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一种八角茴香离体组培快繁方法技术

技术编号:16879633 阅读:48 留言:0更新日期:2017-12-26 21:26
本发明专利技术公开了一种八角茴香离体组培快繁方法,特征是单叶互生,革质,披针形至长椭圆形,先端急尖或渐尖,基部楔形,全缘,下面被柔毛,叶脉羽状,中脉下陷,侧脉稍凸起,叶柄粗壮。花单生于叶腋,花圆球形,淡粉红色或深红色,花柱短,基部肥厚,柱头细小。瞢荚果成星芒状排列,幼时绿色,成熟时有红棕色,星状体径约3厘米,开裂。种子扁卵形,棕色有光泽。本发明专利技术以八角茴香种子为外植体,通过愈伤组织诱导、增殖、分化、生根、炼苗移栽等过程成功获得了八角茴香离体再植株,建立八角茴香组织培养快速繁殖技术体系,为节约栽培生产中的用种量,提高其药材的产量提供一条行之有效的途径。

A rapid propagation method for in vitro culture of anise

The invention discloses a star anise in vitro micropropagation method, characteristics of single leaf alternate, leathery, lanceolate to oblong, apex acute or acuminate, base cuneate, margin entire, puberulent below, veins pinnate, midrib subsidence, lateral veins slightly raised, petiole stout. Flowers solitary in axils of leaves, flowers and spherical, pale pink or dark red, style is short, basally fleshy, stigma small. Meng pod into astral like arrangement, green when young, mature red brown, stellate body diameter of about 3 cm, cracking. Seed flat ovate, brown lustrous. The invention uses anise seeds as explants through callus induction, proliferation, differentiation, rooting and transplanting process successfully isolated and star anise plant, cultivation technology system of rapid propagation of establishment of star anise, for saving cultivation in the production of seed quantity, provide an effective way to improve the the production of medicinal materials.

