一种肌钙蛋白的检测试剂盒。试剂盒盒体内包括：试剂R1：缓冲液、聚乙二醇、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白；试剂R2：缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、吐温-20、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白。通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生一系列反应，再将反应物置于半/全自动生化分析仪下，检测主波长500nm处吸光度变化的速度，从而测算出肌钙蛋白的浓度大小。本试剂盒具有准确、稳定、方便的优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药
，具体地说涉及一种检测人肌钙蛋白的检测试剂盒。
技术介绍
肌钙蛋白又称肌钙蛋白I(cTnl)，是心肌钙蛋白复合物的亚单位，存在于心肌肌原纤维细肌丝上，是心肌细胞的重要结构蛋白。在心肌细胞膜完整时cTnl不能透过细胞膜进入血循环，当心肌细胞因缺血缺氧而发生变性坏死时，cTnl可通过破损的细胞膜弥散进入细胞间质，经淋巴回流入血。cTnl具有在血中出现时间早、敏感度高、特异性强和诊断窗口期长等特点，是诊断急性心肌梗死的理想指标。目前已知的测定肌钙蛋白的方法有电化学发光免疫检测法(ECLIA);酶联荧光分析法(ELFA)。这些方法具有操作繁琐、耗时长、过度浪费资源的缺点，不适于常规检验。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种肌钙蛋白的检测试剂盒。该试剂盒可直接应用于全自动生化分析仪上，结果准确性强、试剂稳定性好、使用方便、便于大规模推广。本专利技术的另一目的是提供上述检测试剂盒的生产制备及使用方法。为实现上述目的，本专利技术提供的试剂盒组成为 试剂Rl :缓冲液、聚乙二醇、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白； 试剂R2:缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、吐温-20、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白。本专利技术提供的上述试剂盒的制备方法及操做步骤如下 (a)按下列比例配制好试剂 试剂Rl Tris 缓冲液 200-220mmol/L 聚乙二醇5-10 mmol /I, 叠氮钠1-5 mmol/L 乙二胺四乙酸钠l_5mmol/L 牛血清白蛋白 l-5mmol/L ; 试剂R2 Tris 缓冲液 200-220mmol/L 结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子 3.5-5% (v/v) 吐温-20l-5mmol/L 叠氮钠0. 5-3 mmol/L 乙二胺四乙酸钠l_5mmol/L 牛血清白蛋白 l_5mmol/L、(b)将试剂与待测样本按一定比例混合，使其完全反应； (C)用半/全自动生化分析仪测定吸光度变化值； Cd)根据吸光度变化值计算出样本中肌钙蛋白的浓度。具体实施例方式下述实施例是为了更详细的解释本专利技术，但不应理解为本专利技术局限于此。实施例I : 本专利技术的试剂盒举例是双试剂，其中 试剂Rl Tris 缓冲液 200mmol/L 聚乙二醇8 mmol /I, 叠氮钠5 mmol/L 乙二胺四乙酸钠5mmol/L 牛血清白蛋白 5mmol/L ; 试剂R2 Tris 缓冲液 200mmol/L 结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子 5% (v/v) 吐温 _20Smmol /I, 叠氮钠3 mmol/L 乙二胺四乙酸钠5mmol/L 牛血清白蛋白 5mmol/L。实施例2 :试剂盒使用方法。I.试剂准备，试剂为液体双试剂，开瓶即用，其中 试剂Rl Tris 缓冲液 200mmol/L 聚乙二醇8 mmol /I, 叠氮钠5 mmol/L 乙二胺四乙酸钠5mmol/L 牛血清白蛋白 5mmol/L ; 试剂R2 Tris 缓冲液 200mmol/L 结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子 5% (v/v) 吐温 _20Smmol /I, 叠氮钠3 mmol/L 乙二胺四乙酸钠5mmol/L 牛血清白蛋白 5mmol/L。2.全自动生化仪参数设置 (a)检测温度37°C (b)检测波长主波长为500nm;副波长为700 nm ；、(C)反应时间8分20秒，其中，温育时间3分钟，反应时间100秒，检测时间220秒。3.检测步骤(全部在全自动生化分析仪中完成) (a)取150ii L试剂I和25 ii L血清样本混匀； (b)将混匀后的溶液在37°C温育3分钟；(c)添加50ii L试剂2，反应100秒后，在500nm条件下检测220秒的吸光度变化。