肌钙蛋白的保存剂及保存组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种肌钙蛋白的保存剂及保存组合物，保存剂中含有溶剂以及在溶剂中的1‑苯基‑2,3‑二甲基‑4‑二甲氨基吡唑酮、三(2‑羧乙基)膦盐酸盐、十六烷基二甲基烯丙基氯化铵、离子螯合剂、蛋白保护剂和糖类物质。经过多次实验研究，反复测试和验证，上述配方的保存剂能够提高肌钙蛋白的稳定性，在该保存剂中保存的肌钙蛋白不容易变性，适合肌钙蛋白的长期保存。

【技术实现步骤摘要】
肌钙蛋白的保存剂及保存组合物
本专利技术涉及生物试剂领域，特别是涉及一种肌钙蛋白的保存剂及保存组合物。
技术介绍
肌钙蛋白是一种横纹肌的结构蛋白，存在于肌原纤维的细丝中，与原肌球蛋白一起通过调节钙离子对横纹肌肌动蛋白ATP酶的活性来调节肌动蛋白和肌球蛋白的相互作用。肌钙蛋白能够调节心肌和骨骼肌的收缩和舒张。肌钙蛋白分子呈球形，一般分为三种亚型：肌钙蛋白I(TnI)、肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白C(TnC)。由于肌钙蛋白特异地分布于心肌组织中，因此常将肌钙蛋白作为心肌损伤的高敏感和特异性标志物，心肌肌钙蛋白对于检测急性冠状动脉综合征患者心肌缺血及危险分级具有重要意义。目前，心肌肌钙蛋白已成为诊断心肌梗死的首要标志物，也是独立于心电图之外可用于判断梗死灶范围大小及预后的重要血清学指标。临床上对肌钙蛋白的检测方法主要是免疫方法，根据其技术特点不同由可以分为：酶联免疫吸附免疫法、化学发光免疫法、荧光分析免疫法，金标免疫法、免疫比浊法、飞行质谱法和生物传感器法等。无论采用那一种免疫方法来对临床样本(包括血清、血浆、全血)中的肌钙蛋白浓度的测定，例如用化学发光法或者ELISA方法检测肌钙蛋白蛋白时，都需要用相应的肌钙蛋白标准品对检测方法进行校准。然而，肌钙蛋白标准品保存的过程中，由于蛋白酶水解作用、磷酸化作用、肝素的作用，标准品中的肌钙蛋白容易被蛋白酶水解，存在稳定性较差的问题。很多诊断试剂开发厂家在开发肌钙蛋白项目时也会遇到肌钙蛋白保存稳定性较差的问题。综上，用传统的试剂保存肌钙蛋白时，肌钙蛋白容易变性，不适合肌钙蛋白的长期保存。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种能够使得肌钙蛋白不容易变性的保存剂。此外，还提供一种能够用于保存肌钙蛋白的保存组合物。一种肌钙蛋白的保存剂，所述保存剂中含有溶剂和如下组分：其中，所述离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸二钾中的至少一种，所述蛋白保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白和明胶中的至少一种，所述糖类物质选自甘露醇、葡萄糖和蔗糖中的至少一种。上述肌钙蛋白的保存剂，含有溶剂以及在溶剂中的1-苯基-2,3-二甲基-4-二甲氨基吡唑酮、三(2-羧乙基)膦盐酸盐、十六烷基二甲基烯丙基氯化铵、离子螯合剂、蛋白保护剂和糖类物质。经过多次实验研究，反复测试和验证，上述配方的保存剂能够提高肌钙蛋白的稳定性，在该保存剂中保存的肌钙蛋白不容易变性，适合肌钙蛋白的长期保存。在其中一个实施例中，所述保存剂中还含有浓度为5mg/mL～16mg/mL的无机盐，所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化镁和硫酸钾中的至少一种。在其中一个实施例中，所述保存剂中还含有体积分数为0.5％～8％的促溶剂，所述促溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的至少一种。在其中一些实施例中，所述保存剂中还含有浓度为1mg/mL～10mg/mL的pH值缓冲剂，所述pH值缓冲剂中含有磷酸氢二钠和柠檬酸，所述磷酸氢二钠和所述柠檬酸的摩尔比为1～3:0.6～1。在其中一个实施例中，所述保存剂的pH值为5.2～5.6。在其中一个实施例中，所述保存剂中还含有浓度为0.1mg/mL～1mg/mL的抑菌剂。在其中一个实施例中，所述溶剂为水。一种肌钙蛋白的保存组合物，按质量份数计，所述保存组合物包括：其中，所述离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸二钾中的至少一种，所述蛋白保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白和明胶中的至少一种，所述糖类物质选自甘露醇、葡萄糖和蔗糖中的至少一种。在其中一个实施例中，所述保存组合物还包括5份～16份的无机盐，所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化镁和硫酸钾中的至少一种。在其中一个实施例中，所述保存组合物还包括1份～10份的pH值缓冲剂，所述pH值缓冲剂中含有磷酸氢二钠和柠檬酸，所述磷酸氢二钠和所述柠檬酸的摩尔比为1～3:0.6～1。