一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法技术

技术编号:16810674 阅读:74 留言:0更新日期:2017-12-16 06:45
本发明专利技术公开了一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法,属于生物检测技术领域,本发明专利技术应用一对伯氏疏螺旋体特异性引物(SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2)和一条荧光标记探针(SEQ ID NO.3)进行实时荧光PCR扩增,检测扩增产物荧光信号,来判断样品中是否携带伯氏疏螺旋体病原。检测方法简单、快速、灵敏、准确、特异,与模板互补配对的荧光探针提高了特异性,有效地避免假阳性和假阴性,检测时荧光信号自动收集,避免普通PCR反应后电泳分析中人为因素干扰,检测过程完全闭管,不需电泳等后处理,消除了PCR产物的污染。本发明专利技术检测方法具有特异性高、稳定性好的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法
本专利技术属于生物检测
,涉及一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法。
技术介绍
伯氏疏螺旋体属于原核生物界(KingdomMonera)、螺旋体目(Spirochaetidae)、螺旋体科(Spirochaetaceae)、疏螺旋体属(Borrelia)(也称包柔式螺旋体属)。革兰氏染色阴性,但不易着色,吉姆萨染、荧光染料染色着色良好,显微镜下可看到细长的螺旋体。伯氏疏螺旋体具有多个鞭毛,有大而疏的螺旋3-10个,长10-30μm,宽0.2-0.25μm,由表层、外膜、鞭毛、原生质四部分组成。在液体培养基中数个螺旋体可不规则地缠绕在一起,呈扭曲状态运动。经蜱传播,可感染禽类等动物,可引起禽螺旋体病(AvianSpirochaetosis,AS)。对养殖业及畜禽产品安全存在威胁,然而现在的伯氏疏螺旋体检测时间长,因此亟需一种快速检测伯氏疏螺旋体的方法,用于进出口检疫。
技术实现思路
鉴于此,本专利技术的目的是建立一种快速检测伯氏疏螺旋体的方法,可用于食品安全或肉制品的进出口快速检测。为了实现上述目的本文档来自技高网...
一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法

【技术保护点】
一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测用引物,其特征在于:包括一对特异性引物和一条荧光标记探针,其中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1,下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.2,探针的核苷酸序列为SEQ ID NO.3。

【技术特征摘要】
1.一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测用引物,其特征在于:包括一对特异性引物和一条荧光标记探针,其中上游引物的核苷酸序列为SEQIDNO.1,下游引物的核苷酸序列为SEQIDNO.2,探针的核苷酸序列为SEQIDNO.3。2.根据权利要求1所述一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测用引物,其特征在于:所述荧光标记探针的5'端含有FAM报告荧光染料,3'端含有不发荧光的淬灭基团。3.利用权利要求1或2所述引物检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR非疾...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘生峰陆丽华周庆杨俊张雷李贤良王国民聂福平王昱
申请(专利权)人:重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
类型:发明
国别省市:重庆,50

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