本发明专利技术公开了一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，命名为深褐芽孢杆菌（Bacillusatrophaeus）菌株QLY001，保藏编号为CGMCC No.8904，并提供了以其发酵制备的微生物菌剂和应用。该深褐芽孢杆菌QLY001微生物菌剂具有抑菌作用，可以作为微生物农药使用，抑制马铃薯褐腐病菌、马铃薯坏疽病菌、小麦根腐病菌、番茄早疫病原菌和马铃薯炭疽病菌，抑菌率达到60%以上，可以克服现有技术中化学农药环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，以实现环保性好、不易产生抗药性和安全性好的优点。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，命名为深褐芽孢杆菌（Bacillusatrophaeus）菌株QLY001，保藏编号为CGMCC?No.8904，并提供了以其发酵制备的微生物菌剂和应用。该深褐芽孢杆菌QLY001微生物菌剂具有抑菌作用，可以作为微生物农药使用，抑制马铃薯褐腐病菌、马铃薯坏疽病菌、小麦根腐病菌、番茄早疫病原菌和马铃薯炭疽病菌，抑菌率达到60%以上，可以克服现有技术中化学农药环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，以实现环保性好、不易产生抗药性和安全性好的优点。【专利说明】一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株、微生物菌 剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物领域，具体涉及一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株、微生物菌剂 及其制备方法和应用。
技术介绍
随着社会发展，人们对食品的要求越来越高，基于化学农药对环境的污染和农药 残留等问题，植物病害的生物防治成为了研究热点，其中尤以植物内生细菌作为拮抗菌的 研究得到众多学者的观注。植物内生细菌是指生活在植物体内，但对植物没有任何实质性 伤害的细菌，其具有固氮、溶磷和产IAA等生物学功能，特别是抑菌功能是其成为生防菌资 源的有力支撑。植物内生菌的固氮、溶磷和产IAA等生物学功能对宿主有促进生长的作用； 植物内生细菌也可以通过分泌抑菌物质、与病原菌竞争营养空间及诱导植物获得抗病性阻 止或降低病原菌对植物的侵染或造成的危害。以内生细菌为菌种资源研制的微生物农药不 易产生抗药性，不伤害天敌，且能利用农副产品等广泛生产，更重要的是内生细菌可以定殖 于作物体内，甚至可以通过种子（苗木）传播于下一代，长期起作用，省时省力，高效，应用 于农业生产后为生产绿色或无公害农产品提供了一个新的途径。 微生物肥料作为一种新型肥料，施入土壤后，通过其特定菌株的快速繁殖，能固定 大气中的氮素、释放土壤中固定态的磷、钾元素，使得环境的养分潜力得以充分发挥，并为 作物生长营造一个良好的土壤微生物环境，在减少化肥用量、降低环境污染、提高农作物品 质等方面具有重要意义。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解钾和作物生长素于一身的复合微生 物肥料的研发，在农业可持续发展中有举足轻重的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述现有技术中化学农药和化学肥料环保性差、易产生抗 药性和安全性差的缺陷，提供了 一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株。 为了实现上述目的，本专利技术提供的技术方案为：一种高寒草地牧草内生细菌深褐 芽孢杆菌菌株，命名为深褐芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus)菌株QLY001，保藏单位为中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2014年03月10日，保藏编号 为 CGMCC No. 8904。 进一步的，上述的一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，所述深褐芽孢 杆菌（Bacillus atrophaeus)菌株QLY001在不含色氨酸的King氏培养基中分泌IAA的浓 度为2. 6mg/L，在含100mg/L色氨酸的King氏培养基中分泌IAA的浓度为3. 42mg/L。 本专利技术的第二个目的是提供了上述一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株在抑制病原 菌中的应用。 进一步的，上述的应用，所述病原菌包括有马铃薯褐腐病菌（Stysanus stemonitis)、马铃薯坏疽病菌（Phoma foveata)、小麦根腐病菌（Bipolaris sorokiniana)、番爺早疫病原菌（Alternaria solani)、马铃薯炭疽病菌（Colletotrichum coccodes)、马铃薯枯萎病菌（Fusarium avenaceum)、孜然根腐病菌（Fusarium solani)和 马铃薯干腐病菌（Fusarium oxysporum)。 本专利技术的第三个目的是提供了一种微生物菌剂，其活性成分为上述深褐芽孢杆菌 (Bacillus atrophaeus)菌株 QLY001 的菌体。 进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中，含有按重量百分比计的深 褐芽抱杆菌（Bacillus atrophaeus)菌株QLY0016-12%，培养基余量。 进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述培养基由以下物质组成：氯化铵8-16g， 玉米粉13-21g，牛肉膏4-6g，蒸馏水或无离子水lOOOmL，所述培养基的pH值为6. 6-7. 4。 进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中，深褐芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus)菌株 QLY001 的活菌数为 1. 82X 10lclCFU/mL-3. 5X 10lclCFU/mL。 本专利技术的第四个目的是提供了上述一种微生物菌剂的制备方法，是将深褐芽孢杆 菌（Bacillus atrophaeus)菌株QLY001接入至培养基中发酵，接入量为6-12%，发酵时间 为33-39h，发酵温度为24-32°C，发酵转速为140-180r/min，发酵溶氧量为55% -75%。 本专利技术的第五个目的是提供了上述一种微生物菌剂在制备农药或肥料中的应用。 下面通过试验一至试验二，分别对本专利技术提供的深褐芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus)QLY001(CGMCC No. 8904)在形态、16S rDNA 基因序列进行鉴定。 试验一：对深褐芽抱杆菌Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)的形态鉴 定： 将深褐芽孢杆菌 Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)接种于牛肉膏 蛋白胨平板培养基上，28°C培养5d的培养性状为：菌落大小为3-5mm，乳黄色，隆起，较软， 不透明，边缘整齐；QLY001(CGMCC No. 8904)呈革兰氏阳性，芽孢中生，菌体大小为2.7? 6· 1μπιΧ0·7 ?L5um〇 试验二：对深褐芽孢杆菌 Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)的 16S rDNA基因序列鉴定： 将深褐芽孢杆菌 Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)的 16S rDNA 基 因序列在Genebank中与Bacillus atrophaeus (HF545325. 1)的同源性在99%以上，并在 系统发育树上聚在一起，结合形态特征，将QLY001 (CGMCC No. 8904)鉴定为深褐芽孢杆菌 Bacillus atrophaeus。 下面通过试验三和试验四对深褐芽孢杆菌Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)的室内抑菌活性和田间防治效果进行测定。 试验三：深褐芽孢杆菌Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)室内抑菌活 性测定： 首次筛选出内生细菌深褐芽抱杆菌Bacillus atrophaeusQLYOOl (CGMCC No. 8904)拮抗菌株，将该拮抗菌株接种于QLY001 (CGM本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，其特征在于，分离自极端环境条件下的高寒草地牧草体内，命名为深褐芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）菌株QLY001，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2014年03月10日，保藏编号为CGMCC No.8904。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨成德，陈秀蓉，薛莉，畅涛，
申请(专利权)人：甘肃农业大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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