4.通过读取的连词吸光度值的计算出肌钙蛋白的浓度。本专利技术具有的优点 该试剂盒结果准确性强、试剂稳定性好、使用方便、便于大规模推广。所需检测仪器(生化分析仪)在各大医院和检测中心普遍使用。权利要求1.一种肌钙蛋白检测试剂盒，其组成为试剂R1、试剂R2，其中a、试剂Rl 包括200-220mmol/L Tris 缓冲液、5-10 mmol/L 聚乙二醇、1_5 mmol/L 叠氮钠、l-5mmol/L乙二胺四乙酸钠、l_5mmol/L牛血清白蛋白； b、试剂R2200-220mmol/L Tris缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、l_5mmol/L 吐温 _20、0. 5-3 mmol/L 叠氣纳、l_5mmol/L 乙二胺四乙酸纳、l-5mmol/L 牛血清白蛋白。2.权利要求I的试剂盒，其特征在于试剂R2中的肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子的制备方法为10. 5mg/ml的肌钙蛋白单克隆抗体与10%的乳胶颗粒(直径50_100nm)，加入到200-220mmol/L Tris缓冲液中，震荡反应4小时，离心去上清，再用200-220mmol/L Tris缓冲液稀释至0. 5%，并加入0. 1-0. 3 mmol/L叠氮钠。3.上述试剂盒的制备和操作方法，主要步骤为 (a)按下列比例配制好试剂 试剂Rl Tris 缓冲液 200-220mmol/L 聚乙二醇5-10 mmol /I, 叠氮钠1-5 mmol/L 乙二胺四乙酸钠l_5mmol/L 牛血清白蛋白 l-5mmol/L ; 试剂R2 Tris 缓冲液 200-220mmol/L 结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子 3.5-5% (v/v) 吐温-20l-5mmol/L 叠氮钠0. 5-3 mmol/L 乙二胺四乙酸钠l_5mmol/L 牛血清白蛋白 l_5mmol/L (b)将试剂与待测样本按一定比例混合，使其完全反应； (c)用半/全自动生化分析仪测定吸光度变化值； Cd)根据吸光度变化值计算出样本中肌钙蛋白的浓度。4.权利要求3的方法，其特征在于，被测样品与试剂比例应控制在I: 5到I : 10之间。5.权利要求3的方法，其特征在于，反应温度为37(±1) °C。6.权利要求3的方法，其特征在于，反应时间为8-12分钟。7.权利要求3的方法，其特征在于，用半/全自动生化分析仪检测的主波长为500nm，副波长为700 nm。全文摘要一种肌钙蛋白的检测试剂盒。试剂盒盒体内包括试剂R1缓冲液、聚乙二醇、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白；试剂R2缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、吐温-20、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白。通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生一系列反应，再将反应物置于半/全自动生化分析仪下，检测主波长500nm处吸光度变化的速度，从而测算出肌钙蛋白的浓度大小。本试剂盒具有准确、稳定、方便的优点。文档编号G01N33/68GK102749460SQ20121026223公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月27日 优先权日2012年7月27日专利技术者张雷 申请人:北京恩济和生物科技有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种肌钙蛋白检测试剂盒，其组成为：试剂R1、试剂R2，其中：a、试剂R1包括：200？220mmol/L？Tris缓冲液、5？10？mmol/L聚乙二醇、1？5？mmol/L叠氮钠、1？5mmol/L乙二胺四乙酸钠、1？5mmol/L牛血清白蛋白；b、试剂R2：200？220mmol/L？Tris缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、1？5mmol/L吐温？20、0.5？3？mmol/L叠氮钠、1？5mmol/L乙二胺四乙酸钠、1？5mmol/L牛血清白蛋白。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张雷，
申请(专利权)人：北京恩济和生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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