一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7‑胶原膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)粘附的E7‑胶原膜及其制备方法。本发明专利技术以天然生物材料胶原为原料，通过双官能度交联剂sulfo‑SMCC在胶原表面接枝E7多肽。采用该方法制备的胶原膜具有可显著促进BMSCs粘附的优点，且具有良好的生物相容性。干细胞具有多能性，被研究用于修复多种组织的结构与功能，本材料促进干细胞粘附的修饰方法，可广泛应用于多种组织修复材料，具有良好的应用前景。

A E7 promote collagen membrane and bone marrow mesenchymal stem cell adhesion and preparation method thereof

The invention discloses a method for promoting bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) E7 collagen membrane adhesion and preparation method thereof. The invention uses natural biomaterials collagen as raw material, through the bifunctional crosslinking agent sulfo SMCC on the surface of E7 grafted collagen polypeptide. The collagen membrane prepared by this method has the advantage of significantly promoting BMSCs adhesion and has good biocompatibility. Stem cells are pluripotent, and have been used to repair the structure and function of multiple tissues. The modified method of stem cell adhesion can be widely applied to various tissue repair materials, and has good application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7-胶原膜及其制备方法
本专利技术涉及E7-胶原膜及其制备方法，特别涉及一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7-胶原膜及其制备方法。
技术介绍
近年来，具有多分化潜能的干细胞如胚胎干细胞、表皮干细胞、脂肪干细胞以及骨髓间充质干细胞(BMSCs)等被广泛应用于皮肤的再生修复。其中，MSCs因其来源丰富、分离和培养方法成熟以及具有促进皮肤愈合和降低机体免疫排斥等优势，被认为是实现皮肤再生的重要干细胞之一。构建基于MSCs的皮肤替代物往往需要一定数量的MSCs。目前，离体培养方法被广泛应用于MSCs的纯化与扩增。然而，体外扩增过程耗时长；更为重要的是，离开体内微环境后，MSCs易丧失其干细胞特性。大量研究显示体外植入的MSCs死亡率高(75％的MSCs在两周内死亡)，只有少量MSCs直接参与皮肤再生与重建。近年来，随着再生医学的发展，组织原位诱导再生的思想得到认同和重视，并已在骨、真皮和神经等组织的再生修复中得到证明和应用。组织或器官的原位诱导再生，是利用机体自然愈合和再生机制，以再生医学材料为再生模板，通过材料特性(如孔结构、化学组成、特异性蛋白位点以及活性信本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7‑胶原膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)在酸性条件下配制质量浓度为0.5％的胶原溶液，37℃搅拌均匀，得到胶原溶液。将胶原溶液旋涂于玻片表面，置于37度烘箱中充分干燥，得到胶原膜；(2)用纯水配置sulfo‑SMCC浓缩液，并用pH 7.2的PBS缓冲液稀释，得到交联剂sulfo‑SMCC反应液；(3)将胶原膜浸泡于上述sulfo‑SMCC反应液中，室温浸泡至少1小时；(4)用pH7.0的PBS缓冲液清洗胶原膜去除多余sulfo‑SMCC，将E7多肽溶于pH 7.0的PBS缓冲液中配置成E7反应液，将上述胶原膜浸泡于E7反应液中37℃反应至少2小时；...

【技术特征摘要】
1.一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7-胶原膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)在酸性条件下配制质量浓度为0.5％的胶原溶液，37℃搅拌均匀，得到胶原溶液。将胶原溶液旋涂于玻片表面，置于37度烘箱中充分干燥，得到胶原膜；(2)用纯水配置sulfo-SMCC浓缩液，并用pH7.2的PBS缓冲液稀释，得到交联剂sulfo-SMCC反应液；(3)将胶原膜浸泡于上述sulfo-SMCC反应液中，室温浸泡至少1小时；(4)用pH7.0的PBS缓冲液清洗胶原膜去除多余sulfo-SMCC，将E7多肽溶于pH7.0的PBS缓冲液中配置成E7反应液，将上述胶原膜浸泡于E7反应液中37℃反应至少2小时；所述的E7多肽的序列为EPLQLKM；(5)用纯水清洗胶原膜，氮气吹干。2.根据权利要求书1所述的一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7-胶原膜的制备方法，其特征在于，所述的酸性条件为质量浓度3％的醋酸溶液。3.根据权利要求书1所述的一种促进骨髓间充质干细胞粘附的E7-胶原膜的制备方法，其特征在于，所述的交联剂sulfo-SMCC反应液中sulfo-SMCC的浓度为0.25-1mg/mL。4.根据权利要求书1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：马列，郑晓闻，潘欣，庞倩，高长有，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33