一种测定毛发中吡咯加合物含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定毛发中吡咯加合物含量的方法，通过筛选不同消化方法，最终确定用0.075g毛发加0.72mol/L NaOH 5ml混匀，56℃水浴加热1h溶解，然后用浓盐酸调至pH8，再加入2％胰酶至10ml，继续加热消化1h，得消解液；然后建立标准曲线，用4‑(二甲氨基)苯甲醛定量测定毛发中吡咯加合物含量。采用本发明专利技术的方法，毛发的最低检出限为0.07±0.01nmol/mg蛋白。本发明专利技术的测定毛发中吡咯加合物含量的方法可用于测定正己烷、2,5‑己二酮引起的慢性中毒。

A method for the determination of pyrrole adduct content in hair

The invention discloses a method for the determination of hair in the pyrrole adduct levels, by screening different digestion methods, and ultimately determine the use of 0.075g 0.72mol/L and NaOH 5ml hair mix, 56 C water bath heating 1H and then dissolved with concentrated hydrochloric acid to pH8, adding 2% trypsin to 10ml, 1H to continue heating digestion. The digestion solution; then establish the standard curve with 4 (two dimethylamino) benzaldehyde quantitative determination of pyrrole adducts content in hair. With this method, the minimum detection limit of hair is 0.07 + 0.01nmol/mg protein. Methods the hair of pyrrole adducts determination of the content of the invention can be used for determination of n-hexane, chronic poisoning caused by 2,5 5-hexanedione.

【技术实现步骤摘要】
一种测定毛发中吡咯加合物含量的方法
本专利技术涉及吡咯加合物的含量测定
，具体涉及一种测定毛发中吡咯加合物含量的方法。
技术介绍
正己烷(n-hexane，CH3(CH2)4CH3)，是一种常用的饱和脂肪烃类工业溶剂，主要用于粘胶配制、除污、干洗、植物油提取、制鞋、印刷、油漆、制药、家具制造及电子元件制造等行业。近年来，在我国正己烷诱发的职业中毒事件时有发生，长期慢性低浓度接触可出现周围神经病变。患者主要表现为感觉运动神经功能减弱，手足发麻无力，感觉减退，严重者可表现为肌肉萎缩、双下肢瘫痪。正己烷导致慢性周围神经病变的机制至今尚不清楚，现存在多种假说，其中正己烷代谢物-----2,5-己二酮(2,5-hexandione，2,5-HD)与神经丝等蛋白质结合形成吡咯加合物(Pyrroleadducts)使得神经轴索变性的假说受到大多数研究者的认同。因此，研究吡咯加合物成为研究正己烷中毒的重点，但有关吡咯加合物的文献报道较少，KesslerW等人曾发现吡咯加合物能与埃利希试剂反应后呈现特异性紫红色，通过测定光密度可计算吡咯加合物浓度。对于吡咯加合物的检测样本，目前多采用动物的血液和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于吡咯加合物含量测定的毛发样品的处理方法，其特征在于，步骤如下：(1)毛发样品的前处理：将毛发样品与清洁剂和热水混匀并搅拌，再用无水乙醇浸泡脱脂处理，静置室温干燥；(2)消化处理：向前处理后的毛发样品中加入NaOH溶液，混匀，水浴加热溶解，然后调至pH＝8；再加入胰酶溶液继续加热消化0.5‑1.5h，得毛发样品消解液。

【技术特征摘要】
1.一种用于吡咯加合物含量测定的毛发样品的处理方法，其特征在于，步骤如下：(1)毛发样品的前处理：将毛发样品与清洁剂和热水混匀并搅拌，再用无水乙醇浸泡脱脂处理，静置室温干燥；(2)消化处理：向前处理后的毛发样品中加入NaOH溶液，混匀，水浴加热溶解，然后调至pH＝8；再加入胰酶溶液继续加热消化0.5-1.5h，得毛发样品消解液。2.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(2)中，所述NaOH溶液的浓度为0.72mol/L；前处理后的毛发样品与NaOH溶液加入量的比为0.075g：5ml。3.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(2)中，水浴加热的温度为56℃，水浴加热的时间为1h。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，采用12mol/L的浓盐酸滴定至pH＝8。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，加入胰酶溶液后在56℃消化1h。6.一种测定毛发中吡咯加合物含量的方法，其特征在于，步骤如下：(1)按权利要求1所述的方法处理毛发样品，得毛发样品消解液；(2)将毛发样品消解液离心，取上清中间液，加入盐酸胍、无水乙醇和埃利希试剂，震荡后测定吸光度值，利用内标工作曲线测定毛发样品消解液中吡咯加合物浓度；(3)测定毛发样...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢克勤，黎显杰，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东,37