一种针对小细胞肺癌的Car‑NK细胞的制备方法技术

技术编号:16996557 阅读:52 留言:0更新日期:2018-01-10 21:04
本发明专利技术公开了一种针对小细胞肺癌的Car‑NK细胞的制备方法,该方法包括如下步骤:采集患者外周血并通过Ficoll法分离NK细胞;将人外周血单个核细胞置于NK培养基中,调整细胞浓度后置于培养箱中连续培养48‑72h,收集贴壁细胞;将细胞加入至NK培养基中,继续培养12‑15d,每3d补充一次培养液;将慢病毒对NK细胞进行转染并扩增培养,获得CAR‑NK细胞;制备小细胞肺癌细胞制剂。

A preparation method for small cell lung cancer Car cells NK

The invention discloses a preparation method for small cell lung cancer Car NK cells, the method comprises the following steps: collecting the peripheral blood of patients and NK were isolated by Ficoll method; the mononuclear cells of peripheral blood in NK culture medium and cultured for 48 72h adjust the cell concentration in culture in the box, collect the adherent cells; cells were added to NK culture medium and cultured for 12 15d, every 3D added a medium; lentivirus NK cells were transfected and cultured CAR NK cells; the preparation of small cell lung cancer cells.

【技术实现步骤摘要】
一种针对小细胞肺癌的Car-NK细胞的制备方法
本专利技术属于生物医学领域,特别是涉及一种针对小细胞肺癌的Car-NK细胞的制备方法。
技术介绍
小细胞肺癌是肺癌的基本类型之一,属于未分化癌,其病理类型包括燕麦细胞型、中间细胞型和复合燕麦细胞型。三分之一的肺癌患者属于这种类型。小细胞肺癌是一种恶性程度较高的肿瘤,生物学行为恶劣,预后凶险。以同样播散范围比较,小细胞肺癌较其他类型肺癌诊断前的症状期短,确诊后的生存期亦短。对于小细胞肺癌患者的生存周期,医学界一直没能有一个确切的结论。首先小细胞肺癌本身也是一个系统的概念,没有完全雷同的病例出现过,故无法进行横向类比。其次小细胞肺癌的患者本身情况是其生存周期的决定性因素,患者的个体性差异,决定了小细胞肺癌的生存周期不尽相同。患者身体机能的改善是决定小细胞肺癌晚期的生存期的重要因素,患者身体机能优秀,免疫系统功能强大,就足以抵抗肿瘤的扩展或者持续转移。最后小细胞肺癌的治疗进展状况,也是决定患者生存周期的重要因素。而治疗的根本,其实也取决于患者的自身免疫能力,免疫能力强的患者,也能更好的耐受各种化学药剂的治疗。所以小细胞肺癌患者的治疗关键,在于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种针对小细胞肺癌的Car‑NK细胞的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:S1、采集患者外周血并通过Ficoll法分离NK细胞;S2、将S1中处理后人外周血单个核细胞置于NK培养基中,调整细胞浓度为3‑5x10

【技术特征摘要】
1.一种针对小细胞肺癌的Car-NK细胞的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:S1、采集患者外周血并通过Ficoll法分离NK细胞;S2、将S1中处理后人外周血单个核细胞置于NK培养基中,调整细胞浓度为3-5x105,置于37℃,5%CO2培养箱中连续培养48-72h,收集贴壁细胞;S3、将S2中收集的细胞加入至NK培养基中,调整细胞浓度为1-2x105,继续培养12-15d,每3d补充一次培养液;S5、将慢病毒对S4中的NK细胞进行转染并扩增培养,获得CAR-NK细胞;S6、制备小细胞肺癌细胞制剂。2.根据权利要求1所述的一种针对小细胞肺癌的Car-NK细胞的制备方法,其特征在于:所述S1中的具体步骤为,采集患者外周血100mL至管...

【专利技术属性】
技术研发人员:张正亮
申请(专利权)人:安徽惠恩生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:安徽,34

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