生产解磷解钾菌的复合培养基及其液体深层发酵生产方法技术

一种生产解磷解钾菌的复合培养基及其液体深层发酵生产方法，复合培养基由玉米糖化液、红糖、蜂蜜、蚕茧粉、卵磷脂、钾长石、多种无机盐和复合维生素组成，发酵工艺采用分段控制法，通过控制发酵过程中的通风量、搅拌速度和培养温度来促进菌体生长，加强芽孢的同步生成率，整个生产过程省时省力，杜绝了杂菌污染，特别适合于磷细菌和钾细菌的混合培养。生产出来的菌肥产品活菌数量多，芽孢生成率高，产品的保存时间更长。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，属于微生物肥料生产领域。微生物肥料质量好坏关键在于两个方面，一是菌种的质量，包括菌种的固氮能力、解磷能力、解钾能力、对恶劣环境的适应能力等；二是活菌的数量，包括菌种之间的数量比例、是否相互拮抗、保存期间活菌数量的变化等，而这两个方面与菌肥生产时所采用的培养基和生产方法是密切相关的。现在公开的微生物肥料制作方法中，一般采用各类菌种分别培养再混合的生产方式，这种方法操作繁琐，容易引起杂菌污染，难以保障产品的质量；还有的采用多菌种混合发酵的方式，但因为采用一般的培养基，难以充分保障各类菌种各自的营养需求，因此发酵生产出来的产品中虽然总菌数达到了标准，但是各类菌种数量不一，比例不协调，不能把各类活性菌种的生理作用完全体现出来；另外还有一类采用的是固体发酵的方式，这种方法生产出来的产品活菌数普遍不高，或者说仅仅在理论上达到了预期的数量。本专利技术的目的在于提供一种适合生产解磷解钾菌的复合培养基。本专利技术的另一个目的在于提供一种培养解磷解钾菌的液体深层发酵生产方法。本专利技术的复合培养基由天然物质、无机盐和复合维生素组成，特别适合于磷细菌和钾细菌的混合培养。培养基的主要成份为玉米糖化液 15％红糖 2％蜂蜜 0.5％蚕茧粉 0.5％ 卵磷脂0.02％ 钾长石或云母 0.1％KH2PO40.2％ CaCO30.25％ MgSO40.02％FeSO4·7H2O 10PPM MnSO4·H2O 5PPM 复合维生素 10PPM本专利技术所采用的菌种由中国普通微生物菌种保藏中心提供，一支是解磷菌，编号AS 1.220，一支是巨大芽孢杆菌，编号AS 1.217，革兰氏染色阳性，产生椭圆形芽孢，在含有卵磷脂的琼脂平板上培养可以观察到明显的溶磷圈；另外一支是胶质芽孢杆菌，编号AS 1.231，革兰氏染色阴性，有荚膜，有椭圆形芽孢。这三支菌种在无氮培养基上均生长良好，都具有一定的固氮作用。本专利技术的发酵工艺采用分段控制法，通过控制发酵过程中的通风量、搅拌速度和培养温度来促进菌体生长，加强芽孢的同步生成率。发酵前期和后期通风量小，发酵中期通风量大，发酵后期提高培养温度。发酵生产前期，菌种在新的营养条件下进行自我调整，宏观上主要体现在菌体体积大小的变化，而菌体数量的变化不明显，菌体生长对氧的需求量不大，所以这段时间里可以减少通风量；发酵中期，菌体生长旺盛，数量以几何级数增长，这时的菌体对氧的需求量大，需要加大通风量来进行供氧，同时可以提高搅拌的转速，以提高溶氧水平和加快营养物质的流动。发酵后期，菌数已经基本趋于稳定，芽孢开始大量形成，这个时候可以逐渐减少通风量，并且同时提高培养温度到45～50℃，这样有利于菌体内芽孢的同步形成。实践证明，以这种分段控制发酵生产出来的磷细菌和钾细菌的芽孢生成率在98％以上，从而使得菌肥的有效期大大延长。本专利技术的复合培养基和液体深层发酵生产方法是在多年的菌肥生产实践中总结出来的，经过了反复的实践证明优于一般的普通生产培养基和生产方法，其特点在于1.培养基营养全面，搭配合理，菌种的生长速度快，一般28～32小时左右就能完成发酵，每毫升发酵液中的活菌数在25亿以上；2.在发酵液过程中磷细菌和钾细菌均能稳定生长，比例协调，如磷细菌和钾细菌按数量比1∶2接种，则生产出来的菌肥产品菌数比一般稳定在1∶1.5左右；3.发酵在密闭环境中进行，省时省力，杜绝了杂菌污染，菌肥的质量得到了保障；4.