附图说明图1为用实施例1的保存剂稀释肌钙蛋白I(TnI)标准品制作的标准曲线；图2为用对比例1的试剂稀释肌钙蛋白I(TnI)标准品制作的标准曲线；图3为低浓度的肌钙蛋白I分别在对比例1的试剂和实施例1的保存剂中保存后浓度随时间变化的对比图；图4为高浓度的肌钙蛋白I分别在对比例1的试剂和实施例1的保存剂中保存后浓度随时间变化的对比图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例及附图对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。一实施方式的肌钙蛋白的保存剂，该保存剂中含有溶剂以及如下组分：其中，离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸二钾中的至少一种，蛋白保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白和明胶中的至少一种，糖类物质选自甘露醇、葡萄糖和蔗糖中的至少一种。在其中一个实施方式中，溶剂为水，各组分均匀溶解在水中，从而形成该肌钙蛋白的保存剂。具体地，1-苯基-2,3-二甲基-4-二甲氨基吡唑酮在强酸强碱环境下能保持稳定，但对光和氧化剂较肌钙蛋白要敏感，有效保护肌钙蛋白中的吡唑结构不被氧化，使得置于该保存剂中的肌钙蛋白稳定性增强，不容易变性。三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP-HCl)溶解性好，且带有异氰酸酯基官能团，能够对二硫化物的选择性还原，防止肌钙蛋白发生降解，增强稳定性。十六烷基二甲基烯丙基氯化铵在溶液中能够促进肌钙蛋白分散，提高肌钙蛋白的分散性和均一性，避免肌钙蛋白结团和沉淀。保存剂中的1-苯基-2,3-二甲基-4-二甲氨基吡唑酮(0.1mg/mL～50mg/mL)和三(2-羧乙基)膦盐酸盐(0.5mg/mL～30mg/mL)两者按一定浓度比例配合，使得储存在保存剂中的肌钙蛋白被氧化或降解的几率减少，肌钙蛋白不容易变性。进一步地，保存剂中的1-苯基-2,3-二甲基-4-二甲氨基吡唑酮(0.1mg/mL～50mg/mL)、三(2-羧乙基)膦盐酸盐十六烷基二甲基烯丙基氯化铵(0.5mg/mL～30mg/mL)和十六烷基二甲基烯丙基氯化铵(0.1mg/mL～1mg/mL)三者按一定浓度比例配合，使得肌钙蛋白能够均匀分散在保存剂中，且储存在该保存剂中的肌钙蛋白被氧化或降解的几率减少，提高长期保存肌钙蛋白的稳定性。具体地，离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸二钾中的至少一种。离子螯合剂可以和溶液中的金属离子的螯合，抑制蛋白水解酶的活性，避免肌钙蛋白被水解。具体地，蛋白保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白和明胶中的至少一种。蛋白保护剂可以减少保存剂中的肌钙蛋白被氧化。特别是针对低浓度的肌钙蛋白具有良好的保护作用。具体地，糖类物质选自甘露醇、葡萄糖和蔗糖中的至少一种。糖类物质分子量较小，对于小分子物质具有维稳的作用。在其中一个实施方式中，该保存剂中还含有浓度为5mg/mL～16mg/mL的无机盐，无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化镁和硫酸钾中的至少一种。一定浓度的无机盐能够调节溶液中的盐离子浓度，使得肌钙蛋白不容易变性。在其中一个实施方式中，该保存剂中还含有体积分数为0.5％～8％的促溶剂，促溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的至少本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肌钙蛋白的保存剂，其特征在于，所述保存剂中含有溶剂以及如下组分：

【技术特征摘要】
1.一种肌钙蛋白的保存剂，其特征在于，所述保存剂中含有溶剂以及如下组分：其中，所述离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸二钾中的至少一种，所述蛋白保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白和明胶中的至少一种，所述糖类物质选自甘露醇、葡萄糖和蔗糖中的至少一种。2.根据权利要求1所述的保存剂，其特征在于，所述保存剂中还含有浓度为5mg/mL～16mg/mL的无机盐，所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化镁和硫酸钾中的至少一种。3.根据权利要求1所述的保存剂，其特征在于，所述保存剂中还含有体积分数为0.5％～8％的促溶剂，所述促溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的至少一种。4.根据权利要求1所述的保存剂，其特征在于，所述保存剂中还含有浓度为1mg/mL～10mg/mL的pH值缓冲剂，所述pH值缓冲剂中含有磷酸氢二钠和柠檬酸，所述磷酸氢二钠和所述柠檬酸的摩尔比为1～3:0.6～1。5.根据权利要求1所述的保存剂，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙康成，王益琼，刘莉莉，
申请(专利权)人：菲鹏生物股份有限公司，广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44