一种液体复合微生物肥料的制备方法技术

一种液体复合微生物肥料的制备方法，属于农业生物技术领域。制备方法包括：以啤酒酵母、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌为菌株，分别接种三角烧瓶制备生产用液体菌种；以土豆、红糖、葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾、氯化钠按照比例混合，加水溶解，热处理灭菌，首先接种啤酒酵母，再接种植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌，ｐＨ降至３．５－４．５时收获，无菌分装。本发明专利技术方法制备的复合微生物肥料为酸性棕色液体，活菌含量１０亿／ｍＬ，可作为土壤微生物改良剂，也可喷洒于植株表面。该制品能够促进植物生长，提高肥料利用率，增强植株的抗逆性和抗病能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种新型液体复合微生物肥料及其制备方法，属于农业生物

技术介绍
在保障农业增产的诸多措施中，施用化学肥料具有举足轻重和不可替代的重要作用。化学肥料的大量使用提高了作物的产量，也造成土壤中硝酸盐、亚硝酸盐的大量积累，农产品中有害化学物质残留量增加，使农产品质量下降，安全性降低。同时，土壤中积累的硝酸盐、亚硝酸盐的流失，污染了水源，对生态环境造成极大的破坏。我国目前单位面积化肥用量已处于世界前列，并仍有增长的趋势。因此，寻求使用高效微生物肥料，提高化肥利用效率，减少化肥使用量，促进无公害农产品生产，是当今我国农业生产的迫切需求。农作物病虫害是影响产量的重要因素，我国每年由病虫害造成的经济损失达15％-20％。因此，有效控制病虫害非常重要。长期以来，化学农药是我国农业防治病虫害的主要手段。但化学农药的过量施用甚至是滥用，在防治农作物病虫害的同时，各种病虫的抗(耐)药性大大增强，从而形成了恶性循环，不但污染了环境，农药的残留还严重影响了农产品的安全性。因此，寻求新的病虫害生物防治措施，高效防治各种植物病虫害，减少使用化学农药，降低农产品中农药的残留，是农业生产中目前急需解决的又一难题。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供。本专利技术的液体复合微生物肥料的制备是利用土豆、红糖、葡萄糖等原料，微生物菌种选自啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae，菌种编号CGMCC2.610；植物乳杆菌Lactobacillusplantarum，菌种编号CGMCC1.103；嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus，菌种编号CGMCC1.1854三种益生菌组合。通过微生物发酵来制备液体复合微生物肥料。上述3种益生菌菌株均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。本产品的活性成分即为上述3种益生菌组合。本专利技术的液体复合微生物肥料的制备方法，步骤如下(1)以啤酒酵母、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌为菌株，分别接种三角烧瓶制备二级液体菌种。(2)按重量份将土豆1-10份、红糖1-10份、葡萄糖1-5份、蛋白胨0.1-2份、硫酸镁0.01-0.2份、硫酸锰0.01-0.2份、磷酸氢二钾0.01-1份、氯化钠0.1-2份混合，加洁净的水69.6-96.8份溶解，热处理方法进行灭菌，作为培养基。(3)在上述培养基中先接种啤酒酵母的二级液体菌种，28-32℃培养16～24小时，然后再接种植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的二级液体菌种的1∶1混合液，在34-37℃继续培养24～30小时，pH值降至3.5-4.5即可；接种总量为0.5-4重量份。(4)将步骤(3)的产物无菌分装，制得液体复合微生物肥料。优选的，步骤(2)所述的热处理是在115-126℃的温度下进行的，灭菌时间为25-120分钟。优选的，步骤(2)所述的土豆是洗净去皮切成丁的土豆碎块。更为优选的是≤1×1×1cm的土豆丁。优选的，步骤(2)所述的菌种组合重量比，啤酒酵母∶植物乳杆菌∶嗜酸乳杆菌＝(0.5～1)∶1∶1。上述步骤(1)所述的啤酒酵母、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的二级液体菌种的制备按现有技术即可。本专利技术实施例中给出了其中的一种可选用的具体方法。本专利技术方法制备的液体复合微生物肥料为酸性棕色液体，活菌含量10亿/mL左右。适用于稀释后喷洒于植物茎叶表面或稀释后浇施于植株根部土壤。本专利技术首次以啤酒酵母及植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌为菌株，利用土豆、红糖、葡萄糖、蛋白胨等原料，通过分批混合接种发酵，在无菌条件下进行分装，制备复合微生物肥料，所生产的复合微生物肥料益生菌含量高，可作为土壤微生物改良剂，也可喷洒于植株表面。该菌剂能够促进植物生长，提高肥料利用率，增强植株的抗逆性和抗病能力，效果优良。