实现了芽孢生成的同步化，芽孢生成率高，从而使菌肥产品有更长的保存期。下面以实施例对本专利技术作进一步的说明1.制备玉米糖化液称取粉碎成80目的玉米粉150公斤，加入300公斤水中，升温到65℃，加入糖化酶，保温糖化3～5小时，至糖化液中滴加碘液不显蓝色为终点。糖化完全后过滤得糖化液。2.发酵生产将制好的玉米糖化液转入发酵罐中，加入红糖20公斤、蜂蜜5公斤、蚕茧粉5公斤、卵磷脂0.2公斤、钾长石细粉1公斤、KH2PO42公斤、CaCO32.5公斤、MgSO40.2公斤、FeSO4·7H2O 10克、MnSO4·H2O 5克、复合维生素10克，升温至110℃高压灭菌，再冷却至30℃，接入菌种。接种量为5％～8％，菌种中磷细菌和钾细菌数量比例控制为1∶2左右。发酵前6～8小时通风量控制在1∶0.3～0.35；6～8小时以后，菌体逐步进入对数生长期，对氧和营养物质的需求旺盛，这段时间需要加大通风量，以加速溶氧和营养物质的流动，通风量大小可以根据发酵生产而定，一般在1∶0.5～0.65之间，也可以根据生产实际情况变化。发酵生产的后期，芽孢开始形成，这时要减少通风量，这样有利于芽孢的形成。培养温度提高到45℃，以促使芽孢同步形成。一般培养30小时左右，发酵产品经镜检合格，发酵结束。3.将检验合格的发酵产品经无菌灌装，就得到了液体菌肥；如将发酵液用无菌的草炭吸附，就得到了固体菌肥。权利要求1.一种，其特征在于复合培养基的主要成份为玉米糖化液 15％ 红糖 2％蜂蜜 0.5％蚕茧粉 0.5％ 卵磷脂0.02％ 钾长石或云母 0.1％KH2PO40.2％ CaCO30.25％ MgSO40.02％FeSO4·7H2O 10PPM MnSO4·H2O 5PPM 复合维生素 10PPM2.根据权利要求1所述的液体深层发酵生产方法，其特征在于采用分段控制法，通过控制发酵过程中的通风量、搅拌速度和培养温度来促进菌体生长，加强芽孢的同步生成率，发酵前期和后期通风量小，发酵中期通风量大，发酵后期提高培养温度。3.根据权利要求1所述的解磷解钾菌，其特征在于本专利技术所采用的菌种由中国普通微生物菌种保藏中心提供，一支是解磷菌，编号分别为AS 1.220；一支是巨大芽孢杆菌，编号AS 1.217；另外一支是胶质芽孢杆菌，编号AS 1.231。全文摘要一种，复合培养基由玉米糖化液、红糖、蜂蜜、蚕茧粉、卵磷脂、钾长石、多种无机盐和复合维生素组成，发酵工艺采用分段控制法，通过控制发酵过程中的通风量、搅拌速度和培养温度来促进菌体生长，加强芽孢的同步生成率，整个生产过程省时省力，杜绝了杂菌污染，特别适合于磷细菌和钾细菌的混合培养。生产出来的菌肥产品活菌数量多，芽孢生成率高，产品的保存时间更长。文档编号C05F11/08GK1641016SQ20041000218公开日2005年7月20日 申请日期2004年1月14日 优先权日2004年1月14日专利技术者郭伟光 申请人:郭伟光本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产解磷解钾菌的复合培养基及其液体深层发酵生产方法，其特征在于复合培养基的主要成份为：玉米糖化液１５％红糖２％蜂蜜０．５％蚕茧粉０．５％卵磷脂　０．０２％钾长石或云母０．１％　 　ＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］０．２％ＣａＣＯ↓［３］０．２５％ＭｇＳＯ↓［４］０．０２％ＦｅＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ１０ＰＰＭＭｎＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ５ＰＰＭ复合维生素１０ＰＰＭ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭伟光，
申请(专利权)人：郭伟光，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]