水稻白叶枯病菌快速分离方法技术

本发明专利技术涉及水稻白叶枯病菌快速分离方法，属微生物技术领域。将含目标病原细菌的水稻病组织，经用７５％洒精消毒６０－９０秒后，用无菌水冲洗，将病组织置于无菌载玻片上，滴加无菌水，室温摆放５－１５ｍｉｎ，待病原菌从病组织中喷出到切口处的水中，用移菌环沾取含菌液划线于适于水稻白叶枯病菌生长的ＮＡ或ＳＸ培养基上，２５－２８℃培养，即可得到相应的目标细菌。本发明专利技术分离细菌快速、准确、污染率低、纯度高、菌株变异极小，保持了病原菌野生型的特性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物
，涉及一种。
技术介绍
水稻白叶枯病是亚洲和太平洋地区水稻生产上最重要的细菌性病害之一。水稻白叶枯病是由病原细菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)侵染而引发的一种主要水稻病害，不但严重发生在东南亚各国，而且已经蔓延到澳洲，美洲和非洲。我国目前除新疆外，全国都有不同程度的发生，是水稻上仅次于稻瘟病的重要病害。水稻受害后，一般减产20％～30％，严重的减产50％甚至颗粒无收。水稻抗病品种的培育、利用和病害的流行学研究，以及病原菌的小种分化、群体遗传多样性研究，都离不开快速获得具有致病性的病原细菌分离物。植物病原细菌快速分离和纯培养，无论是在科学试验或是生产实践中都有着重大的理论张实践意义，纯培养意味着从自然界中将特定的微生物分离出来，在人工培养基上增殖。特别是病原细菌，如何有效地去除病组织表面或其内部的其它微生物，快速获得目标病原菌，一直都是植物病理学家关注的重点。目前，用于水稻白叶枯病菌分离方法多采用沙培法，主要机理为通过对病组织进行保湿，使菌脓从病组织切出口产生，将后将菌脓放在适当培养基上进行分离培养。病组织破碎稀释涂板分离法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
水稻白叶枯病菌快速分离方法，其步骤是：　　　　（１）标样选择：选取具有典型症状的水稻白叶枯病标本，在发病扩展前沿病键交界处，剪取０．５－１．５ｃｍ组织块；　　　　（２）消毒：首先将组织块用自来水冲洗，选用７５％酒精消毒６０－９０秒，然后用无菌水冲洗３次，稍凉干后用剪刀修剪，去除多余的健康组织；　　　　（３）先将载玻片放入９５％乙醇中浸泡，在酒精灯火上轻烧，将消毒过的组织块放在灭菌的载玻片上，两端滴上１滴无菌水，室温静置５－１５ｍｉｎ，待喷菌现象出现后，用移菌环沾含菌液划线于普通ＮＡ或ＳＸ培养基上；　　　　（４）细菌培养：２４－２８℃培养基箱中培养４８－７２ｈ后观察，根据菌落形态、颜色等细菌培养...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姬广海，张世光，陈兴全，何月秋，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]