具体实施方式实施例1啤酒酵母的二级液体菌种的制备，具体操作步骤如下A.斜面菌种(固体)将土豆去皮洗净，切成小碎块，放在96.5份水中，土豆∶水＝1∶(3～5)重量比，煮沸30分钟，用滤布过滤，滤液加水稀释至原来的体积。再加葡萄糖2份，琼脂1.5份，自然pH值，分装至试管，15磅灭菌20分钟。划线接种啤酒酵母菌株，28～32℃培养。以上均为重量份。B.二级菌种(液体)培养基配方同斜面，但不加琼脂，自然pH值，500ml三角烧瓶分装并塞棉塞，15磅灭菌20分钟，接种上述斜面菌种的菌悬液3～5％重量百分比，28～32℃，150-170rpm摇床培养。实施例2植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌的二级液体菌种的制备，具体操作步骤如下A.固体菌种蛋白胨1份，酵母粉0.5份，柠檬酸铵0.2份，葡萄糖2份，硫酸镁0.054份，牛肉膏1份，磷酸氢二钾0.2份，醋酸钠0.5份，硫酸锰0.025份，琼脂1.5份，水93.021份，自然pH值，分装至试管，15磅灭菌20分钟。分别划线接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌，30～37℃培养。以上均为重量份。B.二级菌种(液体)培养基配方同固体菌种培养基，但不加琼脂，自然pH值，500ml三角烧瓶分装并具胶塞，15磅灭菌20分钟，接种上述固体菌种的菌悬液3～5％重量百分比，30～37℃静置恒温培养。实施例3液体复合微生物肥料的制备制备方法将土豆5份、红糖5份、葡萄糖2份、蛋白胨0.5份、硫酸镁0.1份、硫酸锰0.1份、磷酸氢二钾0.1份、氯化钠0.1份混合，加洁净的水87.1份溶解，116℃通蒸汽进行灭菌，首先接种啤酒酵母二级液体菌种1份，30～32℃培养16小时，再接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌两种益生菌按1∶1体积比混合二级液体菌种(种子液)共2份，36～37℃继续培养26小时，pH降至3.5时收获，无菌条件下装瓶，所得复合微生物肥料为酸性棕色液体，活菌含量10亿/mL。以上均为重量份。实施例4液体复合微生物肥料的制备制备方法将土豆2份、红糖9份、葡萄糖1份、蛋白胨0.2份、硫酸镁0.01份、硫酸锰0.01份、磷酸氢二钾0.01份、氯化钠0.1份混合，加洁净的水87.67份溶解，116℃通蒸汽进行灭菌，首先接种啤酒酵母二级液体菌种0.5份，30～32℃培养20小时，再接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌两种益生菌按1∶1体积比混合种子液共2份，35～36℃继续培养28小时，pH降至3.7时收获，无菌条件下装瓶，所得复合微生物肥料为酸性棕色液体，活菌含量10亿/mL。以上均为重量份。实施例5液体复合微生物肥料的制备制备方法将土豆9份、红糖3份、葡萄糖5份、蛋白胨1.5份、硫酸镁0.15份、硫酸锰0.15份、磷酸氢二钾0.5份、氯化钠1份混合，加洁净的水79.7份溶解，116℃通蒸汽进行灭菌，首先接种啤酒酵母二级液体菌种0.5份，28～30℃培养24小时，再接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌两种益生菌按1∶1体积比混合种子液共1份，34～35℃继续培养30小时，pH降至3.9时收获，无菌条件下装瓶，所得复合微生物肥料为酸性棕色液体，活菌含量10亿/mL。以上均为重量份。实施例6用实施例3所生产的液体复合微生物肥料进行田间试验，2005年由山东省农业技术推广总站组织在山东临沂市河东区大棚西红柿进行喷洒试验。试验基础情况棚长63米，宽7米，前茬作物芹菜。供试品种毛粉802。栽植密度4600株/亩。随机区组排列，小区面积33.3m2，三次重复。分别于3月23日、3月30日和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液体复合微生物肥料的制备方法，步骤如下：（１）以啤酒酵母、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌为菌株，分别接种三角烧瓶制备二级液体菌种；（２）按重量份将土豆１－１０份、红糖１－１０份、葡萄糖１－５份、蛋白胨０．１－２份、硫酸镁０．０１ －０．２份、硫酸锰０．０１－０．２份、磷酸氢二钾０．０１－１份、氯化钠０．１－２份混合，加洁净的水６９．６－９６．８份溶解，热处理方法进行灭菌，作为培养基；（３）在上述培养基中先接种啤酒酵母的二级液体菌种，２８－３２℃培养１６～２４ 小时，然后再接种植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的二级液体菌种的１∶１混合液，在３４－３７℃继续培养２４～３０小时，ｐＨ值降至３．５－４．５即可；接种总量为０．５－４重量份；（４）将步骤（３）的产物无菌分装，制得液体复合微生物肥料。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：岳寿松，尤升波，游银伟，王翠萍，李爱芹，
申请(专利权)人：山东省农业科学院高新技术研究中心，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]