The invention belongs to the field of plant tissue culture and breeding, and discloses a preparation method, including: A, muskmelon haploid of muskmelon pollen were inactivated by radiation; B, pollen on the day of open pollination, pistillate flowers muskmelon; C selected 12 days after pollination, 11 ovary, from immature embryo culture in MS medium; D, pick out the green embryos were cultured in induction medium; E, to shoot the long after the leaves by flow cytometry ploidy identification; F, identified as haploid plants in rooting medium on rooting, the formation of haploid plants. This method is suitable for the variety of muskmelon with thin skin type in China. The cultivated haploid plants can be used directly as breeding materials through field screening, which can be applied to the selection of melon varieties and accelerate the process of melon breeding.
【技术实现步骤摘要】
一种甜瓜单倍体的创制方法
本专利技术涉及植物组织培养和育种技术,具体涉及一种甜瓜单倍体的创制方法。
技术介绍
甜瓜是重要的园艺作物之一,新品种的推广和普及对于甜瓜生产的发展具有非常重要的作用。选育优质、丰产、抗逆性强、兼抗多种甜瓜主要病害、适应性强的甜瓜品种是甜瓜育种工作的发展方向。但传统的甜瓜育种方法存在分离后代难以稳定、聚合多种目标性状难度大,育种周期长,育种效率低等问题。仅靠传统的常规育种方法和现有种质资源难于育成突破性的品种。单倍体育种方法利用花药培养、未受精子房培养以及辐射花粉授粉诱导后胚抢救等方法诱导产生单倍体,再对单倍体进行加倍,使每个单倍体带有的单一的染色体加倍成对,成为具有正常活力、能够正常结实的纯合体,其遗传性状稳定、不再产生分离,经过筛选后可直接作为育种材料加以利用。单倍体育种具有育种周期短(从杂交到获得稳定的纯系只需要2个世代的时间)、育种效率高(单倍体的基因型和表现性一致,提高了主要性状筛选的可靠性),是目前在很多作物上广泛采用的一种育种方法。目前单倍体育种在水稻等禾本科作物和十字花科蔬菜上应用较多,主要是花粉等小孢子培养。葫芦科蔬菜利用小孢子培养诱导单倍体比较困难,目前应用较多的是大孢子培养。甜瓜目前采用小孢子途径没有获得过成功,现在创制甜瓜单倍体都是采用大孢子途径,包括子房离体培养、胚珠离体培养和孤雌生殖诱导单倍体胚。前两种方法诱导单倍体的成功与否以及诱导的频率影响因素多,试验难度大;而孤雌生殖诱导单倍体胚,方法相对简单,技术可重复性好,成功率高,但诱导效率不高。针对上述问题,本专利技术采用辐射灭活花粉诱导甜瓜孤雌生殖,然后进 ...
【技术保护点】
一种甜瓜单倍体的创制方法,包括下述步骤:1)取清晨开花前的甜瓜雄花,灭活;2)用步骤1)中的雄花花粉对前一日套袋隔离、当日开放的雌花进行授粉,授粉后继续对雌花进行套袋隔离;3)在授粉后的第11或12天,摘下经过授粉的子房,将表皮清洗干净,在超净工作台上用酒精溶液浸泡后再用升汞溶液浸泡进行消毒,无菌水冲洗后,用无菌纸吸干幼果表面水分,将幼果横切成3‑5mm的薄片,挑取幼胚,接种于MS培养基上;4)在MS培养基上培养10‑12天的幼胚,挑取转为绿色的胚,转到配方为MS+0.3‑0.5mg/L6‑BA+ 2.5%‑3.5% Suc+0.6%‑1.0% Agar+0.15mg/L 活性炭的诱导培养基上进行诱导培养,至芽长出;5)取小植株的芽或叶片0.2‑0.3 cm
【技术特征摘要】
1.一种甜瓜单倍体的创制方法,包括下述步骤:1)取清晨开花前的甜瓜雄花,灭活;2)用步骤1)中的雄花花粉对前一日套袋隔离、当日开放的雌花进行授粉,授粉后继续对雌花进行套袋隔离;3)在授粉后的第11或12天,摘下经过授粉的子房,将表皮清洗干净,在超净工作台上用酒精溶液浸泡后再用升汞溶液浸泡进行消毒,无菌水冲洗后,用无菌纸吸干幼果表面水分,将幼果横切成3-5mm的薄片,挑取幼胚,接种于MS培养基上;4)在MS培养基上培养10-12天的幼胚,挑取转为绿色的胚,转到配方为MS+0.3-0.5mg/L6-BA+2.5%-3.5%Suc+0.6%-1.0%Agar+0.15mg/L活性炭的诱导培养基上进行诱导培养,至芽长出;5)取小植株的芽或叶片0.2-0.3cm2,制备单细胞悬浮液,浓度为1.0×10...
【专利技术属性】
技术研发人员:戴照义,王运强,刘志雄,郭凤领,龚钰,
申请(专利权)人:湖北省农业科学院经济作物研究所,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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