛，现象明显，检测灵敏度可视化程度高。

Preparation and application of gold nanocluster chitosan complex membrane Kit

The invention discloses a preparation method and application based on gold nanocluster chitosan complex membrane kit. The invention is mainly: preparation of gold nanoclusters chitosan solution; gold nanoclusters chitosan solution in microplates steamed dried into gold nanoparticles chitosan complex film; the gold nanoclusters and PSA gold nanoclusters chitosan composite film on the aptamer end through the thiol gold sulfur bond the specific role, and then through the PSA aptamer and PSA for measuring PSA and PSA in the sample of aptamer binding; adding citric acid three sodium solution and glycol solution, hydrogen peroxide solution and chloroauric acid solution into the system, according to the different concentration of PSA, PSA and aptamer connections are different. The cover of the gold nanoclusters of chitosan complex film on the surface of the gold particles of different colors are not the same, in order to achieve the purpose of detecting prostate antigen PSA. The invention has a wide range of raw materials, obvious phenomenon, and high visibility of detection sensitivity.

【技术实现步骤摘要】
基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法及应用
本专利技术属于化学生物传感以及生物检测
，具体涉及一种基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法及应用。
技术介绍
壳聚糖(chitosan)具有很好的生物黏着性与促进吸收作用，它又称为脱乙酰甲壳素，是由自然界中广泛存在的几丁质(chitin)通过脱乙酰作用得到的。壳聚糖作为一种天然的高分子，其血液相容性、生物相容性、无毒性等优良性能引起了各个领域的广泛关注，在生物医药、食品加工、化工企业、化妆品合成、水资源处理、金属提取及回收、生化和生物医学等众多领域的应用研究取得了突破性的进展。早有研究报告证明显示，壳聚糖具有降血糖血脂的作用。另外，壳聚糖已被列入作为增稠剂和被膜剂。由于壳聚糖分子中含有游离的氨基，故在酸性溶液中易成盐，呈阳离子性质。随着壳聚糖分子中氨基数量的增多，其氨基特性越突出，这正是其独特性质的所在，由此为壳聚糖奠定了许多生物学特性。金属纳米簇通常由几个到一百个原子组成，直径为1nm-2nm，其性质不同于单个原子以及纳米颗粒。纳米材料具有表面效应、小尺寸效应和宏观量子隧道效应。贵金属纳米团簇的催化性能是一个很有前途的应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)制备金纳米簇壳聚糖溶液作为具有过氧化物酶活性的金纳米簇模拟酶；(2)将步骤(1)制备的金纳米簇壳聚糖溶液在微孔板中蒸干制成金纳米簇壳聚糖复合物膜；(3)将金纳米簇壳聚糖复合物膜上的金纳米簇与前列腺抗原即PSA的适配体末端的巯基通过金硫键结合，然后通过PSA适配体与PSA的特异性作用使待测样品中的PSA与PSA适配体结合；(4)金颗粒显色步骤：向步骤(3)体系中加入柠檬酸三钠溶液、聚乙二醇溶液、双氧水溶液和氯金酸溶液，根据PSA浓度的不同，与PSA适配体连接的量也会不同，对金纳米簇壳聚糖复合物膜表面的覆盖程度不同，即金...

【技术特征摘要】
1.一种基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)制备金纳米簇壳聚糖溶液作为具有过氧化物酶活性的金纳米簇模拟酶；(2)将步骤(1)制备的金纳米簇壳聚糖溶液在微孔板中蒸干制成金纳米簇壳聚糖复合物膜；(3)将金纳米簇壳聚糖复合物膜上的金纳米簇与前列腺抗原即PSA的适配体末端的巯基通过金硫键结合，然后通过PSA适配体与PSA的特异性作用使待测样品中的PSA与PSA适配体结合；(4)金颗粒显色步骤：向步骤(3)体系中加入柠檬酸三钠溶液、聚乙二醇溶液、双氧水溶液和氯金酸溶液，根据PSA浓度的不同，与PSA适配体连接的量也会不同，对金纳米簇壳聚糖复合物膜表面的覆盖程度不同，即金纳米簇壳聚糖复合物膜表现出不同的催化能力，金颗粒呈现的颜色也不一样，以此达到检测前列腺抗原即PSA的目的。2.根据权利要求1所述基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的制备金纳米簇壳聚糖溶液包括如下步骤：(a)制备壳聚糖溶液：由体积浓度为0.1％的乙酸作为溶剂，将壳聚糖溶解为浓度为5mg/mL的溶液，通过加入10mol/L的NaOH将壳聚糖溶液pH调至6.4；(b)取7.5mL步骤(a)制备的壳聚糖溶液，加入60mL蒸馏水，并在剧烈搅拌条件下，加入600μL0.11mol/L的巯基丙酸，并逐滴加入1.5mL10mmol/L的HAuCl4，此时得到的金纳米簇壳聚糖溶液在紫外分析仪下呈现出橙色的荧光。3.根据权利要求1所述基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述金纳米簇壳聚糖复合物膜是将金纳米簇壳聚糖溶液在紫外灯照射4h的条件下，于干燥箱内温度40℃条件下蒸干成膜。4.根据权利要求1所述基于金纳米簇壳聚糖复合物膜试剂盒的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄昊文，谢潇雪，谭芳，文铃博，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43