【技术实现步骤摘要】
一种八角茴香离体组培快繁方法
本专利技术属于培育
,具体地说,涉及一种八角茴香离体组培快繁方法。
技术介绍
八角茴香又名:大茴香、大料、舶茴香、八角大茴、大八角、八角。形态特征:常绿乔木,高10余米,树皮灰色至红褐色。单叶互生,革质,披针形至长椭圆形,先端急尖或渐尖,基部楔形,全缘,下面被柔毛,叶脉羽状,中脉下陷,侧脉稍凸起,叶柄粗壮。花单生于叶腋,花圆球形,淡粉红色或深红色,花柱短,基部肥厚,柱头细小。瞢荚果成星芒状排列,幼时绿色,成熟时有红棕色,星状体径约2.5~3厘米,开裂。种子扁卵形,棕色有光泽。第一次花期2~3月,果期8~9月。第二次花期在第一次果期之后,第二次果期为翌年2~3月。果实采摘后,微火烘干,或用开水浸泡片刻,待果实转红后晒干。生长环境:分布于广西、云南、广东、福建、贵州、台湾地区。此物多生长温暖多雾,湿度较大的山地。性味功能:味辛、甘、性温。温阳散寒,理气止痛。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以八角茴香种子为外植体,通过愈伤组织诱导、增殖、分化、生根、炼苗移栽等过程成功获得八角茴香离体再植株,建立八角茴香组织培养快速繁殖技术体系,设备简单,操作容易,见效快,繁育的树苗粗壮,成活率高的一种八角茴香离体组培快繁方法。本专利技术的一种八角茴香组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,用75%酒精消毒65s,再用0.1%升汞溶液消毒16min,最后用无菌水漂洗6次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中,接种后每天光照25小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养21天后统计萌发率,萌发培养基为:1/2MS+0.06mg/LNAA+31g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(2)愈伤诱导:当无菌苗的子叶刚展开时,取无菌苗的茎尖作为外植体,用解剖刀切成0.6cm左右长度,接种于用于愈伤诱导的培养基中培养,接种后每天光照15小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为75%的条件下培养32天后统计诱导率;愈伤诱导培养基为:MS+4.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA+1.2mg/LKT+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(3)增殖培养:将步骤(2)诱导得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入增殖培养基进行扩繁,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计增殖情况;增殖培养基为:MS+2.2mg/L6-BA+0.6mg/LNAA+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(4)分化培养:将步骤(3)增殖得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入分化培养基诱导不定芽的产生,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计分化情况;分化培养基为:MS+1.2mg/LKT+2.2mg/LNAA+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(5)生根培养:将步骤(4)分化得到不定芽从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计生根情况;生根培养基为:1/2MS+1.2mg/LIBA+0.6mg/LNAA+1.2%活性炭+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(6)炼苗移栽:生根一个月后,打开其瓶口,并灌入无菌水,以保证其水分供应,8天后取出生根苗洗净根上所带培养基,移栽到基质由泥炭土:珍珠岩:蛭石=3:2:1组成的基质中,用留有透气孔的薄膜覆盖,放置在阴凉透气的室内,16天将薄膜揭去,然后室外培养,隔天浇一次水,移栽32天后统计成活率。本专利技术的优点是:以八角茴香种子为外植体,通过愈伤组织诱导、增殖、分化、生根、炼苗移栽等过程成功获得了八角茴香离体再植株,建立八角茴香组织培养快速繁殖技术体系,为节约栽培生产中的用种量,提高其药材的产量提供了一条行之有效的途径。具体实施方式以下实施例是对本专利技术的进一步说明,不是对本专利技术的限制。实施例1(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,在超净工作台中用手术剪刀剥去种皮,用70%酒精消毒31s,再0.1%升汞溶液消毒9min,最后用无菌水漂洗4次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中。接种后置于每天光照25小时,光照强度为1200lx,置于培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养21天后萌发率达到95%。所述的萌发培养基为:1/2MS+0.03mg/LNAA+16g/L蔗糖+3.6g/L琼脂,pH为5.6。(2)愈伤诱导:当无菌苗的子叶刚展开时,取无菌苗的茎尖作为外植体,用解剖刀切成0.6cm左右长度,接种于用于愈伤诱导的培养基中培养。接种后置于每天光照11小时,光照强度为1200lx,置于培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养31天后诱导率达到90%。愈伤诱导培养基为:MS+1.6mg/L6-BA+0.35mg/LNAA+0.8mg/LKT+24g/L蔗糖+4.6g/L琼脂,pH为5.5。(3)增殖培养:将步骤(2)诱导得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照12小时,光照强度为2200lx,置于培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养31天后增殖倍数达到4.6倍。增殖培养基为:MS+1.6mg/L6-BA+0.35mg/LNAA+20g/L蔗糖+3.9g/L琼脂,pH为5.5。(4)分化培养:将步骤(3)增殖得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入分化培养基诱导不定芽的产生。接种后置于每天光照11小时,光照强度为2200lx,置于培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养31天后分化率达到90%,平均不定芽数为4.5个。分化培养基为:MS+0.8mg/LKT+1.6mg/LNAA+31g/L蔗糖+4.6g/L琼脂,pH为5.5。(5)生根培养:将步骤(4)分化得到不定芽从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根。接种后置于每天光照11小时,光照强度为2200lx,置于培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养31天后生根率92%。生根培养基为:1/2MS+0.8mg/LIBA+0.25mg/LNAA+0.6%活性炭+14g/L蔗糖+3.6g/L琼脂,pH为5.5。(6)炼苗移栽:生根一个月后,打开其瓶口,并灌入无菌水,以保证其水分供应,6天后取出生根苗洗净根上所带培养基,移栽到基质由泥炭土:珍珠岩:蛭石=3:2:1组成的基质中。用留有透气孔的薄膜覆盖,放置在阴凉透气的室内,11天将薄膜揭去,然后置于室外培养,隔天浇一次水,移栽31天后成活率达到92%以上。实施例2(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,在超净工作台中用手术剪刀剥去种皮,用75%酒精消毒46s,再0.2%升汞溶液消毒11min,最后用无菌水漂洗4次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中。接种后置于每天光照25小时,光照强度为1600lx,置于培养温度为26℃,空气相本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种八角茴香离体组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,用75%酒精消毒65s,再用0.1%升汞溶液消毒16min,最后用无菌水漂洗6次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中,接种后每天光照25小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养21天后统计萌发率,萌发培养基为:1/2MS+0.06mg/LNAA+31g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(2)愈伤诱导:当无菌苗的子叶刚展开时,取无菌苗的茎尖作为外植体,用解剖刀切成0.6cm左右长度,接种于用于愈伤诱导的培养基中培养,接种后每天光照15小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为75%的条件下培养32天后统计诱导率;愈伤诱导培养基为:MS+4.0mg/L6‑BA+0.6mg/LNAA+1.2mg/L KT+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(3)增殖培养:将步骤(2)诱导得到的愈伤组织切割成0.6cm

【技术特征摘要】
1.一种八角茴香离体组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,用75%酒精消毒65s,再用0.1%升汞溶液消毒16min,最后用无菌水漂洗6次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中,接种后每天光照25小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养21天后统计萌发率,萌发培养基为:1/2MS+0.06mg/LNAA+31g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(2)愈伤诱导:当无菌苗的子叶刚展开时,取无菌苗的茎尖作为外植体,用解剖刀切成0.6cm左右长度,接种于用于愈伤诱导的培养基中培养,接种后每天光照15小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为75%的条件下培养32天后统计诱导率;愈伤诱导培养基为:MS+4.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA+1.2mg/LKT+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(3)增殖培养:将步骤(2)诱导得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入增殖培养基进行扩繁,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计增殖情况;增殖培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈金水
申请(专利权)人:陈金水
类型:发明
国别省市:广西,45

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